陕甘宁地区根瘤菌数值分类与DNA同源性分析

在陕甘宁地区根瘤菌资源调查的基础上,选取其中与黄芪、岩黄蓍、木兰、鸡眼草及胡枝子共生的４０株快生根瘤菌和２５株参比菌株,对１３３项表型性状进行聚类分析,在８２％的相似性水平上构成５个不同于已知种的新亚群．对第１、２、３、４亚群ｘ（Ｇ＋Ｃ）／％测定及ＤＮＡ同源性分析结果表明,４个亚群ｘ（Ｇ＋Ｃ）／％含量均处于Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ属范围;各亚群内菌株ＤＮＡ同源性均在７５％以上,每个亚群中心菌株与１３个已知种模式菌株的ＤＮＡ同源性均小于６３％．从而证明,第１、２、３、４亚群为４个独立的快生根瘤菌新种群     

应用全细胞蛋白SDS-PAGE分子标记技术验证含羞草根瘤菌的结瘤能力

对云南省热带及亚热带地区的含羞草根瘤菌进行了分离,选择其中40株菌为接种菌株,通过结瘤试验并采用全细胞蛋白SDS-PAGE分子标记方法研究了其结瘤能力.经过结瘤试验,发现除菌株SWF66075和SWF66093没有结瘤外,其它38株菌株均与含羞草植物结瘤.结瘤率为95%.从结瘤试验所获根瘤中,分离得到结瘤菌株,采用全细胞蛋白SDS-PAGE分子标记对结瘤菌株与接种菌株进行了比较研究.蛋白图谱及聚类分析显示,26株接种菌株与其结瘤菌株的全细胞蛋白分子图谱完全相同,在100%的相似水平上与其结瘤菌株聚在一起,说明宿主植物所形成的根瘤确系接种菌株侵入所致,因而可将这些菌株确认为根瘤菌菌株;而SWF66012、SWF66029、SWF66044和SWF66058等12株菌株的结瘤菌株与其各自接种菌株的全细胞蛋白图谱存在较大差异,推测这12株接种菌株与其结瘤菌株可能不是同一菌株,尚不能确定它们与含羞草植物的结瘤能力,这些菌株是否为根瘤菌菌株仍需进一步验证.研究结果表明,全细胞蛋向SDS-PAGE分子标记技术是一种快速、准确地验证根瘤菌结瘤能力的方法.该方法进一步完善了结瘤试验,并初步揭示了根瘤菌的竞争结瘤能力,适用于对大量根瘤内分离菌株进行根瘤菌的证实研究.图2参28     

我国蚕豆根瘤菌的多样性和系统发育研究

采用数值分类、16S rDNA PCR-RFLP、IGS PCR-RFLP等方法对分离自我国11个省的50株蚕豆根瘤菌及11株参比菌株进行了表型测定和遗传型研究,同时对5株蚕豆根瘤菌的代表菌株进行了16S rDNA全序列测定.表型测定的结果表明,在80%的相似水平上供试菌株分为4个群,各群间存在地区交叉;16S rDNA PCR-RFLP的聚类结果与数值分类的聚类结果有很好的一致性;IGSRFLP反映的多样性更明显,形成的遗传群较多,可用于菌株间的鉴别.实验结果表明我国蚕豆根瘤菌具有极大的表型多样性和遗传多样性.系统发育研究结果表明,蚕豆根瘤菌的代表菌株均位于快生根瘤菌属(Rhizobium)系统发育分支,与R.leguminosarum USDA2370的全序列相似性达99.9%,说明蚕豆根瘤菌属于Rhizobium,系豌豆根瘤菌的一个生物型.图4表3参12     

