海洋细菌生物量的测定方法

海洋微生物中,细菌在数量和种类上都占有绝对的优势,因此它是海洋微生物生态调查的主要内容。其生物量的测定,则是海洋细菌生态调查的基础。由于海洋细菌个体微小、形态多样,加}海洋环境中存在着活的、休眠与死亡的菌体和一些菌团、有机碎屑等颗粒物质,这给海洋细菌生物量的测定带来了许多困难。     

海洋防污细菌的筛选与鉴定

海洋细菌具有防止污损生物幼虫变态、附着的能力。本文从海洋生物膜中分离纯化出8株细菌,采用平板法筛选出4株蛋白酶产生菌,其中725-1和725-4的生长情况及产蛋白酶性能最强;分别测定了725-1及725-4菌株的16S rRNA基因序列,分析了相关细菌相应序列的同源性,构建了系统发育树,结果表明:725-1为芽孢杆菌Bacillussp.,725-4为Aeromonas molluscorum。实验室内利用藤壶幼虫变态率抑制试验和贻贝足丝形成抑制试验确定株菌有良好的防污功能,725-4对藤壶腺介幼虫变态的的抑制率为76%,对贻贝足丝形成的抑制率达到100%。     

北黄海三类废弃物试验倾倒区海洋细菌的生态学研究——Ⅰ 海洋异养细菌的分布

本文报道了北黄海倾倒区水和沉积物中异养细菌的数量分布,分析了其菌属组成和季节变化。结果表明,本海区表层水中异养细菌平均丰度为:2.8×104个·L-1,表层沉积物为:3.6×104个·g～1。异养细菌数量垂直分布以表层水菌数最高,30m层次之,10m和45m水层菌数最低且相似,一般比表层少1个数量级,比30m层少近半个数量级,而且该分布趋势四季一致。夏季表层水中菌数比其它季节高约1个数量级,其它三季则没有明显季节变化。表层沉积物中细菌数量的季节变化四季基本无差异。 本海区异养细菌菌群由1了个菌属组成。其中,革兰氏阴性细菌在表层水中占优势,优势菌属为:黄杆菌属、葡萄球菌属、不动细菌属、假单胞菌属和黄单胞菌属。在表层沉积物中,革兰氏阴性和阳性细菌所占比例相近,优势菌属为:黄杆菌属、葡萄球菌属、棒状杆菌属和肠杆菌科。     

溢油后海洋沉积物中细菌群落的多样性

海洋沉积物既是污染物的蓄库,也是上覆水的污染源,溢油对海洋沉积物的影响已日益受到人们的关注。海洋沉积物具有高的细菌丰富度和多样性,不同沉积物的异质性导致细菌群落对溢油的响应各不相同,其群落结构和多样性在一定程度上可反映石油污染程度和生物降解水平,且烃降解基因的相对丰度与污染水平之间具有直接相关性。本文对溢油后海洋沉积物中细菌群落的多样性进行了综述,重点分析了溢油后潮上带和潮间带、潮下带及海底沉积物细菌群落多样性的变化。     

北黄海碱渣及三类废弃物试验倾倒区海洋细菌的生态研究 Ⅱ海洋硫化细菌、硝化细菌的分布

本文在国内首次报道了北黄海硷渣及三类废弃物试验倾倒区水和沉积物样品中硝化细菌和硫化细菌数量的水平和垂直分布,分析了菌属组成和季节变化。 硫化细菌在水样和沉积物样品中的检出率均为100％。但数量此本海区异养细菌少1个数量级,在表层海水中平均为4.8×103个·L-1;表层沉积物中平均为1.4×103个·L-1。而且,分离的硫化细菌菌株都隶属于硫杆菌属(Thiobacillus sp.)。 硝化细菌在该海区检出率很低,表层水样中检出率为26.9％;表层沉积物为22.2％。前者大多在50个·L-1以下;后者一般少于250个·L-1。本海区的硝化细菌(不包括亚硝化细茵)由硝化球菌属(Nitrococcus sp.)、硝化刺菌属(Nitrospina sp.)和硝化杆菌属(Nitrobacter sp.)三个菌属组成。以检出率最高的春季为代表,硝化细菌的优势菌属无论在水样和沉积物样品中均为硝化杆菌属。此外,硝化细菌的数量在一定程度上受水温和亚硝酸盐含量等的影响。     

