石油降解菌的筛选及其降解能力的研究

从广州石化污水处理厂废水中自行分离出30株除油菌，用市售的90#柴油作为油品进行筛选，所得菌种用于处理石化厂物理隔油后的废水。通过研究含油量和接种量对除油率、COD的去除率和pH值的影响以及酸、碱、盐对除油率和COD去除率的影响来比较这些菌种对石化废水的处理效果。结果表明，6#菌株除油和去除有机物的效果都比较好，除油率约在70％左右，最高为83．67％，COD去除率约为55％左右，最高为60．01％；5#菌株对环境要求较高，在碱性环境下表现出较好的除油和去除有机物的能力，除油率和COD去除率分别为55％和50％左右。实验菌株在消除石化废水的异味方面也有一定的效果。     

高效石油烃降解菌SKD-1的分离、筛选及其降解性能

从孤岛油田石油污染土壤中分离到一株高效石油降解菌,命名为SKD-1。该菌株菌落表面湿润光滑、边缘整齐、圆形、不透明、乳黄色,能够利用葡萄糖和淀粉作为其生长的碳源和能源,其最适生长环境为碱性（pH8-10）,在分别以正十六烷烃和原油为惟一碳源,温度为30℃,摇床（180r／min）培养的条件下,菌株SKD-1的降解率分别为66．1％和36．9％。16SrRNA基因序列分析表明,菌株SKD-1与不动杆菌AcinetobactercalcoaceticusSY-1同源性达99％。结合菌株SKD．1菌落形态、理化性质以及系统发育分析,可以鉴定菌株SKD-1属于不动杆菌属（Acinetobactersp．）,序列登录号为AB774229。     

烟酰胺降解菌的筛选及其降解特性

采用HPLC对某烟酰胺生产废水的主要成分进行分析，并模拟废水中的主要成分烟酰胺（nicotinamide）的浓度，对以烟酰胺为唯一碳源配制的培养基进行降解实验，获得有较佳降解率和生长能力的菌株YSI-1和YSI-2。结果表明．YSI菌株的混合菌降解效果优于单株菌，混合菌在初始OD600值为0．4，pH为7．0时，对浓度为2000mg／L的烟酰胺降解2d的降解率可达32．8％。延长处理时间或提高菌种的初始OD600值，烟酰胺的去除率均有较大的增加。     

烟酰胺降解菌的筛选及其降解特性

采用HPLC对某烟酰胺生产废水的主要成分进行分析,并模拟废水中的主要成分烟酰胺(nicotinamide)的浓度,对以烟酰胺为唯一碳源配制的培养基进行降解实验,获得有较佳降解率和生长能力的菌株YSI-1和YSI-2.结果表明,YSI菌株的混合菌降解效果优于单株菌,混合菌在初始OD600值为0.4,pH为7.0时,对浓度为2000 mg/L的烟酰胺降解2 d的降解率可达32.8%.延长处理时间或提高菌种的初始OD600值,烟酰胺的去除率均有较大的增加.     

一株假单胞菌降解石油污染物的降解动力学与降解机制

从某石油污染场地土壤中分离出一株石油降解菌B-1(Pseudomonas),研究了该菌株降解石油污染物的动力学,通过气相色谱(GC)/质谱(MS)分析了石油组分降解前后的变化规律,并对其降解机制进行了初探。结果表明:(1)苯、二甲苯、萘的降解动力学拟合方程大部分与一级降解动力学方程拟合效果良好,苯、二甲苯、萘的降解半衰期分别为0.47~1.67、1.54~3.60、4.41~7.00d;(2)可以通过全扫描图谱及检索出的代谢产物明确微生物降解苯、二甲苯、萘的降解途径。     

高效纤维素降解菌的筛选

比较研究了刚果红脱色、滤纸崩解等几种纤维素分解菌筛选方法，并从腐木、腐竹、腐叶等样品中筛选获得4株高效纤维意降解菌，其中细菌1株(嗜纤维菌属)，真菌3株(木霉菌属)。该细菌可在4d内将滤纸平板完全降解为枯质。通过改变酶解条件，确定Z—2为进一步优化对象，并进行了相应的单因子优化实验，初步确定其量佳产酶条件为：培养温度30℃，初始pH4．5，不含尿素，GLC和纤维意含量分别为0.4％和0．6％。     

一株产表面活性剂石油降解菌筛选及其特性

为了从含有原油的样品中筛选出降解性能良好的产生表面活性剂菌株。利用富集、驯化培养、不同配方培养基筛选和排油活性测定,筛选出产高效生物表面活性剂的菌株。在形态特征和生理生化鉴定的基础上,对其16S rDNA 序列进行了分析,并分别采用称重法和薄层层析法（TLC）测定其原油降解率和鉴别其表面活性剂的类型。进一步考察了不同种类的碳源和氮源、不同梯度的温度、盐度、酸碱度对其生长和排油活性的影响。筛选出一株高效脂肽类生物表面活性剂的菌株A-08,对其进行形态学、生理生化特性及16S rDNA 序列同源分析,此菌株为荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）。A-08最适条件为碳源是食用油和液体石蜡,氮源为（NH4）2SO4,温度40 ℃,盐度20%,pH 7.0,培养7 d后原油降解率为40.37%。实验筛选的菌株能适应较广泛的环境条件,可以对石油污染进行有效生物修复,具有较好的意义和应用价值。     

