欧盟机构更新替代方法数据库

<正>2014年10月2日欧盟动物试验替代方法参考实验室(EURL ECVAM)更新了其替代方法数据库的数据检索系统DBALM2014。此外,已经发布了符合规制要求并且/或正在致癌性、眼刺激性和皮肤致敏性等领域进行验证的下列体外方法:1在6孔和96孔板中的bhas42细胞转化试验;2体外BALB/c 3T3细胞转化分析;3眼刺激分析系统;4人类细胞系活化试验。引自《化学品安全信息周报》2014年第41期总第305期(中国检验检疫科学研究院化学品安全研究所编译)http://www.chinachemicals.org.cn/reported_detail.aspx?contentid=317Class ID=230     

非洲爪蟾肝细胞原代培养方法

非洲爪蟾是研究内分泌干扰物的良好模型动物,其体外肝细胞可用于类雌激素活性评价、污染物代谢等研究.论文探讨了非洲爪蟾肝细胞原代培养的方法,采用两步原位灌注法分离非洲爪蟾肝细胞,通过胶原酶的作用使细胞之间解离,后经过一系列转速的离心,获得纯化的肝实质细胞.研究结果表明,采用此法获得的细胞数量为2.5～5×106个,细胞成活率达95%以上,纯度在95%以上,细胞胞体透亮,折光性强,状态良好.培养24h后贴壁较好,每2d换液1次,可培养8～10d,细胞可满足多种后续实验的要求.     

化学农药对生态环境安全评价研究——Ⅶ.化学农药对蜜蜂的毒性与评价

农药的广泛使用,对非靶生物蜜蜂的威胁不可避免。因此,评价农药对蜜蜂的安全性是新农药开发和评价中不可缺少的组成部分。 本文选择甲基对硫磷、呋喃丹和γ—6663种农药为代表,在实验室模拟条件下用接触法和摄入法测试农药对意大利蜜蜂的毒性。结果表明:接触法试验的3种农药毒性为甲基对硫磷>呋喃丹>γ—666;摄入法为甲基对硫磷=呋喃丹>γ—666。 采用Atkins有关农药对蜜蜂评价的毒性等级划分标准对这3种农药进行安全性评价,结果均属高毒类农药。此结果与国外有关报道基本一致。     

邻苯二甲酸酯类增塑剂的体外细胞毒性评价

邻苯二甲酸酯(Phthalate esters, PAEs)是环境介质中的一类典型的有机污染物。已有研究表明,PAEs具有明显的内分泌干扰毒性,并会对动物和人体的生殖发育与神经系统造成损伤。体外细胞评价模型因具有高通量、测试周期短、成本低和毒性效应易于探明等技术优点,被广泛应用到PAEs毒理学效应的研究中。本文从内分泌干扰毒性、胚胎发育毒性、神经毒性、免疫毒性、遗传毒性以及致癌作用等方面,对PAEs的一些体外细胞毒性评价模型进行了分类和总结,并对其相应的研究进展进行了综述。本文旨在为体外细胞毒性评价模型的有效利用提供借鉴,并对PAEs毒性作用机制的深入研究提供思路和依据。     

非洲爪蟾蝌蚪脑神经细胞体外培养方法的建立(Establishment of an in Vitro Method for Culturing Brain Neurons from Xenopus laevis Tadpoles)

体外培养的神经细胞是神经毒性机制研究和神经毒物筛查的重要材料.目前鼠体外神经细胞的应用最为广泛.鉴于近年来发育生物学的模型动物非洲爪蟾越来越多地应用于毒理学研究,论文建立了一种体外培养非洲爪蟾脑神经细胞的方法.该方法取52～53阶段的非洲爪蟾蝌蚪的脑组织,在L-15培养液中直接吹打获得分散细胞,接种于包被多聚赖氨酸的培养板中,22℃培养.培养细胞状态良好,72小时后神经元细胞初步建立神经网络.用β2tubulin7B9可对脑神经元细胞进行荧光染色,鉴别神经突的生长和神经网络的形成.与鼠脑神经元细胞体外培养方法比较,该方法具有无需胰蛋白酶分离、无需胶质细胞共培养、可同时操作多只脑、能获得大量细胞等简单快捷的特点.因此,体外培养的非洲爪蟾蝌蚪脑神经细胞可作为目前体外神经毒理研究中鼠脑神经元的补充材料,用于神经毒性机制的研究和神经毒物的筛查.     

