水稻高效转化系统的建立

利用基因枪轰击和农杆菌介导两条途径转化水稻成熟胚、幼胚、幼穗诱导来源的愈伤组织．实验发现，外植体来源影响愈伤组织的诱导和转化．对于同一水稻品种，幼胚、幼穗在NB2培养基上比成熟胚易于诱导出胚性愈伤组织；转化中，无论是经农杆菌介导还是基因枪轰击，幼胚和幼穗来源的愈伤组织能以较高的转化频率获得转化体并再生成苗．同时，愈伤组织的诱导和转化效果也受基因型的影响．另外，转化途径对转化效率的影响较大，基因枪轰击比农杆菌介导转化频率高、再生频率强．并且，在轰击前6h至轰击后18h，将愈伤组织保持在附加20g／L甘露醇的培养基中，有利于转化率的提高．图2表3参17     

phlb基因在普通小麦与簇毛麦杂种F1中的作用

通过CS、CSph1b与Haynaldiavillosa杂交,幼胚拯救,获杂种F1,其结实率分别为6．67％（12／18）、625％（25／400）对杂种F1植株花粉母细胞减数分裂中期Ⅰ染色体行为观察发现CS×H.villosa杂种F1平均每PMC仅有1．61条染色体形成二价体和三价体,平均构型为2n＝28＝26．391＋0．79Ⅱ＋0．007Ⅲ,平均染色体交叉数为0．84;而CSph1b×H．villosa杂种F1每PMC中有14．43条染色体发生联会,形成二价体和多价体,平均约型为2n＝28＝13．551Ⅰ＋5．95Ⅱ＋0．55Ⅲ＋0．22Ⅳ,为9．72,其中56％以上的PMC具1～4个多价体（三、四价体）表明Ph1b基因强烈诱导了普通小麦与H.villosa间的部分同源染色体配对杂种F1育性极差,自交均不结实.CS×H.villosa杂种F1与CS回交结实率为6．67％（4／60）,但CSph1b×H．villosa杂种F1与CS、CSph1b回交极难,结实率仅为0．45％（6／1320）．CSph1b×H．villosa杂种已与普通小麦回交成功,为利用ph1b实现簇毛麦优良基因直接对小麦遗转移奠定了基础．     

亚硒酸钠对水稻愈伤诱导和绿苗分化的影响

实验证明，亚硒酸钠对水稻外植体（成熟胚、幼穗）、愈伤组织和再生绿芽体细胞的生长都有不同程度的抑制作用，其抑制程度依次为再生绿芽＞愈伤组织＞外植体，但能促进它们的绿苗分化频率，特别在低硒浓度（１ｍｇ／Ｌ）处理组，并可改变它们的过氧化物酶同工酶的活性。     

城镇绿地对空气质量的影响--以中山市小榄镇为例

对中山市小榄镇公园、街道、居住区等不同地区的空气质量进行了测定．结果表明：公园、苗圃、金菊花园、镇府大院和小榄中学等绿化好、总绿量大的地带，CO2浓度[Ψ(CO2)／10^-6]和含菌量(n／m^-3)明显较低，负离子浓度明显较高；街道、新永路民居、商场、工厂、车站和果菜批发市场等绿化差、总绿量小的地带，Ψ(CO2)／10^-6和含菌量明显偏高，负离子浓度明显偏低．街道上空的Ψ(CO2)与车流量之间有极显著相关关系Ψ(CO2)与人流量之间相关关系不显著．     

荔枝胚性愈伤组织体胚发生系统的优化及转化抗性愈伤组织培养再生植株

首先优化了荔枝(Litchi chinensis Sonn.)幼胚胚性愈伤组织(embryogenic calli,EC)体胚发生的条件，在附加5mg L^-1 ZT的高糖(60g L^-1)高琼脂(10g L^-1)的MS培养基上获得了荔枝高频率(100％)体胚发生；同时，对荔枝体胚成熟和成苗的关键问题作了分析，建立了一套完整的荔枝体胚发生与再生系统，在附加10％椰子汁的高糖(6％)MS培养基上诱导体胚正常成熟，并在无激素MS培养基中诱导体胚萌发，为荔枝转基因研究提供了良好的受体系统．利用此再生系统对荔枝转基因抗性愈伤组织进行体胚发生与再生植株研究，获得了大量再生植株．图1表7参11     

