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间接竞争ELISA方法测定水中2,4-D的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以2,4-D-BSA为包被抗原,采用自行制备的2,4-D单克隆特异性抗体6D11建立了水中2,4-D的间接竞争 ELISA检测方法.本研究比较了包被抗原2,4-D-BSA浓度分别为240ng·mL-1、120ng·mL-1和60ng·mL-1的反应体系和竞争反应时间为60min和15min的间接竞争ELISA剂量-反应曲线,确定了当包被抗原浓度为60 ng·mL-1、竞争反应时间为15min时,剂量-反应曲线的IC50值较低.采用上述实验条件分别测定了由PBS缓冲溶液、饮用水、清华大学地下水和圆明园福海地表水配制的2,4-D标准溶液的剂量.反应曲线,发现实际水样的基质效应对检测结果的影响较大;采用实际水样和PBS缓冲溶液配水在含有5%乙醇的PBS缓冲体系中反应的方法,基本上消除了基质效应对检测结果的干扰.采用上述优化试验条件,测定2,4-D浓度分别为0.5mg·L-1、0.125mg·L-1和0.03mg·L-1的加标样品,测定数据的准确度符合痕量有机污染物定量检测对准确度的要求,但是平行样品测定数据之间的变异系数较大,需要进一步改进检测方法,用于实际水样的检测. 相似文献
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为建立环境雌激素的体外快速筛选方法,采用免疫测定介导受体竞争结合试验定量检测环境雌激素.将17β-雌二醇-BSA固定在微孔板上,环境雌激素与微孔板上的17β-雌二醇-BSA竞争性地与雌激素受体结合,与微孔板上17β-雌二醇-BSA结合的受体与雌激素受体的抗体、雌激素受体抗体的二抗形成一个三明治形式的复合物,通过显色剂显色,最后用比色法对试验结果进行定量.结果表明,环境雌激素的浓度与溶液吸光度值成负相关.定量研究可以得到环境雌激素剂量-效应关系曲线,在一定浓度范围内(10ng·L-1~100μg·L-1),溶液的吸光度值与环境雌激素的浓度直接呈现良好的线性关系(R2=0.9583).利用这种方法能检测到的标准品雌二醇的最低浓度为10ng·L-1.以上结果表明,本方法检测环境雌激素操作简便,具有广泛的应用前景. 相似文献
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用于农药残留检测的电流型酶传感器 总被引:1,自引:1,他引:1
利用固定化的乙酰胆碱酯酶(AChE)制作了一种可用于农药残留检测的快捷灵敏的传感器.结果表明,固定化载体为孔径0.450μm硝酸纤维素膜、保护剂牛血清白蛋白(BSA)浓度为1.0%、交联剂戊二醛浓度为5.0%时,固定化酶传感器具有较高的灵敏度和稳定性.用氨基甲酸酯类农药甲萘威为抑制剂,与GC法(GB14877-94)进行对比,当喷洒量为10.0mg·1-1时,GC法测定的结果为9.03mg·1-1,生物传感器法测定的结果为6.56mg·1-1;对有机磷农药甲胺磷而言,当喷洒量为10.0mg·1-1时,GC法测定的结果是9.37mg·1-1,生物传感器法测定的结果是7.27mg·1-1,都能满足快速检测的要求. 相似文献
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油菜根肿休眠孢子间接酶联免疫检测法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
根肿病是由专性寄生菌--芸苔根肿菌感染所引起的一种严重影响十字花科植物生长的植物病害.本文针对根肿病缺乏简便、快速检测方法的问题,制备油菜根肿休眠破碎孢子抗血清,确定抗血清及酶标抗血清最佳工作浓度,优化间接酶联免疫反应条件;优化的抗血清和酶标血清的工作浓度分别为1:2000和1:1000,孢子的饱和包被浓度为107个/mL.确定休眠孢子稀释液的最低检测浓度为10个/mL,建市快速检测油菜根肿菌的间接酶联免疫吸附测定法,该方法稳定、可靠,板间误差和板内误差均小于10.0%.与9种土壤分离得到的真菌和7种土壤常见菌黑曲霉、粉红粘帚霉、立枯丝核菌、产黄青霉、绿色木霉、枯草杆菌、脓杆菌进行特异性实验,其中一种未知菌M1交叉反应率>30%,其余在8.51%~24.88%之间,真菌的交叉反应率普遍高于细菌.对已知孢子浓度的土壤进行了检测,土壤样品休眠孢子浓度的最低检测限度为103个/g. 相似文献
