一株苯胺降解菌的分离鉴定及其降解特性

为研究苯胺污染的生物控制,通过驯化培养,从南京化工厂污水处理厂的活性污泥中分离出一株高效苯胺降解菌——菌株AN4.生理生化试验鉴定菌株AN4为金黄杆菌属(Chryseobacterium sp.).菌株AN4利用苯胺生长和降解苯胺的最适温度为30 ℃、pH为7.0,它可在苯胺质量浓度低于3 000 mg/L的无机盐固体培养基上生长.菌株AN4除可降解苯胺外,还可以苯酚、苯甲酸、硝基苯、甲苯、萘、氯苯、二甲苯作为唯一碳源生长,蛋白胨可加速其对苯胺的代谢.代谢机制研究证实,菌株AN4在邻苯二酚1,2-双加氧酶作用下经邻位裂解途径降解苯胺.     

一株芘降解菌B2的降解条件优化及降解基因

芳香烃降解菌是石油污染土壤修复的主要生物资源。采用芘平板升华法对克拉玛依原油污染土壤样品进行驯化培养,分离得到一株芘降解菌B2,经16S rDNA基因序列比对及系统发育进化分析表明,该菌株为假单胞菌属(Pseudo-monas)。采用正交设计方法优化菌株B2对高分子量多环芳烃芘的降解条件,并构建多元非线性模型预测菌株B2对芘的最佳降解条件,结果表明:在接种量OD660 nm为0.60、降解温度为40℃、降解时间为6.0 d时,预测菌株B2对芘的降解最大达到38.214 mg/L,实际测得最大降解量为37.906 mg/L,预测准确率为99.19%。运用PCR技术克隆B2的邻苯二酚-2,3-双加氧酶基因(B2C23O)(I.2.A亚家族),核酸序列分析表明,该基因全长880 bp,具有一个完整的开放阅读框,编码246个氨基酸,与已报道的Pseudomonas putida W619同源性最高为97%;对B2C23O基因编码氨基酸序列进行分析,发现其具有邻位断裂双加氧酶模式结构,推测菌株B2通过邻位裂解途径降解芘代谢中间产物邻苯二酚。     

一株高效耐冷菌的分离鉴定及降解特性研究

寒冷地区水温偏低,污水生物处理效果差,出水达标困难。从寒冷地区水土样品中,分离到数株能在2℃下生长的低温菌株,选择优势菌N进行重点研究。从脱氢酶活性机制上,考察了不同条件对N菌株降解能力的影响;对比研究了它与常温活性污泥降解能力和脱氢酶活性的差异。结果表明:N菌株属于耐冷型低温微生物,结合16S rDNA序列同源性分析及生理生化特性鉴定为黄假单胞菌;5℃曝气8 h,接种废水COD、氨氮去除率均在90%以上;低温条件下,该耐冷菌对生活污水降解率比常温活性污泥高出40%,脱氢酶具有更高的活性,在低温污水处理方面具有广阔的应用前景。     

一株多重耐受性高效反硝化细菌的分离鉴定及特性

从活性污泥中筛选获得一株多重耐受性的高效反硝化细菌,命名为W32,通过个体形态特征的观察、生理生化实验和16S rDNA同源性比对分析,确定该菌株为施氏假单胞菌（Pseudomonas stutzeri）。分别从温度、pH和盐浓度研究该菌株对环境的耐受性,在10℃时、pH为11.0及盐浓度为5%的条件下对TN仍具有较好的去除率,分别可以达到88.12%、72.22%和55.48%;在10℃、静置缺氧、初始NO3--N质量浓度为296.42 mg·L-1、以10%的接种量的条件下,在72 h内NO3--N和TN去除率分别为100%和90.54%,且无氨氮与亚硝态氮的积累;研究该菌株在垃圾渗滤液中对TN的去除,在10 d内将TN去除了55.68%。研究表明,该菌株对低温、强碱、高浓度盐均具有良好的耐受性,是一株兼性好氧的高效反硝化细菌,在废水处理中具有广阔的应用前景。     

一株高效脱硫菌的分离鉴定和脱硫特性研究

从污水净化厂二沉池回流污泥中分离到一株硫杆菌菌株dj-5,该菌株是一种兼性厌氧菌,通过生理生化特性鉴定,并结合16S rDNA序列分析及鉴定,该菌株可以确定为脱氮硫杆菌（Thiobacillus denitrificans）。该菌株的生长曲线表明菌体生长迅速,延滞期约为8 h,然后细菌进入对数生长期,这一阶段持续时间大约20～24 h,稳定期较短,细菌很快进入衰亡期。通过脱硫工艺实验考察了pH值、温度和搅拌速度对脱硫率和菌体生长的影响,结果表明,在进气量180 L/h、pH=6～8、温度为25～35℃和搅拌速度为270 r/min时,该菌株能正常生长,对进气浓度高达2 500 mg/m³的硫化氢脱除率在91%以上。     

