绿僵菌液体培养的条件及其对马尾松毛虫的毒力

在不同温度和不同光照条件下对3株金龟子绿僵菌和1株贵州绿僵菌的液体深层培养研究表明，光照对菌丝生长和液生分生孢子产量均无显著影响。但培养温度显著影响菌丝生长和液生分生孢子的产出率，25-28℃为液体深层培养绿僵菌的适宜温度，其中以28℃最佳，对3-4龄马尾松毛虫幼虫的室内毒力测定表明，绿僵菌液生分生孢子的毒力略低于气生分生孢子。     

绿僵菌防治第1代马尾松毛虫的研究

供试的绿僵菌和白僵菌菌种在室内对马尾松毛虫2～3龄幼虫的毒力相当.在25℃条件下,绿僵菌的n (LC50)=1.06×107 L-1, t (LT50) = 7.95～12.04 d (n(spore)=1.0×1011～1.0×107 L-1);白僵菌的n( LC50) =1.37×106 L-1 ,t (LT50) = 7.48～11.27 d ( n(spore) = 1.0×1011～1.0×107 L-1).试验显示与白僵菌相比,绿僵菌具有较强的耐高温和耐旱特性.在高温、低湿的条件下绿僵菌的杀虫效果优于白僵菌.林间防治试验也表明,绿僵菌防治第1代马尾松毛虫的效果显著优于白僵菌,显示出较好的应用前景.表8 参14     

油松毛虫感染白僵菌后超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的变化

采用分光光度法测定了3~5龄油松毛虫(DendrolimustabulaeformisTsaietLiu)幼虫被白僵菌(Beauveriabassi ana)感染后保护酶的活性.结果表明: 3~5龄油松毛虫被白僵菌感染后1 ~8d,体内超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于同期未感染的幼虫,并呈现出先升高后下降的变化趋势,而同期未感染的幼虫变化不大;过氧化氢酶(CAT)的活性也呈现出先升后降的趋势.利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了感染后1~8d幼虫体内SOD同工酶与CAT同工酶的变化.结果显示:SOD同工酶带宽与酶带亮暗变化显著;CAT同工酶酶谱有所差异,酶带数由感染初期的一条变为后期的两条带,而且带宽值与酶带亮暗变化显著. 图3表2参16     

油松毛虫感染白僵菌后体内蛋白质、酯酶和多酚氧化酶的变化

采用分光光度法测定了油松毛虫(Dendrolimus tabulaeformisTsai et Liu)3~5龄幼虫被病原物白僵菌(Beau-veria bassiana)感染后,其体内蛋白质的含量和多酚氧化酶活性的变化;结果表明,被白僵菌感染后1~8d,虫体内蛋白质含量持续下降,而未感染的则变化不大;多酚氧化酶(PPO)的活性呈现出先升高后下降的趋势.利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了染菌后1~7d幼虫体内酯酶同工酶的变化;结果显示,染菌后的3、4龄幼虫体内酯酶同工酶酶谱与对照相比,酶带数量变化较大,未染菌的为3条酶带,感染病菌后变为1条和2条.与其相比,5龄幼虫染菌后酯酶同工酶的酶带数量没有变化,只是酯酶的活性及含量比对照有明显减弱趋势.图2表5参16     

马尾松毛虫质型多角体病毒结构蛋白的抗体制备及免疫性

质型多角体病毒的病毒粒子结构蛋白是由衣壳蛋白VP1(Capsid protein,CP)、塔状蛋白VP3(Turret protein,TP)和大突起蛋白VP5(Large protrusion protein,LPP)组成,这3个蛋白分别由病毒基因组片段S1、S4和S7编码.为了解质型多角体病毒结构蛋白的免疫定位情况,本研究从马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株中提取病毒核酸,回收、纯化S1、S4和S7片段,经RT-PCR扩增得到对应片段的ORF全长或抗原区的片段,克隆于原核表达载体上,在大肠杆菌BL21菌株中进行了表达,免疫家兔制备了多克隆抗体.Western blot结果显示DpCPV基因组的S1、S4和S7片段分别编码其结构蛋白VP1、VP3和VP5,与推测的结果一致.免疫胶体金的方法也证明S1、S4和S7编码的蛋白定位于病毒粒子衣壳的外表面.本研究首次通过免疫学方法确定了质型多角体病毒结构蛋白在病毒粒子上的定位,为质型多角体病毒的结构蛋白功能和侵染机制研究提供了免疫学方面的基础,对质型多角体病毒的研究有较重要的意义.     