2株海洋石油降解细菌的降解能力

为实施海洋石油污染的生物治理,从厦门储油码头油污水中分离得到了2株石油降解菌.它们能够在以柴油、萘或芘为唯一碳源的培养基中生长,并适应于海洋环境的温度、pH和盐度.它们对萘都有很强的降解能力,3d内降解率可达87.53%和84.01%;7 d内对芘降解率分别为8.35%、5.37%.经16S rDNA同源性分析表明2菌株之间及其与施氏假单胞菌的同源性皆为99%;Biolog生化鉴定也表明它们为不同的菌株.通过兼并PCR扩增,序列分析发现2种菌编码完全相同的萘双加氧酶基因,该基因与其它假单胞菌的萘双加氧酶大亚基有98%同源性.     

两株海洋细菌新种的分离及BOX-PCR鉴定

对即墨海参养殖池及即墨盐场的底泥样本进行微生物的可培养研究,获得的两株细菌DQHS13与YCSA40,其与亲缘关系最近的模式菌株Marinobacter zhejiangensis及M.segnicrescers的16S rDNA序列相关性分别为98.789％和96.963％,初步判定为海杆菌属(Marinobacte...     

太古代含硫酸盐温暖海洋中的细菌活动

在现代海洋沉积物中,海水硫酸盐的细菌还原作用是形成成岩硫化物的原因,这种硫化物相对于原始硫酸盐而言一般强烈亏损~(34)S,而且其δ~(34)S值变化极大。相反,太古代沉积硫化物的δ~(34)S值一般变化不大,而在相同的沉积单元中硫酸盐的δ~(34)S值几乎不变。这一发现使得以前的研究者认为,或者硫酸盐还原细菌必须在太古代(特别是在2.75Ga前)发育,或者太古代海洋中的硫酸盐含量太少(<<1 mM,而在现代海洋中为28 mM),这意味着太古代大气层内所含的游离氧大大低于现代大气层中的。然而,如果硫酸盐还原细菌在温度为30—50℃,含有大量(>1mM)的硫酸盐、δ~(34)S值约为+3‰的海洋中就已经活跃,那么2.6—3.5Ga前的太古代沉积物的硫同位素资料就可以得到更满意的解释。     

化学消油剂及其对海洋异养细菌丰度的影响

前言 消油剂亦称乳化分散剂,或广义地称之为石油处理剂。它是当前广泛应用海上溢油处理的一类化学药剂。 早在60年代,世界上一些国家就开始应用消油剂处理海上溢油,但由于最初使用消油剂处理海上溢油时,只注重了消除油污的效果,而没有足够重视对海洋生物的毒性影响,所以曾一度给消油剂处理海上溢油工作造成不良影响。例如,1967年在英国的兰茨恩德海面的七石礁,“托里·卡尼恩”号油轮搁浅,海上溢油达10万吨。为了处理这样大量的溢油,当时曾使用相当量的“消油剂” (确切地说应是“洗净剂”)。但由于这种“消油剂”对海洋生物毒害较大,造成有些海区甚至成为无生物区,为此,英国海洋生物协会等进行了大规模     

海洋浮游细菌在东海赤潮高发区的分布与活性

于2006年4~5月对东海近海28°~30.7°N之间的赤潮高发区浮游细菌的分布、活性和群落结构特征进行了调查.采用荧光显微计数法测定细菌丰度,荧光模拟底物法测定细菌胞外酶活性,PCR-DGGE分析该区域的细菌群落结构特征.结果表明,东海赤潮高发区的浮游细菌丰度在5.85×104~9.26×105cells.mL-1之间,其中舟山外海区域较高,在整个调查区域北部海域高于南部海域.β-葡萄糖苷酶的平均活性为0.023μmol.(L.h)-1,氨肽酶的平均活性约为其3.6倍,在5μm以上颗粒中的胞外酶活性平均占总活性分别为47.4%和44.24%.细菌胞外酶活性的分布与细菌丰度的分布无相关性,在整个调查区域南部海域高于北部海域.细菌群落结构和多样性差异较大,南部海域的细菌多样性低于北部海域.人类活动和陆源输入是影响浮游细菌分布的决定性因素,台湾暖流对细菌胞外酶活性及其分布有着决定性的影响,复杂的环境条件是细菌群落结构和多样性差异的主要原因之一.海洋细菌在东海赤潮高发区的生态作用有待进一步研究.     