RAPD分子标记在鉴定香樟优选株和普通株中的应用

从85个随机引物中选10个随机引物对8个香樟样品的DNA进行了扩增，应用RAPD技术区别6个优选株和2个普通株，共获得78个DNA片断，把这些DNA片断作为遗传位点用UPCMA法计算出各材料间的遗传相似性系数，并作了聚类分析．在D＝0．738处8个样品分为两大类，而且普通株同优选株的亲缘关系很近．图2表2参9     

绵农小麦种子巯基蛋白酶抑制剂的纯化及性质研究

绵农11号小麦种子磨粉后的胚和麸皮，经溶液浸取和硫酸铵分级沉淀获得巯基蛋白酶抑制剂（CPI）粗品，再经木瓜蛋白酶－Sepharose4B亲和层析，DEAE－Sepharose离子交换层析和SephadexG－100分子筛层析，可获得两种CPI．通过SDS－PAGE或凝胶过滤法测得其Mr分别为18800［简称CPI（H）］和10500［简称CPI（L）］．它们在PAGE，SDS－PAGE和HPLC上均为单一蛋白带．CPI（L）和CPI（H）对木瓜白酶的抑制活性（ID50）分别为7．8×10－6mol／L和3．40×10－6mol／L．对无花果蛋白酶的抑制活性分别为9．5×10－5mol／L和5．8×10－6mol／L；CPI（H）对菠萝蛋白酶有弱抑制作用，但CPI（L）则无抑制作用；无论是CPI（L）或CPI（H）对胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和胃蛋白酶均无抑制作用．CPI（H）的N－末端为Ile．CPI（H）和CPI（L）在pH2．0～11．0范围内和90℃处理5min，两种CPI的抑制活性均无变化；CPI（H）和CPI（L）对木爪蛋白酶的抑制曲线经Dixon作图法，得出CPI（H）为反竞争性抑制类型，而CPI（L）为竞争性抑制类型，其Ki值为8．32×10－6mol／L．     

水位变化对三峡库区低位狗牙根种群的影响

2009年调查研究了三峡库区长寿段消落带的狗牙根（Cynodon dactylon L．）种群,探讨了库区水位变化对低位狗牙根种群的影响。结果表明,156m处狗牙根地下茎的总茎长、总茎节数和总茎节数／总茎长大于150m处的狗牙根,分别比后者多20．3％、30．1％、11．3％;而其地下茎的总芽数／总茎长、萌芽数和萌芽率分别比后者低7．5％、34．3％、74．9％。同时,156m处狗牙根分株的株数、茎长、叶宽、叶长低于150m处的狗牙根,分别比后者少了26．2％、10．8％、19．0％、37．9％;其茎节数、茎节数／茎长、叶片数、根长较大,分别比后者增加了18．7％、34．2％、10．0％、22．6％。156m处狗牙根植株分株的鲜质量、干质量、鲜质量／总鲜质量、干质量／总干质量分别比150m处的狗牙根低32．5％、13．2％、18．2％和14．2％;其地下茎的鲜质量、干质量、鲜质量／总鲜质量、干质量／总干质量分别比后者高5．8％、17．5％、27．2％、15．2％;且前者的分株、地下茎和根的干鲜质量比均分别比后者高29．6％、12．5％和17．6％。表明,库区水位变化显著促进了150m处狗牙根地下茎茎节伸长、芽形成、芽萌发和分株的生长。因而,低位狗牙根对库区水位变化具有较强的适应能力。     

优良籼型恢复系转基因植株的获得及其遗传稳定性

报道了用基因枪转化法将雪花莲凝集素基因(gna)转移到优良籼型杂交稻恢复系蜀恢527中．PCR、PCR Southern blotting和Southern blotting等分子检测证明，外源基因以多拷贝单位点方式整合到受体基因组中并稳定遗传到转基因第三代(T2)．转基因第一代植株(TO)在株高和结实率上与相应的组培、种子实生苗植株相比，发生明显的不可遗传的变异，随着繁殖代数的增加，转基因植株恢复到与对照植株一致．Western blotting表明，目的基因在转基因植株中正确表达．蛋白活性分析显示，外源基因在转基因植株中合成的蛋白具有凝血生物活性，含量占可溶性总蛋白的0．1％左右．本文还对转基因技术在杂交稻育种中的应用进行了讨沦．图4表2参18     