石油降解菌的筛选及降解性能研究

从石油污染的土壤中分离驯化,得到特征明显的石油降解菌,研究了不同时间、石油浓度、接种量、pH值、基质及添加物等条件对降解菌降解石油的影响。结果表明：在实验条件下,降解菌接种量越多,降解效果越好;石油降解效率随着石油浓度的增加而降低;当初始pH值为7时,降解菌去除石油效果最佳;添加适量蔗糖或葡萄糖,对石油的降解有促进作用;吐温80对石油降解有一定的抑制作用。     

地下水石油污染生物处理技术研究

地下水石油污染防治技术正日益受到国内外学者的重视，通过模拟装置对地下水生物除油技术进行了探索性试验。结果表明，在地下水中投加除油菌群４天时间内，油的去除率可达到５０％以上，其净化过程沿整个地下水污染带自然进行，不会带来二次污染。     

酵母菌产乳化剂能力及其对含油废水降解性能的影响研究

研究了3株酵母菌（Candida lipolytica、Candida tropicalis和Candida halophila）产乳化剂能力与废水降解性能的关系。研究结果表明,3株酵母菌在含油废水中生长良好,且均可产生乳化剂。培养5 d后,菌株Candida lipolytica和Candida tropicalis的油脂去除率达到了94%以上;培养第3天时废水溶液中的乳化剂含量最高,分别为21 g/L和34 g/L;菌体细胞产乳化剂最高量出现在培养的第1天,分别为17(ng?mL-1）/100 cfu和13.5（ng?mL-1）/100 cfu;Candida halophila产乳化剂能力较弱,溶液中乳化剂量和菌体细胞产乳化剂量最高分别为12 g/L、0.45（ng?mL-1）/100 cfu,油脂去除率最大为66%。研究表明,酵母菌株产乳化剂量及乳化能力直接影响到酵母菌对废水中油脂的降解效果。3株酵母菌对废水COD去除率均达到80%以上,差异不明显,可能与不同菌株对不同种类基质的利用效率有关。     

油污土中降解柴油细菌的分离鉴定及降解能力研究

从所采集柴油污染土壤样品中富集、分离得到柴油降解优势菌株,命名为B-3和B-4.根据其生理生化性质及16S rDNA序列比对分析,确定2株菌分别属于Tetrathiobacter kashmirensis、假单胞菌属(Pseudomonas sp.).由于实验中,B-3的生长曲线较特殊,故以B-3和典型石油烃降解菌假单...     

柴油降解菌的筛选、菌群构建及其对柴油和十五烷的降解机理

针对柴油污染土壤生物修复技术效率低的问题,通过构建高效降解菌群修复柴油污染的土壤,采用组合优化和正交实验构建最佳组合与接种比例的菌群,并研究其柴油降解特性。结果表明,通过筛选、鉴定并命名的4株柴油降解菌为Bacillus sp. VOC18-L1、Enterococcus faecalis-L2、Lysinibacillus-L3、Rhodococcus equi-L4;当4株菌接种比例为3∶1∶3∶4,pH = 7.0,30 ℃,转速150 r·min⁻¹时,柴油降解的效果最佳,14 d对7.0 mL·L⁻¹的柴油降解率达到89.0%。通过气相色谱质谱联用仪(GC-MS)检测柴油降解产物,发现该混合菌株能将柴油中的烷烃降解为短链烷烃,最终转化为小分子物质。同时利用KEGG数据库获得代谢丰度图并初步预测每种菌的功能,根据微生物多样性测试结果,进一步证明了混合菌对柴油完全降解的效果优于单种菌种。通过人工构建的微生物菌群可以有效地应用于柴油污染土壤的修复。     

稠油降解微生物的筛选鉴定及其降解特性

从二连油田原油和油层水中筛选驯化出3株能够降解稠油的细菌DS1、DS2和DS3,通过16S rRNA基因序列比对发现DS1、DS2和DS3分别与溶血不动杆菌(Acinetobacter haemolyticus)、鹑鸡肠球菌(Enterococcus gallinarum)和耳炎短杆菌(Brevibacterium otitidis)相似度最高,分别为99%、99%和98%。研究结果表明,DS1对温度和pH有较强耐受性,DS3对盐度的适应性较好,2株菌最适的降解条件为温度35~40℃、盐度2%~5%(W/V)、pH为7~10。在5%的原油浓度下,复合菌对原油的30 d降解率达89.2%。经GC-MS分析,微生物降解作用后,除C29其他烃类几乎被全部降解。3株菌在7d内对500 g/L粘度为1 746 mPa·s(50℃)的稠油降粘率分别为49.1%、46.6%和49.0%,而复合菌对稠油的降粘效果高于单一菌株,其降粘率达到57.0%。     

