杆状病毒包涵体蛋白的共同抗原性

在比对已公布的37种杆状病毒包涵体蛋白氨基酸序列的基础上,选定棉铃虫核型多角体病毒(HaNPV)多角体蛋白的两个高度保守多肽(54-113aa和206-245aa)制备多克隆抗体,用Western blot法检测这两个高度保守多肽与多种杆状病毒包涵体蛋白之间的血清学关系.结果表明,HaNPV多角体蛋白的两个多肽的抗体与14种核型多角体病毒的多角体蛋白和5种颗粒体病毒的颗粒体蛋白均有明显的杂交信号,表明杆状病毒的包涵体蛋白之间具有共同的抗原决定簇.根据杆状病毒包涵体蛋白之间的这种血清学关系,进一步讨论了利用免疫金试纸技术检测病毒杀虫剂中包涵体含量的可行性.     

柞蚕多角体病毒的纯化和鉴定

对柞蚕多角体病毒(ApNPV)的多角体颗粒进行了分离和纯化,并在显微镜下进行了形态观察．提取和纯化了柞蚕多角体病毒的基因组DNA,对DNA进行了部分限制性内切酶图谱鉴定．结果表明,在ApNPV基因组中只含少量的EcoRI位点,与家蚕核型多角体病毒差别很大,并提示这两种病毒的复制机制可能不同．图3参5。     

粘虫颗粒体病毒及其增效因子对粘虫核型多角体病毒的增效作用

生物测定的结果表明,粘虫颗粒体病毒ＰｕＧＶ－Ｐｓ及其增效因子对粘虫核型多角体病毒ＰｓＮＰＶ均有明显的增效作用．粘虫颗粒体病毒不仅能提高粘虫感染ＰｓＮＰＶ的死亡率,而且ＮＰＶ、ＧＶ两种病毒混合感染使粘虫幼虫代谢发育受到抑制,表现为生长缓慢、体重减少等．增效因子的增效作用表现在能显著提高粘虫幼虫的死亡率,降低核型多角体病毒的半致死浓度ＬＣ５０,并缩短半致死时间ＬＴ５０．     

马尾松毛虫质型多角体病毒结构蛋白的抗体制备及免疫性

质型多角体病毒的病毒粒子结构蛋白是由衣壳蛋白VP1(Capsid protein,CP)、塔状蛋白VP3(Turret protein,TP)和大突起蛋白VP5(Large protrusion protein,LPP)组成,这3个蛋白分别由病毒基因组片段S1、S4和S7编码.为了解质型多角体病毒结构蛋白的免疫定位情况,本研究从马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株中提取病毒核酸,回收、纯化S1、S4和S7片段,经RT-PCR扩增得到对应片段的ORF全长或抗原区的片段,克隆于原核表达载体上,在大肠杆菌BL21菌株中进行了表达,免疫家兔制备了多克隆抗体.Western blot结果显示DpCPV基因组的S1、S4和S7片段分别编码其结构蛋白VP1、VP3和VP5,与推测的结果一致.免疫胶体金的方法也证明S1、S4和S7编码的蛋白定位于病毒粒子衣壳的外表面.本研究首次通过免疫学方法确定了质型多角体病毒结构蛋白在病毒粒子上的定位,为质型多角体病毒的结构蛋白功能和侵染机制研究提供了免疫学方面的基础,对质型多角体病毒的研究有较重要的意义.     

荧光增白剂对重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒的增效作用

以β-半乳糖苷酶基因为标志基因的重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体(AcMNPV-hsp70／lacz)研究光增白剂对该病毒的增效作用及其作用方式．通过病毒毒力的生物测定表明：光增白剂FB-28能提高甜菜夜蛾幼虫的死亡率，降低半致死浓度，缩短半致死时间；光增白剂的增效作用与感染虫龄有关．此外，应用组织切片技术对中肠组织病理以及血淋巴细胞感染观察表明：在幼虫的病毒接种物中添加合适浓度的荧光增白剂不会改变病毒在幼虫中肠组织中的感染部位，却可以提高幼虫对病毒的敏感性，产生更多的病灶．图版1图4表3参19     