球孢白僵菌胞外蛋白酶及类枯草杆菌蛋白酶的诱导

研究了接种物和诱导物对球孢白僵菌总胞外蛋白酶及类枯草杆菌蛋白酶（Ｐｒ１）产生的影响。结果表明,球孢白僵菌不同接种物产生的总胞外蛋白酶及Ｐｒ１活性有明显差异;不同诱导物对产酶水平也有较大影响。其中芽管状物在蝉蜕诱导液中的总胞外蛋白酶和Ｐｒ１活性均最高,诱导１２ｈ酶活性达高峰,不同来源的菌丝产酶水平有差异,在诱导液中,接种物总胞外蛋白酶和Ｐｒ１的变化趋势一致,但总胞外蛋白酶活性和Ｐｒ１活力间没有直接的     

影响马尾松毛虫虫灾发生类型因素的重要性分析

运用列联表分析方法探讨了小班的林地起源、优势树种、地理、生长等因素对小班的马尾松毛虫虫灾发生类型的影响。分析结果表明：小班的海拔高度和坡度是决定小班的马尾松虫灾发生类型的关键因素。小班的优势种结构、平均树高及郁闭度对小班的马尾松毛虫虫灾发生类型也有较大的影响。图12表1参2     

甘薯细胞悬浮培养的建立及其生长研究

由甘薯叶片诱导出愈伤组织,并由此建立起悬浮培养细胞系．分析其生长表明：南薯８８和８１２９４两种细胞系生长曲线均呈“Ｓ”型,其中南薯８８生长较快,是８１２９４的３倍以上,１０ｄ培养物的鲜重是初始鲜重的１０倍．培养条件研究结果表明：南薯８８细胞悬浮培养的最佳２,４Ｄ质量浓度为１．０ｍｇＬ－１,最佳蔗糖质量浓度为３０ｇＬ－１,椰乳和酵母汁能明显促进其生长;对于８１２９４,２,４Ｄ最佳质量浓度为２．５ｍｇＬ－１、蔗糖最佳质量浓度１５ｇＬ－１,酵母汁可促进其生长,但椰乳却无效;谷氨酰胺、色氨酸和脯氨酸不能促进甘薯悬浮细胞的生长,水解酪蛋白对其生长的促进作用亦不大;葡萄糖则抑制其生长     

光生物反应器培养紫球藻及藻粉降血脂的研究

研究了搅拌式光生物反应器中搅拌速度、通气量对紫球藻生长、胞外多糖和藻细胞超微结构的影响．实验结果表明：在特定光照(1000μmolm^-2s^-1)和培养温度(25℃)条件下，当搅拌转速为200r／min、通气量为0．71vvm时，藻生长速度和胞外多糖含量最高；增加通气量有利于藻细胞胞外多糖及生物量的提高．对藻细胞超微结构的观察发现，与摇床培养相比，搅拌式光生物反应器使藻细胞淀粉颗粒明显增多，粘质鞘层变薄，光合片层增多．动物实验表明，紫球藻能明显降低摄食高脂饲料SD大鼠血脂TC、TG、LDL-C水平，并提高HDL-C含量．实验结果预示，紫球藻对预防动脉粥样硬化和冠心病的发生有一定的意义．图2表3参26     

丹参冠瘿组织培养特性及培养动力学研究

研究了丹参冠瘿组织悬浮培养过程的培养特性及细胞的生长和丹参酮的合成规律,并建立了丹参冠瘿组织生长、底物消耗和产物积累的分相动力学模型,模型计算结果与实验值吻合较好．丹参冠瘿组织悬浮培养系,由淡黄色、近圆形、ｄ ５～１０ ｍｍ 的颗粒组成,培养液纯清;丹参冠瘿组织生长周期Ｔ＝２０ ～２５ ｄ,３ ～７ ｄ 近似为指数生长期, 比生长速率μ＝０ ．１６ ｄ－１ ,７ ～１３ ｄ 近似为恒速生长期,生长速率ｄＣＸｄｔ ＝ ０．６９ ｇ Ｌ－１ ｄ－１ ;１３～２１ ｄ 为减速生长期．ｄ ２１ 达最大生物质量浓度ＣＸ,ｍａｘ ＝１０．９ ｇ Ｌ－１ , 丹参酮积累质量浓度Ｃｐ＝ ８．４ ｍｇ Ｌ－１ ．     

Vc二步发酵新菌系生长代谢的调节

研究了培养基和培养条件对新菌系大、小菌生长地代谢的影响。结果表明：培养基的碳源、葡萄糖/山梨糖浓度比、氮源、生长因子以及起始pH值、通气量等，可以有效地调节2-酮基-L-古龙酸的代谢产生数量，规范新菌系B529-Go.V.6的行为、生理状态，促进大小菌之间的协调，使其达到最佳状态。图2表6参5