海洋沉积物中细菌DNA和RNA水平群落差异

海洋沉积物中的微生物在生物地球化学循环中具有重要作用.目前,细菌群落的研究多基于16S rRNA基因(DNA)展开,但DNA不仅包括活性微生物DNA也包括非活性微生物DNA,而RNA水平则可表征环境中具有活性的微生物种群.本研究采用荧光定量PCR和Illumina高通量测序技术,在DNA和RNA水平上研究了渤海和南黄海表层沉积物中细菌群落结构.结果表明,细菌DNA基因丰度比RNA基因丰度高1～2个数量级,DNA水平群落多样性高于RNA水平,二者群落结构差异显著.沉积物中的细菌具有活跃的化能异养、硫酸盐还原和硝化作用.基于16S rRNA基因的测序在探索微生物群落功能时可能会误判重要的功能微生物,总细菌群落中的"稀有生物圈"可能包含转录活跃者,发挥着重要的生物地球化学作用.总体而言,在分析来自稳定沉积环境的细菌群落结构时,基于16S rRNA的研究更能反映真实的生态状况.     

城市生活污水细菌在海水中死亡机制的研究--Ⅰ.胶州湾海洋细菌对生活污水细菌的杀菌作用

从胶州湾采得的水样和泥样中分离到105株海洋细菌,并分别测试了其对污水细菌的抑菌能力.在60株革兰氏阳性海洋细菌中,有17株芽孢杆菌属(Bacillus)和5株微球菌属(Micrococcus)的菌株具有抑制革兰氏阳性污水菌的能力.而所测试的45株革兰氏阴性海洋细菌都不具有对污水菌的抑菌能力.实验进一步发现,凡具有抑菌能力的海洋细菌培养物中,都含有一类能抑制或杀死污水菌的抗菌素物质.这一结果提示了污水细菌进入海水后迅速死亡的原因之一,可能是因为在海水中普遍存在着由海洋微生物生命活动过程中产生的这类抗菌素物质所引起的.     

营养盐对湄洲湾海洋细菌生长及降解石油烃的影响

测定从湄洲湾海域分离的烃细菌在添加和不添加N、P营养盐的海水培养基的生物量及对原油和纯烃的降解作用.结果表明,营养盐对不同菌株的生长及代谢有不同的影响.添加N、P营养盐,试验菌PF-6（Pseudomonas fluorescens 6）的生物量增大,而PA-32（P.aeruginosa 32） 的生物量却减少.在初始原油浓度均为1g/L的摇瓶试验中,添加N、P营养盐培养6d,PF-6菌与PA-32菌的除油率分别为25%及26%,而不添加N、P营养盐时,PF-6菌与PA-32菌的除油率分别为21.4%及36.3%.经气相色谱测定,在以正十六烷和萘两种纯烃组成的培养基,营养盐对两个菌株降解正十六烷的影响仍然不同,但在不添加N、P营养盐时,两个菌株对萘均有较高的降解率.无需添加N、P营养盐能正常生长并降解石油烃的菌株,在海洋油污的生物修复中具有应用前景.     