香花槐组培苗快繁体系的建立及工厂化育苗的主要影响因素

建立了香花槐组培苗快繁无性系．在改良MS培养基中添加ρ(6-BA)／mg L^-1=0．35～0．5、ρ(NAA)／mg L^-1=0．05～0．08，ρ(GA3)／mg L^-1=0．07～0．1作为生长培养基．在丛生芽诱导培养基中，ρ(6-BA)／mg L^-1=0．8～1．4，其余成分同生长培养基．两种培养方法同时使用，保证了组培苗繁殖系数为5左右．生根培养基中大量元素为MS基本培养基的1／4，ρ(IBA)／mg L^-1=0．1～0．5、ρ(IAA)／mg L^-1=1．7～2．5，香花槐组培苗的生根率为90％．炼苗后组培苗的移栽成活率为85％，且植株表型未见变异．将MS基本培养基中硝酸钾的含量由1.9g／L提高至2．199～2．931g／L，可满足每代香花槐试管苗生长25～35d期间对钾的需求．将培养基中6-BA的含量降至0．4mg／L，并采用合适的组培容器，在连续培养2、3代后，可将超度含水态苗的发生频率控制在10％以下，在6mo内生产100万株香花槐组培移栽苗．图1表1参16     

双农杆菌共转化获得无标记转pepc基因的水稻植株

利用双农杆菌/双质粒的共转化系统获得了无选择标记转pepc基因的水稻植株.采用两个农杆菌EHA105转化粳稻品种台粳9号幼胚诱导的胚性愈伤组织,其中一个农杆菌内的质粒表达载体的T-DNA区仅含有目的基因pepc,另一个的T-DNA区含有选择标记基因hpt和GUS报告基因.获得抗性愈伤的转化率为9.2%.85.3%的抗性愈伤分化成T0代株系,其中78.8%的T0代植株为GUS阳性转基因植株.PCR分析表明,在78个T0代GUS阳性植株(来源于23个抗性愈伤组织)中共有35个植株(来源于7个抗性愈伤组织)含有pepc基因,即在23个GUS阳性株系中发生共转化株系的频率为30.4%.7个共转化的株系中有5个株系自交产生后代植株中含有无标记转pepc基因植株,其比例为71.4%.无标记的转pepc基因水稻植株中PEPC活性平均比对照提高8.8倍;与非转基因对照植株相比,转pepc基因水稻植株表现出更强的光合能力.图5表3参26     

Phytoaccumulation of iron by callus tissue of Clerodendrum indicum (L)

Clerodendrum indicum (L.) is one of the important medicinal plants, originating in India. The plant is used as medicine for bronchitis, asthma and different immunological disease. Micro-propagation is a quick method, producing a huge number of plants. Apical leaf of Clerodendrum indicum (L.) was used as an explant for callogenesis. The combinations of different plant growth regulators (2,4-D, NAA, KN) in MS (Murashige and Skoog) medium produced two types of calli: one was friable and loose and the other was green, embryogenic and compact. Heavy metals cause pollution and health hazards. The plant absorbs heavy metals, which is very useful for controlling environmental pollution. Iron is a major nutrient for both plants and animals, but hyper accumulation of iron is injurious to health. Calli were used to study the optimum conditions of iron uptake in presence of different chemical environments. The different environments were created by using different chemical reagents such as (HCL, HNO₃, H₃PO₄ and KNO₃). Iron (III) was spiked with radioactive Fe-59 and dynamics of uptake was followed by measuring radioactivity by gamma-ray spectrometer. The best condition of iron uptake corresponded to 1 mol L^?1 KNO₃ after 4 hour of equilibration.     