棉铃虫核多角体病毒基因组限制酶酶切分析及其多角体基因的定位

应用１１种限制性内酶ＢａｍＨⅠ、ＢｓｔＥⅡ、ＥｃｏＲⅠ、ＥｃｏＲⅤ、ＨｉｎｄⅢ、ＫｐｎⅠ、ＰｓｔⅠ、ＳａｌⅠ、ＳｓｔⅠ、ＸｂａⅠａⅠ和ＸⅠⅠ和ＸｈｏⅠ分别将中国棉铃虫核多角体病毒（单粒包埋ＨａＳＮＰＶ）湖北株基因组Ｄ组ＤＮＡ酶切为１０、１２、２２、２１、１３、６、６、４０、６、２１、６个片段，并求得基因组大小平均为１什什Ｍｒ≈７９．１×１０６．以家委核多角体病毒ＢｍＮＰＶ多角体基因为探针，利用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术将病毒多角体基因定位在ＳａｌⅠ４．２×１０３ｂ左右的片段上．与棉铃虫核多角体病毒其它株系酶切图谱比较结果表明，本株病毒与上海等株系及美洲棉铃虫核多角体病毒ＨａＳＮＰＶＥｌｋａｒ株系酶切图谱相似，它们之间的条带数和大小差异较小，而与已发现的所有多粒包埋型病毒ＨａＳＮＰＶ酶切图主谱差异较大．据此认为ＨａＳＮＰＶ和ＨａＭＮＰＶ属于基因型不同的两类病毒，而ＨａＳＮＰＶ不同分离株的同源性很高     

烷基苯磺酸钠对水生动物的生物效应研究

本文通过洗涤剂的主要成分—烷基苯磺酸钠对大型蚤和鲤鱼的毒性试验,说明烷基苯磺酸钠的毒性属中等。对大型蚤２４ｈＥＣ５０为７．２３ｍｇ／Ｌ,４８ｈＥＣ５０为３．８３ｍｇ／Ｌ;对鲤鱼４８ｈＬＣ５０为３．７４ｍｇ／Ｌ,９６ｈＬＣ５０为２．２３ｍｇ／Ｌ。鲤鱼生活在０．５ｍｇ／Ｌ的烷基苯磺酸钠溶液中,１５ｄ就能引起鳃的损伤。     

EoNPV的限制性酶切图谱及polyhedrin基因和egt基因的定位

用８种限制性内切酶酶解茶尺蠖Ｅｃｔｒｏｐｉｓｏｂｌｉｑｕａ核型多角体病毒（ＥｏＮＰＶ）基因组ＤＮＡ,获得大于０．８８ｋｂ的片段数分别为７、３８、１９、１７、１６、９、３２和１４．由此统计,基因组平均大小大于１１８．５ｋｂ,即Ｍｒ约大于７８．６×１０６．用ＢｍＮＰＶ的多角体蛋白（ｐｈ）基因和ＡｃＭＮＰＶ的ｅｇｔ基因为探针,应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交方法,将ＥｏＮＰＶ的ｐｈ基因定位于ＢａｍＨＩＡ、ＣｌａＩＤ、ＥｃｏＲＩＭ、ＥｃｏＲＶＬ、ＨｉｎｄⅢＦ、ＰｓｔＩＡ、ＳａｌＩＨ和ＸｈｏＩＢ片段上,将ｅｇｔ基因定位于ＢａｍＨＩＡ、ＣｌａＩｌ、ＥｃｏＲＩＫ、ＥｃｏＲＶＡ、ＨｉｎｄⅢＨ、ＰｓｔＩＡ、ＳａｌＩＢ、ＸｈｏＩＩ片段上．通过克隆和酶切鉴定ＥｃｏＲＩＭ和ＥｃｏＲＶＬ片段,测定ｐｈ基因部分序列,并以ＥｃｏＲＩＭ为探针对基因组酶切印迹进行杂交,制作了ＥｏＮＰＶｐｈ基因和ｅｇｔ基因区的酶切图谱,推定ｅｇｔ基因保守区位于ｐｈ基因上游约４．５５ｋｂ处．     

油桐尺蠖病毒杀虫剂的药效分析

油桐尺蠖核型多角体病毒（BsSNPV）是一种高致病力的病毒株,生物测定nPIB（LC50）=1．657×104mL．经过全国7个省20多个单位联合试验,生物统计结果表明：BsSNPV防治第1代油桐尺蠖虫口下降率为97．2％;防治第2代油桐尺蠖虫口下降宰为93．97％;F测验其t值为0．184,小于理论t0．05（29）＝2．045．优于敌百虫、DDVP、辛硫磷和BT等农药是一种杀虫效果稳定、使用安全、经济有效的生物杀虫剂．     