3株反硝化聚磷菌的分离与鉴定

通过烛缸法培养富集、分离,结合除磷试验、硝酸盐还原产气试验及异染颗粒和PHB颗粒染色辅助检验相结合的方法筛选,得到3株具有较高脱氮除磷效率的反硝化聚磷菌DNPA8, DNPA9和DNPA10。在富氮富磷培养基中培养48 h,各菌株的脱氮率均大于75%,除磷率均大于78%。采用多相分类的方法确定了3株反硝化聚磷菌的分类地位,DNPA8为嗜麦芽寡养单胞菌,DNPA9为水生丛毛单胞菌属首次发现的反硝化聚磷菌;DNPA10为约翰逊氏不动杆菌。该研究结果为富营养化水体的治理提供了有效的菌种资源。     

一株降解乐果的高效菌的分离和鉴定

从乐果合成废水生化处理的活性污泥中分离出27株具有不同程度的降解乐果能力的好氧菌株。经降解功能测定试验,获得一株降解能力高的菌株(编号5724),24小时内,对乐果降解率达57％—58％。其主要特征为;细胞杆状,革兰氏阴性,直径0.7—1.2×1.4—4.2μm,具一根极生鞭毛,能运动,胞内有聚—β—羟基丁酸颗粒,葡萄糖的O/F测定产碱、氧化酶、接触酶均为阳性,甜菜碱不利用,明胶不液化,硝酸盐还原阳性,最适生长温度为30—35℃,3℃和41℃时生长极弱。48—52℃不生长,最适生长pH6.5—7,pH4以下不生长。按照上述特征,根据《伯杰氏细菌学鉴定手册》鉴定表,该菌株属类产碱假单胞菌(Pseudomonaspseudoalcaliges)。     

一株荧蒽降解菌的筛选鉴定及降解特性

采用富集培养方法,从多环芳烃污染的土壤中分离筛选到一株能以高分子量的多环芳烃荧蒽为惟一碳源和能源且生长状况良好的菌株DN002。通过形态观察、生理生化指标及16S rRNA同源序列分析比对,结果表明,该菌株为木糖氧化产碱菌(Achromobacter xylosoxidans),最适生长温度为32℃,最适生长pH为7～7.5。该菌株对荧蒽有较强的降解能力,在14 d内对500 mg/L的荧蒽的降解率为92.8%。菌株细胞蛋白SDS-PAGE结果显示,经荧蒽诱导后,在分子量为18～66 kDa范围内有显著的差异蛋白条带。     

降氰菌的分离及培养条件初探

从温州某电镀厂的活性污泥中分离纯化、筛选获得降氰菌16株,其中11菌株能耐受2400mg/L的氰化钠.同时,考察了实验条件对11菌株的生长影响,结果表明,11菌株最佳生长pH为8.0,4～18h为对数生长期;果糖对11菌株的生长和降氰有促进作用;50mL含氰液体培养基中,1mol/L的Fe或Cu对11菌株的生长和降氰均有抑制作用;11菌株的最佳降氰液体培养基pH为6.5,4h内的降氰率可达98.57%;8h后CN-残留质量浓度降至501μg/L.     

一株耐盐柴油降解菌的分离鉴定及其降解性能

从某油田附近受石油污染土壤中分离出一株以柴油为惟一碳源的耐盐菌株LS1。通过对菌株的生理生化特性、菌体的形态观察及16S rDNA基因序列分析鉴定菌株LS1为假单胞菌属(pseudomonas)。该菌株可耐受的最高盐度(NaCl)和柴油浓度分别为6%~8%和12 000 mg/L。菌株生长的适宜pH和温度条件分别为6.0~8.0和28~36℃。在盐度为6%、pH为7.0、温度为32℃、菌种投加量为10%的条件下,初始浓度为3 000 mg/L的柴油经6 d降解后,去除率可达78.3%,加入适量外加碳源葡萄糖和蔗糖,可使降解率分别提高至92%和90%左右。菌株LS1的耐盐机理可能是通过在细胞内积累甜菜碱以调节菌株细胞内外渗透压平衡。投加甜菜碱可提高耐盐菌LS1在高盐环境下对柴油的降解效率。     