3D类器官模型的研究进展及其在化学品毒理学评价中的应用展望

化学品毒理学评价主要采用2D细胞培养体系和动物实验模型,但2种模型均存在一定的局限性.2D细胞培养常用特定细胞系,与体内多细胞组织及其生理功能差异较大.动物实验耗时、昂贵,并受伦理学限制,且存在种属差异问题.3D类器官模型可模拟组织器官的复杂结构和功能,产生细胞间和细胞-基质相互作用,与体内生理反应更为相似,因此能更准确地反映毒性效应和机理.类器官模型在化学品毒理学评价领域具有良好的应用前景,将显著提升毒理学基础研究能力以及对化学品风险评价和管理的支撑作用,但相关研究尚处于起步阶段.本文从类器官的生理学特性、构建方法及组织类型等方面,重点讨论了类器官模型在化学品毒理学研究中的适用性,并提出了存在的挑战和对策.     

奥曲肽对人结肠癌细胞生长增殖抑制作用的研究

目的:研究不同浓度生长抑素类似物奥曲肽对人结肠癌SW480细胞生长增殖的抑制作用.方法:体外培养人结肠癌SW480细胞;MTT比色法测定不同浓度奥曲肽抑制SW480细胞增殖作用,以效价强度最高者为最佳抑制浓度;然后,平皿集落形成法测定奥曲肽抑制体外培养SW480细胞的锚定依赖性生长作用.结果:不同浓度奥曲肽对SW480细胞增殖活性具有不同程度的抑制作用,在10-10 M-10-8M(mol/L)浓度范围内呈剂量依赖性,其中10-8M为最佳抑制浓度;奥曲肽对SW480细胞锚定依赖性生长具有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性.结论:奥曲肽能抑制体外培养人结肠癌SW480细胞生长增殖,并在一定范围内呈浓度与时间依赖性.     

内分泌干扰类农药生物检测技术的研究进展

内分泌干扰类农药会严重影响人类和其他动物的健康,而生物检测技术是内分泌干扰类农药的快速、简便的检测方法.本文介绍了内分泌干扰类农药常用的生物检测方法与技术,主要包括活体试验、离体试验与非细胞试验,并比较了各种方法的优缺点,列举了各方法在国内外环境激素测评中的应用现状,为我国内分泌干扰类农药生物检测技术的开发与应用提供了...     

Cytotoxicity Assessment of Melamine Using the Ciliated Protozoan Tetrahymena pyriformis

三聚氰胺曾被用为牛类的非蛋白类氮源,并被非法掺入食品中从而提高其表观蛋白含量.实验利用一种单细胞真核生物模型——纤毛类原生动物梨形四膜虫(Tetrahymena pyriformis)研究了三聚氰胺的细胞毒性.结果显示,三聚氰胺对梨形四膜虫的生长速率具有抑制作用,并且这种抑制作用与三聚氰胺浓度成正相关性,其IC50值为0.78g·L-1.细胞同时发生形变.实验证明梨形四膜虫生物测定法相对于动物实验具有耗时短、成本低、操作简便的优势,在潜在毒性物质的风险性评估实验中可成为一种优良的替代模型.     