活性污泥中产氨优势菌的分离及温度,pH对其产氨影响

缺氧条件下，从活性污泥中分离到一株兼性厌氧产氨优势菌０８１号，经鉴定暂归黄杆菌属Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｐ．，在实验室条件下，它的最适ｐＨ为６．５，ｔ＝２６℃，培养ｔ＝２４ｈ；最适产氨ｐＨ为６．８～８．２，ｔ＝２６～３５℃，产氨时间从培养起第８ｈ至第７２ｈ．     

甲基异噻唑啉酮对斑马鱼胚胎的急性毒性和机制研究

甲基异噻唑啉酮(methylisothiazolinone,MIT)作为防腐剂,广泛用于个人护理品、日用品和涂料中。MIT随着污水进入地表水循环,普遍存在于水体中,但目前关于MIT对水生生物毒性的研究还比较少。本文以模式生物斑马鱼的胚胎作为受试对象,评价MIT对斑马鱼胚胎的毒性。将受精后3 h的健康斑马鱼胚胎暴露于梯度浓度的MIT下,观察其对胚胎生长发育的影响,用吖啶橙(AO)染色检测细胞凋亡情况。结果发现,48 h暴露浓度大于1.0 mg·L-1的胚胎孵化被显著抑制,72 h浓度大于1.52 mg·L-1的幼鱼心率显著降低,统计96 h幼鱼死亡和畸形数,并重复验证和计算得到96 h半致死浓度(96 h 50%lethal concentration,96 h-LC50)为6.15 mg·L-1,96 h半致畸浓度(96 h 50%teratogenesis concentration,96 h-TC50)为3.89 mg·L-1,测量96 h胚胎体长,分析最小生长抑制浓度(minimum concentration to inhibit growth,MCIG)为2.31 mg·L-1,AO染色显示72 h胚胎的凋亡细胞主要集中在脑部和尾部。不同时期下镜检观察到,胚胎出现的畸形主要包括尾部发育不良,脊柱弯曲,卵黄囊水肿和心包水肿。此外,高浓度处理组24 h胚胎自主抽动次数增加,72 h和96 h活动能力减弱,触碰反应迟钝。因此,推断MIT对斑马鱼胚胎的发育有较大影响,同时有一定的神经毒性。根据《危险化学品鱼类急性毒性分级试验方法》,判定MIT对斑马鱼胚胎为高毒,该毒性实验结果可为MIT在工业生产和环境中的风险管理提供依据。     

苯并(a)芘对鲫鱼(Carassius auratus)肝脏抗氧化酶的影响

研究了苯并(a)芘(BaP)暴露对鲫鱼肝脏抗氧化酶的影响．共设置4个处理组，浓度分别为每千克体重0．01mg、0．1mg、1mg和10mg，暴露方式采用腹腔注射，分别在暴露后6h、12h、48h和96h测定肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过靴氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性．结果显示，所有暴露浓度对SOD活性明显抑制，各处理组活性在暴露后6h均低于对照组，在暴露后12h至48h有所回升，暴露后96h又降至对照水平以下．0．01mg kg^-1、0．1mg kg^-1处理组CA3、活性在暴露期间无显著改变，1mg kg^-1、10mg kg^-1处理组CAT活性在暴露后12h显著升高，暴露后96h回落至对照水平以下，此时10mg kg^-1处理组与对照组差异显著．对照组GPX活性在暴露后出现波动，0．1mg kg^-1处理组在暴露后96h显著低于对照组，而其它处理组活性与对照组在暴露期间无显著差异．结果表明，BaP能对鲫鱼肝脏抗氧化酶产生影响，多种抗氧化酶活性相结合可作为BaP暴露的生物标志物．图3参18     

表面活性剂十二烷基苯磺酸钠（SDBS）和十二烷基磺酸钠（SDS）对安氏伪镖水蚤的急性毒性研究(Acute Toxicity of Sodium Dodecyl Benzene Sulfonate（SDBS）and Sodium Dodecyl Sulfate（SDS）to the Copepod, Pseudodiaptomus annandalei)

为探讨表面活性剂成分对海洋桡足类生物的影响,测定了十二烷基苯磺酸钠(SDBS)和十二烷基磺酸钠(SDS)对安氏伪镖水蚤(Pseudo-diaptomus annandalei Sewell)的急性毒性作用.结果表明,SDBS对安氏伪镖水蚤雌体24h、48h、72h和96h的半致死浓度LC50分别为2.40、1.67、1.59和1.58mg·L-1,而对雄体分别为1.84、1.54、1.41和1.40mg·L-1;SDS对雌体24h、48h、72h和96h的LC50分别为54.33、30.85、25.21和15.85mg·L-1,对雄体分别为18.48、13.55、10.51和8.50mg·L-1;SDBS对雌体和雄体的安全浓度分别为0.24mg·L-1和0.32mg·L-1,而SDS对雌体和雄体的分别为2.98mg·L-1和2.19mg·L-1.结果显示,对安氏伪镖水蚤而言,SDBS比SDS的毒性更强;以半致死浓度LC50为参考依据,安氏伪镖水蚤雄体均比雌体对这两种表面活性剂敏感.     