高效联苯降解菌的筛选及其特性

焦化废水属高浓度难降解工业有机废水,其中所含的多环芳烃属难降解有机物,且对环境产生毒害作用。为探索生物强化技术去除焦化废水中多环芳烃类化合物,采用选择性培养和多级富集的方法,以联苯为模型化合物,并作为惟一碳源,从焦化厂废水和污泥中分离和筛选得到6株联苯降解菌。通过逐渐提高底物浓度的方法驯化菌株后,从中筛选出降解效率最高的联苯降解菌株WIS-01,在此基础上进行菌属鉴定、细菌生长情况及联苯降解性能的研究。实验结果表明,3 d内菌株WIS-01对联苯的降解率可达99%以上,可耐受联苯的最高质量浓度为2 g/L。通过形态学、生理生化鉴定和16S rDNA序列比对分析,确定菌株WIS-01属于假单胞菌属,同源性达95%,命名为Pseudomonas sp.WIS-01。     

一株高效异养硝化-好氧反硝化菌的分离鉴定及脱氮性能

从经驯化的污泥中筛选出一株异养硝化-好氧反硝化细菌,编号为TN-05,通过形态学特征观察,生理生化特征试验和核酸序列分析鉴定其为门多萨假单胞菌（pseudomonasmendocina）。同时对其进行脱氮性能研究,结果表明,TN-05具有较好的异养硝化能力,菌株在培养至48h时对总氮和氨氮去除率均能达95％以上。通过反硝化能力验证实验发现,菌株对NO3-N和N0f—N也分别具有较好的去除效率。将菌株应用于人工合成废水中,发现对废水中氨氮优先利用并能在24h时使去除率接近100％,对硝态氮和亚硝态氮也具有一定的去除效率。因此,菌株TN-05是一株同时具备异养硝化和好氧反硝化能力的高效菌株。     

高效降酚菌株JY03的筛选及其降解特性研究

从绝缘材料厂排放的工业废水中分离得到一株能高效降解苯酚的菌株JY03,最高可耐受1.5 g/L的苯酚。通过形态观察、生理生化分析和16S rRNA序列分析,初步鉴定该菌属于棒状杆菌属(Corynebacterium sp. JY03)。JY03对苯酚降解最适条件为pH 7.5,温度32℃,苯酚浓度为0.6 g/L,时间为36 h,接种量6%,其降解率可达98.6%。该菌株在高效处理含酚废水方面具有广阔的应用前景。     

甲醛降解菌的筛选及降解特性研究

从采集活性污泥中筛选得到1株具有高效降解甲醛能力的菌株并命名为JQ-1,根据其形态特征,初步判断菌株JQ-1属假单胞菌属。同时对菌株JQ-1的生长特性及降解特性进行了初步研究。实验结果表明,该菌株降解甲醛的最适条件为：甲醛废水浓度为50mg／L,pH值为6,培养温度为25℃,摇床转速为150r／min。在最适条件下,菌株JQ-1具有较强的降解甲醛能力,当甲醛废水浓度为50mg／L时,在24h内甲醛降解率可达87％以上。     

微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性

采用常规的微生物学方法,从垃圾渗滤液中筛选到一株高效微生物絮凝剂产生菌LB1,根据其形态学和生理生化特征初步鉴定该菌株属于假单胞菌属,命名为Pseudonomas sp. LB1。LB1所产微生物絮凝剂的絮凝特性的研究结果表明,LB1的最佳产絮凝时间为96 h,所产絮凝活性物质主要是其生长过程中的胞外分泌物和细胞生长后期的次级代谢产物,菌体细胞本身具有一定的助凝作用。LB1所产絮凝剂最佳加样量为3％（体积分数V/V）;对pH的适应范围较宽,在4～10之间具有较高的絮凝活性,均大于75％;温度为25℃时絮凝率为86.3％,在25～60℃之间,絮凝率基本保持稳定;LB1所产絮凝剂对几种废水具有较好的絮凝效果。     

一株耐盐好氧反硝化细菌的分离鉴定及其脱氮特性

从处理高盐废水的生物接触氧化工艺成熟活性污泥中分离得到一株耐盐好氧反硝化细菌F10. 根据形态学特征、生理生化以及16S rRNA基因序列测定分析, 初步判定该菌株为盐单胞菌属(Halomonas sp.). 菌株能在盐度为3%~7%的培养基中良好的生长及脱氮, 最适盐度为3%(以NaCl计), 最适碳源为乙酸钠, 最适pH为7~8, 最适温度为30℃. 该菌株能利用NO3--N进行反硝化作用, 在盐度为3%的反硝化培养基中24 h内对NO3--N的去除率达到92.6%, 36 h基本完全去除。该菌株在3%盐度下表现出良好的异养硝化-好氧反硝化性能, 初始硝态氮浓度在270 mg/L时, 菌株的脱氮率可达90%以上, 氨氮的去除率可达75%以上, 脱氮过程中无NO2--N积累, 可实现同步硝化反硝化, 具有一定的工程应用价值。