长期继代培养马铃薯愈伤组织的植株再生

对影响马铃薯愈伤组织发生、生长和长期继代培养的愈伤组织再生植株的几种因素进行了研究。马铃薯茎段的愈伤组织发生频率高于叶片的愈伤组织发生频率。Ｄｉｃａｍｂａ诱导茎段和叶片的愈伤组织发生频率在９０％以上；而２，４－Ｄ的诱导效果不佳并诱发外植体生根。再生培养其中加入０．５ｇ／Ｌ的酶解酷蛋白是必需的；蔗糖的浓度以２％－４％为宜；附加ＺＴ２．０ｍｇ／Ｌ、ＧＡ０．１ｍｇ／Ｌ可使长期继代的愈伤组织的植株再生频率     

Xα21基因导入水稻及转基因植株的鉴定

以水稻愈伤组织为受体、质粒pCXK1301为Xα21基因供体,用农杆菌EHA105和PDS－1000／He基因枪转化受体,经Hyg浓度梯度筛选,获得一些转基因水稻植株,GUS检测、PCR扩增和Southern杂交分析表明,报告基因（GUS）、选择标记基因（Hyg^r）和抗白叶枯病基因Xα21都已整合入转化水稻基因组中,Southern杂分析显示了Xα21基因在转化水稻基因组中整合的拷贝数。田间接菌鉴定表现抗白叶枯病。     

青稞B-hordein基因表达载体构建及对小麦的遗传转化

利用从具有特殊B-hordein亚基组成的青藏高原青稞材料中克隆的B-hordein编码基因(SL60)和小麦高分子量谷蛋白亚基胚乳特异表达启动子PGlu1Dx构建了真核表达载体pCB2007-SL60.通过农杆菌介导对普通小麦进行遗传转化,共获得227株再生植株,经PCR鉴定和转化片段测序验证,最终获得5株阳性植株.研究为进一步分析B-hordein基因在小麦背景中的遗传和表达,以及对小麦加工特性的影响奠定了基础.图5表2参21     

离体培养植物细胞的表面与细胞粘连

对离体培养的胡萝卜（Ｄａｕｃｕｓｃａｒｏｔａ）细胞和普通烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ）细胞的表面进行了扫描电镜观察．观察表明，细胞的自由表面上有很多疣突和纤丝．疣突的大小不同、形状各异，主要含果胶质；有些细胞表面出现小坑，坑中集中有许多微小颗粒．疣突相互可融合成更大的疣突或连成桥；纤丝常与疣突结合．纤丝－纤丝的交织，纤丝－疣突的交联，及疣突－疣突的融合，在细胞壁外表面构成交织的网络．同种细胞之间及异种细胞之间均可通过纤丝、疣突的交织融合而粘连．疣突分布不均一，且与细胞的分散性有关．与疏松烟草愈伤组织比较，致密烟草愈伤组织细胞的自由表面上疣突显著较多．在分化再生时，烟草愈伤组织首先致密变绿，然后才见到芽的分化及植株再生．对疣突出现、壁物质沉积与细胞粘连、细胞分化、形态建成几者之间的关系进行了讨论．     

芹菜赖氨酸加苏氨酸抗性细胞系的选择

用４ｍｍｏｌ－／Ｌ浓度的赖氨酸加苏氨酸作为选择压，经相同浓度液体和固体选择培养基连续选择，从未经诱变处理的芹菜胚性愈伤组织筛选出一个稳定的赖氨酸加苏氨酸抗性细胞系并得到再生植株。抗性细胞系再生植株整株的氨基酸含量比对照组植株高１０倍左右。但是地上部分氨基酸含量，抗性细胞系再生植株比对照植株有所降低。两种植株叶片的细胞色素氧化酶同工酶谱有明显差异，抗性细胞系再生植株有４条谱带，而对照植株只有两条谱带     

土壤施加垃圾堆肥的允许负荷量

利用城市生活垃圾堆肥进行生菜、青菜、小麦三种作物的盆栽试验，并根据作物中金属元素Ｃｄ、Ｃｕ、Ｃｒ、Ｐｂ、Ａｓ的含量，探讨了三种土壤施加垃圾堆肥的效果及允许负荷量，结果表明：土壤消纳垃圾肥的潜力很大，但不同土壤类型对垃圾肥的负荷量有明显差异。