Influence of a botanical pesticide,azadirachtin, on ultimobranchial gland of the freshwater catfish Heteropneustes fossilis

Freshwater catfish, Heteropneustes fossilis, were subjected to 42 mg L^?1 of azadirachtin for short-term exposure (96 h) and to 10.5 mg L^?1 for long-term exposure (28 days). Six fishes were sacrificed on each time interval from control and experimental groups after 24, 48, 72, and 96 h in the short-term exposure and after 7, 14, 21, and 28 days in the long-term experiment. The calcium regulating endocrine gland, viz. the ultimobranchial gland, was fixed for histological studies. Up to 72 h of azadirachtin treatment, there was no histological alteration in the UBG (ultimobranchial gland) of H. fossilis. After 96 h exposure, the ultimobranchial cells stain feebly and the nuclear volume of these cells were slightly decreased. No histological alterations have been observed in the UBG cells up to 14 days following azadirachtin exposure. After 21 days, the cytoplasm of ultimobranchial cells was feebly stained and the nuclear volume exhibits a decrease. The nuclear volume of these cells was further decreased and the gland shows vacuolization and degeneration at certain places after 28 days azadirachtin treatment. Hence, it can be concluded that azadirachtin severely affects the physiology of calcium homeostasis in H. fossilis. Therefore, the botanical pesticides should be used carefully near aquatic reservoirs.     

敌百虫对中国林蛙蝌蚪生长发育的毒性效应

为评价水域环境中敌百虫(trichlorfon)污染对两栖类幼体的急性毒性,将中国林蛙(Rana chensinensis)28～29期(Gos-ner)蝌蚪分别暴露于10～30 mg· L-1敌百虫5个不同浓度的水体中,分别在24、48、72和96 h统计蝌蚪的死亡率,计算半致死浓度(LC50).结果显示,暴露24、48、72和96 h,敌百虫对蝌蚪的LC50分别为14250±3.23、49.19±128、25.68±2.04、1555±1.93 mg·L-1,安全浓度(SC)为156±0.19 mg· L-1.蝌蚪中毒后尾部多呈弯曲状,仰翻,外观浮肿.对死亡蝌蚪的解剖表明,其鳃腔内充水,内鳃萎缩,肝脏、肠管和肾脏呈灰白色.另外,将28～29期蝌蚪分别暴露于0.2 ～ 2.0 mg·L-1敌百虫4个不同浓度的水体中进行慢性暴露实验,检测蝌蚪暴露28和42 d时的体重和体长以及75％个体变态所需的时间.结果表明,蝌蚪在低剂量敌百虫水体中持续暴露,其生长发育受到明显抑制,并可导致蝌蚪身体扭曲、尾部强直性弯曲等畸型发生,蝌蚪的死亡率显著增高,作用强度呈现剂量和时间的累积效应.慢性暴露实验证明SC以下的敌百虫水体仍威胁着蝌蚪的生存.     

3种杀菌剂及其复配剂对斑马鱼的急性毒性

采用"半静态法"测定了3种农药及其复配剂对斑马鱼的24 h、48 h、72 h和96 h急性毒性,根据我国《化学农药环境安全评价实验准则》中毒性等级划分标准来划分它们对斑马鱼的毒性等级,发现35%精甲霜灵悬浮种衣剂的24 h、48 h、72 h和96 h-LC_(50)均超过10 a.i.mg·L~(-1),属"低毒"级,而25 g·L~(-1)咯菌腈悬浮种衣剂的24 h、48 h、72 h和96 h-LC_(50)分别为0.704 mg·L~(-1)、0.514 mg·L~(-1)、0.424 mg·L~(-1)、0.262 mg·L~(-1),根据0.100 a.i.mg·L~(-1)LC_(50)(96 h)≤1.00 a.i.mg·L~(-1)划分,属"高毒"级,80%嘧菌酯水分散粒剂的24 h、48 h、72 h和96 h-LC_(50)分别为9.803 mg·L~(-1)、5.175 mg·L~(-1)、4.328 mg·L~(-1)、2.326 mg·L~(-1),根据1.00 a.i.mg·L~(-1)LC_(50)(96 h)≤10.00 a.i.mg·L~(-1)划分,属于"中毒"级。11%精甲霜灵-咯菌腈-嘧菌酯悬浮种衣剂的24 h、48 h、72 h和96 h-LC_(50)分别为2.267 mg·L~(-1)、2.073 mg·L~(-1)、1.620 mg·L~(-1)、1.280 mg·L~(-1),根据1.00 a.i.mg·L~(-1)LC_(50)(96 h)≤10.00 a.i.mg·L~(-1)划分,属于"中毒",虽然11%精甲霜灵-咯菌腈-嘧菌酯悬浮种衣剂和80%嘧菌酯水分散粒剂同属"中毒",但比较具体数值,发现11%精甲霜灵-咯菌腈-嘧菌酯悬浮种衣剂毒性相对更大,原因是其中含有"高毒"的咯菌腈。     