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环状RNA(circRNA)作为一种潜在的肿瘤标志物,其检测对肿瘤的早期筛查和诊断具有重要意义.为了研究和开发circRNA快检方法,建立circRNA的逆转录实时荧光定量超快速聚合酶链式反应(RT-qVPCR)检测方法,并应用到鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的相关检测中.基于超快速聚合酶链式反应(VPCR)技术,设计针对hsa-circ-0000284(circHIPK3)的引物和探针,通过优化退火温度、引物和探针浓度等条件,建立一种circRNA的快检方法;以内参基因GAPDH为对照,建立hsa-circ-0000284的相对定量方法;进一步收集鼻咽癌患者和鼻咽部良性病变患者的组织样本,对鼻咽癌和良性增生组织中的hsa-circ-0000284进行相对定量检测.所建立的circRNA RT-qVPCR快检方法只需25 min就能完成检测,重复性好,结果稳定可靠;hsa-circ-0000284在鼻咽癌中的相对表达量为9.67,在良性组织中的表达量为3.75,差异有统计学意义(F=16.380 5,P <0.001).本研究表明所建立的cir... 相似文献
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我国的生态环境标准极其薄弱,建立生态环境标准体系是我国生态环境保护的迫切需要。借鉴我国目前针对污染防治的环境标准体系,提出了我国生态环境标准体系的基本框架,以及生态环境标准制订的原则和重点。 相似文献
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使用牛血清白蛋白(BSA)与黄曲霉素B_1(AFB_1)的结合物免疫兔子获得了高特异性、高效价的抗AFB_1的抗体,用此抗体建立了测定AFB_1的酶联免疫吸附分析法(ELISA),最低检出限为1.0pg/m。应用于花生、花生酱、玉米和大豆等农产品中AFB_1分析,其回收率在81—116%范围,变异系数在1.51—10.65%之间。此法具有简单、快速和适于大批量样品分析等优点。 相似文献
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两栖动物在环境污染生物监测中的应用前景 总被引:14,自引:0,他引:14
简单介绍了生物监洲的优越性和选择指示生物的一般标准,沦述了不同生态类群作为指示生物的研究;重点讨论了两栖动物作为指示生物在环境监测中的优越性及其与环境的父系,总结了两栖动物在污染环境中的异常反应,综述了两栖动物作为指示生物在环境污染生物监测中的研究历史和现状,提出了利用两栖动物的形态和行为模式建立水体污染生物监测仪器的可能性,为生物监测提供了科学依据,表1参51 相似文献
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对蕃茄基因转化的受体系统进行了研究结果表明:在蕃茄离体子叶(或子叶切段)培养中,只加细胞分裂素(Zt或BA)即可使不定芽充分分化,而少量生长素对不定芽的分化反而有抑制作用;在所试验过的多种外植体中,以2/3子叶片处切割子叶所产生的外植体用作转化受体最好;不同蕃茄品种、同一品种的不同外植体及同一外植体的不同培养方式等均对转化频率有一定的影响;通过生长素短期刺激诱导,可解决转基因植物生很困难的问题. 相似文献
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酶联免疫吸附分析法测定苯并(a)芘和多氯联苯 总被引:9,自引:0,他引:9
对苯并(a)芘作了五种不同的化学修饰,并与载体蛋白交联,制备出十四种单克隆抗体.经单克隆抗体的筛选和实验条件的优化,建立了测定苯并(a)芘的酶联免疫吸附分析法.以4,4'-二氯联苯为测定多氯联苯的酶联免疫吸附分析法的起始物,作了二种化学修饰,制备出九种多克隆抗体,建立了以羊抗多氯联苯抗体为基础的酶联免疫吸附分析法,并用于土壤中多氯联苯的测定. 相似文献
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水体中隐孢子虫卵囊的检出及其活力分析 总被引:2,自引:0,他引:2
李训德 《应用与环境生物学报》2003,9(1):32-35
从水中检测隐孢子虫卵囊是评价水源传播人类隐孢子虫病风险的第一步,从水中检出的卵囊的活力需要进行测定才能估计水源爆发的真正风险,应用聚丙烯盒式过滤器和美国环保局(USEPA)1622过滤方法的囊式过滤器(Gelman,Michigan,USA),分别过滤了当地(法国鲁昂)的环境水和供给水,并用免疫磁分离技术(IMS)进行分离。用免疫荧光检测法(IFA)从浓缩的水样中检测到了隐孢子虫卵囊。环境水中的卵囊浓度是每升水中0.12-2.7个卵囊;供给水中的卵囊浓度是每升水中0.03-0.06个卵囊,用新生小鼠模型初步评价了检出卵囊的感染力。结果证明了隐孢子虫卵囊在环境中尤其是水中的广泛分布;同时表明,评估水源传播的隐孢子虫病的风险时,不仅要从水中检出卵囊,而且要测定检出的卵囊的活力。表1参22。 相似文献
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两相厌氧消化工艺是近年来发展很快的一种处理有机废水的新技术.本文介绍了该技术的微生物学原理和基本特点,总结了国内外的研究和应用现状,简要分析了该技术的研究动态. 相似文献