三聚氰胺对纤毛类原生动物梨形四膜虫的细胞毒性

三聚氰胺曾被用为牛类的非蛋白类氮源,并被非法掺入食品中从而提高其表观蛋白含量.实验利用一种单细胞真核生物模型--纤毛类原生动物梨形四膜虫(Tetrahymena pyriformis)研究了三聚氰胺的细胞毒性.结果显示,三聚氰胺对梨形四膜虫的生长速率具有抑制作用,并且这种抑制作用与三聚氰胺浓度成正相关性,其IC50值为0.78g·L-1.细胞同时发生形变.实验证明梨形四膜虫生物测定法相对于动物实验具有耗时短、成本低、操作简便的优势,在潜在毒性物质的风险性评估实验中可成为一种优良的替代模型.     

对化学品登记要求的数据解释——急性毒性和急性刺激

本文对化学品登记时所要求的部分健康效应数据一急性毒性和急性刺激做了解释.涉及到的测试参数包括:急性经口毒性、急性经皮毒性、急性吸入毒性、急性皮肤刺激/腐蚀和急性眼睛刺激/腐蚀.     

建立室内实验程序用于量化鸟类对种子消耗量的杀虫剂处理效应

种衣剂中使用的杀虫剂会影响鸟类对种子的消耗量,从而影响鸟类的实际暴露风险。虽然量化这种对消耗量的影响目前不被考虑在环境风险评估中,但这是一个潜在的选择,例如在比较不同农药的暴露风险时应予以考虑。这种方法可以突出用于防止鸟类服用致死或亚致死剂量的杀虫剂。为了制定一个标准,我们在已建立的笔试方法的基础上开发了一个室内测试程序,包括饥饿期的“两选择”和“无选择”阶段。测试期间采用动物福利的最高标准。利用统计方法确定最合适的重复次数并分析最终结果。杀虫剂对种子消耗量的影响用处理后种子与未处理种子消耗的比率表示。该消耗因子可作为种子处理的鸟类风险评估中的回避因子。 作为案例,我们提出了一个获得绿雀（Carduelis chloris）和日本鹌鹑（Coturnix japonica）对未处理和使用杀真菌剂处理的油菜籽（Brassica napus）的种子和特定物种消耗量因子的试验程序。总体来说,两种鸟类的体质都没有受到试验程序的负面影响。试验程序适用于显示预期消耗模式的差异,例如在“两选择”试验中比在“无选择”试验中对经过杀真菌剂处理的种子有更高的避免性。而种子消耗量在不同物种和杀真菌剂处理组有差别,这使得我们可以对不同杀真菌剂的规避效应进行排序。使用本文所提出的标准程序可以针对更多鸟类物种得到具有可比性的农药和物种特定的消费因子。     

Sediment quality assessment of Beasley Lake: bioaccumulation and effects of pesticides in Hyalella azteca

Beasley Lake is a Conservation Effects Assessment Program (CEAP) watershed in the intensively cultivated Mississippi Delta, USA. Lake sediment quality at three sites was evaluated in 2004 and 2008 for biological impairment and uptake (animal tissue pesticide residues) from 14 pesticides and three metabolites using Hyalella azteca (Saussure). Eleven pesticides and three metabolites were detected in sediment among the three sites in 2004 and all 17 compounds examined were detected among the three sites in 2008, with the herbicide atrazine having the greatest concentrations. Twenty-eight-day H. azteca survival and growth (mg w/w) indicated no survival effects at any site for either year, but growth impairment occurred in H. azteca exposed to sediments in 2004, whereas growth enhancement occurred in H. azteca exposed to sediments at one site in 2008. Pesticides observed in animal tissue pesticide residues occurred more frequently and in greater concentrations in 2004 compared with 2008. Thirteen pesticides were detected in animal tissue pesticide residues in 2004, with chlorpyrifos occurring in the greatest concentrations, and six pesticides were detected in 2008, with p,p′-DDT occurring in the greatest concentrations. H. azteca tissue pesticide residues of seven pesticides, two herbicides, three insecticides, one insecticide metabolite, and p,p′-DDT, were associated with growth.     