利用不同组分原油逐级驯化筛选高效石油烃降解混菌

利用不同组分原油逐级驯化的方法对克拉玛依油田的石油污染土样进行石油烃降解混菌的富集驯化,得到一组对稀油和稠油均具有高效降解能力的混菌M3。与采用单一原油驯化方法相比,混菌M3对稀油和稠油的降解率分别提高了12.5%和22%。该混菌具有较强的产表面活性剂的能力,能够使发酵液的表面张力从69.8 mN·m-1降至27.9 mN·m-1。通过混菌M3的生长条件优化实验得出：在温度30 ℃、pH 7~8、盐度1%、氮源选择尿素的条件下,混菌M3对原油的降解率最高。通过考察混菌M3在污染土壤中对原油的降解效果,发现：在修复期间,土壤脱氢酶呈先升高后降低的趋势;混菌M3可使饱和烃组分增加,并使芳香分、胶质和沥青质组分降低,对重质组分具有较好的降解效果。混菌M3的加入改变了原油性质,促进了土壤中原油的降解,经过56 d修复,土壤中原油降解率达到55.3%。     

华北某油田石油降解菌的筛选及降解特性

以石油为唯一碳源,从华北某油田污染土壤中筛选出石油降解菌12株。其中5株菌有较强降解能力,分别编号为z-3、z-6、z-7、z-8和z-b,在30℃,160 r/min摇床培养10 d后,菌株对石油降解率分别为63.8%、34.2%、44.8%、50.5%和42.3%。通过生理生化和分子生物学鉴定,确定这5株菌分别属于假单胞菌属（Pseudomonas）、根瘤菌属（Rhizobium）、假黄单胞菌属（Pseudoxanthomonas）、假单胞菌属（Pseudomonas）、鞘氨醇单胞菌属（Sphingomonas）。通过对这5株菌生物量、脱氢酶及邻苯二酚 2,3-双加氧酶活性的监测,发现生物量及酶活性与石油降解能力具有直接关系。最后,对5株菌的生长条件进行优化,其中z-3、z-6、z-7和z-b菌株对石油降解率较优化前提高10%左右。     

石油降解菌的细胞表面疏水特性研究

实验采用从受污染水体分离出的6株石油降解菌D3、T4、R4、T1、D4和R3,对石油菌细胞表面疏水性的测定方法进行了研究并分析了环境因子对细胞表面疏水性的影响。结果表明,在采用葡萄糖培养基测定的细胞表面疏水率误差最小,最优的菌悬液与二甲苯的比值为4∶1.5;细胞表面疏水率在高盐度条件下会下降,初始pH在中性环境时数值最高,温度在25℃时疏水性最好。对比表面疏水率与柴油降解率随时间的变化得出细胞表面疏水性与柴油降解率具有一定的相关性,细胞表面疏水率在培养3 d之后基本趋于稳定。     

机油高效降解菌群筛选及降解效果初探

从多处受石油污染的土壤中经过初步筛选、混合驯化得到以机油为唯一碳源进行生长代谢的混合菌群.利用此混合菌群进行的降解实验结果表明,该菌群对高浓度机油废水具有较强的降解能力,初始含机油约2.0 g/L的人工废水.接种量为0.1%(菌体湿重/培养液体积),经过7 d的降解,机油可降至403 mg/L,降解率达81.4%;对不同浓度机油废水的降解实验结果表明,在静态实验条件下,机油质量浓度在不高于1 000 mg/L(含1 075 mg/L),混合菌群在降解过程中能自行从降解产酸的不良环境中恢复,机油质量浓度在2 000 mg/L以上,初期产酸较多,pH下降幅度较大,在7 d的周期内,废水pH无法恢复,说明在降解后期仍有大量有机酸积累而未被彻底降解;与葡萄糖共基质的降解实验结果表明,经过7 d的降解.不超过150 mg/L,的葡萄糖与1 000 mg/L机油组成的共基质体系中,机油降解基本不受葡萄糖加入的影响,但可加强早期的降解速率.而葡萄糖高于150 mg/L时,则会对混合菌群的除油率产生抑制,抑制程度随着葡萄糖浓度的提高而加大.     

PCR-酶切技术在石油烃降解菌筛选鉴定中的应用

将以原油驯化所得的纯培养微生物菌株作为模板,采用PCR(聚合酶链式反应)法,用扩增细菌16S rDNA的一对通用引物(8 f,1492 r)对模板扩增,并用限制性内切酶R saI和M spI对PCR产物进行ARDRA多态性分析。聚类去除重复菌株后60株菌株可分为11种不同分类操作单元(OTU),同时得出每个分类操作单元的数量。实验结果表明,此方法可快速去除重复菌株并反映出菌株间的系统进化关系;同时实验数据可构建成库,使后续分离菌株的筛选工作只需比对数据即可完成。