海洋细菌N3对几种赤潮藻的溶藻效应

从深圳大鹏湾南澳赤潮暴发海域的表层沉积物中分离得到1株海洋溶藻细菌(编号N3),以三角褐指藻(Phaeodactylumtricornutum)和常见赤潮生物锥状斯氏藻(Scrippsiella trochoidea)、海洋原甲藻(Prorocentrum micans)和中肋骨条藻(Skeletonemacostatum)为实验藻种,利用液体感染法研究了该株溶藻细菌的溶藻效应及溶藻方式.结果表明,菌株N3对中肋骨条藻和三角褐指藻均无溶藻活性,而菌悬液的体积分数为2%和10%时分别对锥状斯氏藻和海洋原甲藻有较好的溶藻效果,但溶藻现象不同.菌株N3可使锥状斯氏藻的细胞变形,胞内物质分布不均匀并最终死亡;使海洋原甲藻的藻细胞膨胀变形,细胞膜内物质聚集于一端,最终藻细胞破裂死亡.菌株N3对锥状斯氏藻和海洋原甲藻的溶藻方式相同,均以直接溶藻为主.菌株N3的菌悬液以2%、1%和0.1%的体积分数接种到锥状斯氏藻藻液中时,细菌的密度整体上呈下降趋势,2%处理组中藻细胞在120 h内全部死亡,而1%和0.1%处理组藻细胞的增长率略低于对照组.菌株N3的菌悬液以10%、5%和1%的体积分数接种到海洋原甲藻藻液中时,细菌的密度呈下降趋势,10%和5%处理组中藻细胞至120 h时死亡率分别为78%和70%,而1%处理组的藻细胞与对照组无显著差异.电镜观察、生理生化鉴定及16S rRNA鉴定结果表明,菌株N3为芽胞杆菌属(Bacillus sp.).     

Q235钢在海洋铁细菌作用下的腐蚀行为研究

采用开路电位、电化学极化曲线、电化学阻抗谱(EIS)等方法研究了海洋铁细菌作用下Q235钢的腐蚀行为与腐蚀机理。扫描电子显微镜(SEM)形貌分析结果表明有大量的杆状铁细菌附在Q235钢铁表面。在海洋微生物的影响下,Q235钢的开路电位变小,腐蚀倾向与腐蚀率变大。EIS结果表明在海洋铁细菌作用下Q235钢的交流阻抗模值减少,而且大大降低了Q235钢的极化电阻和表面膜的电阻。微生物的附着促进了钢材表面的溶解,使其表面氧化膜层消失,进而形成了疏松不致密的生物膜层,从而加速了其腐蚀进程。     

实验室内海洋细菌对石油烃降解能力的气相色谱测定

石油及其产品的污染是海洋污染中最主要的污染之一。随着大陆架、海洋石油资源的开发以及沿岸石油化工的发展,海洋油污染日益严重,它已引起各沿岸国家的普遍关注。世界各国相继开发了细菌降解石油的研究。为了探索细菌对石油烃降解作用的规律以及海洋细菌在海洋油污染的净化中新起的作用,建立一种快速简便、灵敏可靠的测试方法是十分必要的。     

一株产黑色素海洋细菌的筛选、鉴定及发酵条件优化

从山东近岸海域海水中分离得到一株产黑色素细菌Sl,通过对S1菌株的菌落形态观察、生理生化性质检验及16SrDNA序列测定,初步鉴定为明亮发光杆菌(Photobacterium phosphoreum).为了提高S1菌株黑色素产量,采用单因素实验设计对S1菌株进行发酵条件优化,结果表明当发酵条件为L-酪氨酸0.75 g/...     

一株海洋细菌对中肋骨条藻的溶解效应及其溶藻特性

从山东胶州湾分离得到1株海洋溶藻菌,暂将其命名为JZ-1.根据生理生化及16S rDNA 序列分析鉴定,菌株JZ-1属于交替单胞菌属(Alteromonas).研究表明,菌株JZ-1对中肋骨条藻具有很好的溶解效果,它能够破坏藻细胞膜内物质的结构和细胞膜的完整性,使细胞膜内物质流出导致藻细胞死亡.溶藻现象发生在细菌培养液的上清液和0.2μm的过滤液中,而不是在细菌菌体中,这表明菌株JZ-1通过分泌代谢物对中肋骨条藻产生溶解作用,且当菌株JZ-1由对数生长期向稳定期过渡时,其代谢物的溶藻率达到最大.代谢物分子量<5kD,具有热稳定性、耐酸性,但不耐碱.     

开发海洋 保护海洋

全国人大常委会第二十四次会议通过的《中华人民共和国海洋环境保护法》,对于开发海洋,保护海洋,全面发展我国的海洋事业具有重大意义。 我国有一万八千多公里大陆海岸线,有广阔的领海和管辖海域,有丰富的海洋资源。我国沿海地区的经济建设,海洋石油、海洋运输、海洋渔业、海水制盐、海洋调查研究等各项海洋事业,都在迅速发展。与此同时,向海洋排放的有害废物逐渐增多,每年流入海洋的污