Predicting the aquatic toxicity of commercial pesticide mixtures

Background

Previous studies reported on a large (> 80%) compliance between the observed toxicity of pesticide mixtures and their toxicity as predicted by the concept of concentration addition (CA). The present study extents these findings to commercially sold and frequently applied pesticide mixtures by investigating whether the aquatic toxicity of 66 herbicidal and 53 fungicidal combination products, i.e., authorized plant protection products that contain two or more active substances, can reliably be predicted by CA.

Results

In more than 50% of cases, the predicted and observed mixture toxicity deviated by less than factor 2. An indication for a synergistic interaction was only detected with regard to algal growth inhibition for mixtures of fungicides that inhibit different enzymes of ergosterol biosynthesis. The greatest degree of compliance between prediction and observation was found for the acute toxicity of fungicidal products towards Daphnia and fish, while the greatest degree of underestimation of product toxicity occurred for the acute toxicity of herbicidal products towards Daphnia and fish. Using the lowest available toxicity measures within taxonomic groups as the most conservative approach resulted in a bias towards overestimation of product toxicity, but did not eliminate cases of considerable underestimation of product toxicity.

Conclusions

The results suggest that the CA concept can be applied to predict the aquatic toxicity of commercial pesticide mixtures using the heterogeneous data typically available in a risk assessment context for a number of clearly identified combinations of test species and pesticide types with reasonably small uncertainty.     

农药致慢性细胞毒性及基因毒性机制研究进展

大量流行病学研究和体内、体外检测分析表明,长期低剂量接触农药可以导致人体细胞和分子损伤,诱导细胞凋亡。农药致细胞及DNA损伤的机制主要与DNA加合物的形成、DNA单链和/或双链的断裂有关。此外,氧化应激参与农药致细胞及DNA损伤的过程,可能成为农药致细胞及DNA损伤的促发因素。从总体上看,其具体分子机制还不十分清楚,有待进一步研究。     

农药致慢性细胞毒性及基因毒性机制研究进展

大量流行病学研究和体内、体外检测分析表明,长期低剂量接触农药可以导致人体细胞和分子损伤,诱导细胞凋亡。农药致细胞及DNA损伤的机制主要与DNA加合物的形成、DNA单链和/或双链的断裂有关。此外,氧化应激参与农药致细胞及DNA损伤的过程,可能成为农药致细胞及DNA损伤的促发因素。从总体上看,其具体分子机制还不十分清楚,有待进一步研究。     

日本虎斑猛水蚤的重金属急性毒性及其作为标准测试生物的潜在意义

以静态实验法研究重金属Cu、Cd、Pb和Zn单独以及两两联合对日本虎斑猛水蚤(Tigriopus japonicus)的急性毒性效应,并分析其是否适宜作为我国海水重金属毒性测试的标准生物.结果显示,单独作用下,cu、Cd、Pb和Zn对受试生物的24 hLC50分别为0.26、0.14、0.40和0.65 mg·L-1,...     

A study of neurotoxicity of BHC in relation to residual accumulation on the brain tissue of Heteropneustes fossilis (Bloch)

Neurotoxic effect of BHC, the organochlorine pesticide in Heteropneustes fossilis has been studied exposing at the dose concentrations of 1 ppm, 5 ppm and 10 ppm in lab aquarium for 96 hours over a period of one year. The results showed the behavioural abnormalities in different exposure concentrations such as dysfunction of endocrine gland, excretion of mucus, dispigmentation, sign of restlessness, erratic swimming with rapid jurkey movement, spiralling and convolution showing severe effect in central nervous system. Therefore an attempt has been made for monitoring of BHC residues viz. alpha, beta, gamma isomers in the brain tissue exposed to different sublethal concentrations using Gas liquid chromatography. The mean values of isomers were found to be 1.587 microg/gm for 1 ppm, 2.993 microg/gm for 5 ppm and 3.78 microg/gm for 10 ppm test group. Severe behavioural abnormalities were recorded at high dose concentration of pesticides with higher accumulation of pesticide residues in brain tissue.