Cu^2＋对羽摇蚊幼虫（Chironomus plumosus）口器致畸作用和抗氧化酶活性的影响

采用静水生物测试法研究Cu^2＋对羽摇蚊幼虫的急性毒性效应。设定0．005、0．010和0．020g·L^-1 3个Cu^2＋浓度梯度进行急性暴露试验,分别于试验24、48、72和96h时测定摇蚊幼虫组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽-S转移酶（GST）的活性。结果表明,Cu^2＋对羽摇蚊幼虫体组织CAT和SOD有明显影响,表现出剂量-效应关系。GST活性在暴露72h后表现为受诱导作用（P＜0．05）,并在96h时达到最高值（P＜0．01）。对经0．005、0．010和0．020g·L^-1 3个Cu^2＋浓度梯度刺激7d后摇蚊幼虫的口器致畸情况的研究结果表明,致畸率与Cu“暴露浓度之间呈显著正相关关系（P＜0．05）。     

单甲脒在大鼠体内的吸收,代谢和排出的研究

大鼠经口灌喂单甲脒后，通过测定实验动物不同时间的血、尿及内脏中单甲脒和代谢产物２，４－二甲基苯胺的含量，研究了单甲脒在大鼠体内的呼收、代谢和排出的变化规律。单甲脒经消化道被迅速吸收，４８ｈ内９０％在肝脏代谢转化。７２ｈ内９０％以代谢产物的形式随尿液排出体外。     

Acute toxicity levels and ethological responses of Channa striatus to fertilizer industrial wastewater

The present paper deals with the toxicity of fertilizer's industrial wastewater on snake head fish Channa striatus (Bloch) previously named as Ophiocephalus sp., at different concentrations viz., 20, 40, 60, 80 and 100 percent on the behavioural changes and mortality. The exposed fish showed hyperactivity viz., jumping, operculum movement, distance travelling, somersaulting at higher concentration such as 60, 80, and 100 percent within 48 hr. At lower concentrations such as 20 and 40 percent exposed fish showed hyperactivities viz., linear movement and eye movement within 48 hr. The LC50 values of industrial wastewater were also determined viz. 89, 75, 70 and 69 percent at different duration of exposure time i.e. 48, 72, 96 and 120 hr respectively. The obtained data revealed that LC50 value decreased with increase of exposure.     

四溴双酚A(TBBPA)对中肋骨条藻的毒性效应研究

为研究四溴双酚A(tetrabromobisphenol A,TBBPA)对海洋微藻的毒性效应,本文设置五个不同浓度组(0、1.0、5.0、10.0、20.0 mg·L-1)进行中肋骨条藻(Skeletonema costatum)培养实验,在96 h内取样分析其光合色素含量、可溶性蛋白含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化。结果表明,较低浓度组(1.0和5.0 mg·L-1)叶绿素a、叶绿素c和类胡萝卜素含量48 h之前被显著诱导,最大值出现在24 h;较高浓度组(10.0和20.0 mg·L-1)三种色素含量在48 h之前被显著抑制,24 h达最低值;72 h之后各浓度组均恢复到对照组水平。不同浓度TBBPA胁迫下,中肋骨条藻的可溶性蛋白含量、SOD活性和MDA含量一般被显著诱导,SOD活性和MDA含量在72 h和96 h时随TBBPA浓度升高而增加。虽然1.0 mg·L-1TBBPA对中肋骨条藻生长不具有可观测效应,但已影响到其生理生化指标。目前海水中TBBPA浓度较低,尚不会对中肋骨条藻产生毒性影响。