四川攀西干热河谷区根瘤菌的多样性研究

采用数值分类、BOXAIR-PCR和16S rDNA PCR-RFLP方法,对分离自四川攀西干热河谷区11种豆科植物上的43株根瘤菌的表型和遗传多样性进行了研究.数值分类结果表明,攀西地区根瘤菌具有极大的表型性状多样性,在80%相似性水平上绝大多数供试菌株单独成群,能耐60℃(10min处理)的高温,在低温(10℃)或者低pH(4.0)条件下生长很差.与数值分类结果相比较,BOXAIR-PCR的分群结果更分散,说明供试菌株在遗传性状上也具有多样性.在数值分群基础上,选取15个代表菌株进行16S rDNA PCR-RFLP分析.结果表明,供试的15株代表菌株遗传差异明显,仅CCBAU61224与Rhizobium leguminosarum USDA2370T,CCBAU61303与Agrobacterium tumerfacienseIAM13129T具有相同的遗传图谱类型.数值分类和16S rDNA PCR-RFLP分析具有较好的一致性,BOXAIR-PCR适合于对根瘤菌种内菌株间的遗传多样性研究.图4表2参21     

根瘤菌新类群的全细胞蛋白电泳及16S rDNA全序列分析

应用ＳＤＳ全细胞蛋白电泳技术对根瘤菌３个新类群进行聚类分析,并对３个新类群中心菌株的１６Ｓ ｒＤＮＡ全序列（Ｍｒ≈１．５ｋｂ）进行了测定。将所测序列与ＥＭＢＬ／ＢａｎｋＩＴ／ＤＤＢＪ资料库中根瘤菌及相关菌已知种的１６Ｓ ｒＤＮＡ全序列进行聚类比较,得到系统发育树状图,树状图中,菌株ＳＨ２２６２３和ＳＨ１９３１２与山羊豆根瘤菌、葡萄土壤杆菌、根癌土壤杆菌和悬钩子土壤杆菌在同一个分支上,彼此亲缘关系较     

不同甘蔗基因型光合特性的数值分类

对30个甘蔗基因型光合性状进行数值分类、主成分、聚类和判别分析研究认为，甘蔗基因型间光合性状存在较大差异；利用主成分分析选出3个主成分，方差累计贡献率达到98．5％，蒸腾速率、气孔导度为第一主成分的主导因子，而净光合速率和气孔导度分别为二、三主成分的主导因子；经系统聚类将30个基因型分为三大类，在聚类分析基础上用判别分析选出对甘蔗光合性状数值分类有显著影响的4个光合参数，建立3个判别能力较高的判别模型．表5图1参22     

中国两性生殖卤虫形态特征的数值分类研究

对中国两性生殖卤虫１２个品系的１０个品系形态特征进行了聚类分析和主成分分析,并与Ａ．ｕｒｍｉａｎａ进行了比较研究．研究结果表明,Ａ．ｕｒｍｉａｎａ和中国两性生殖卤虫各品系明显可分为２个类群,证明中国各两性生殖卤虫品系均属于Ａ．ｓｉｎｉｃａ．而Ａ．ｓｉｎｉｃａ不属于Ａ．ｕｒｍｉａｎａ．在中国两性生殖卤虫各品系中ＮＬ、ＨＪＱ、ＳＢ可分为另一类群,显示可能存在种下分类阶元．本文所选取的形态特征是稳定的,可做为卤虫品系形态特征数值分类的重要依据．     

内蒙古中东部地区几种豆科牧草根瘤菌的表型多样性及水分梯度对其分布的影响

选用101株分离自扁蓿豆、胡枝子、野豌豆、锦鸡儿属植物的根瘤菌菌株，进行了营养利用、抗生素抗性、耐逆性和酶活性测定等84个表型性状分析，发现分离自同种寄主植物的根瘤菌由于地理来源的不相同而存在着较大的多样性．通过数值分类，各已知种分别聚群，101株未知菌在84％的相似水平上分为4个各不同的群．根据1、2、3、4群菌的聚类情况，结合在不同水分梯度下采集的豆科牧草根瘤菌，结果发现除个别菌外，绝大部分菌株呈现随着水分梯度的不同，各菌以类群形式分布．证明土壤中水分含量对根瘤菌的分布有很大影响．     

金针菇中蛋白质含量的变化和其中一个蛋白质的生物活性

在对金针菇(Flammulinavelutipes)子实体活性蛋白质纯化过程中发现,金针菇在不同环境条件下不同蛋白质的表达量有差异.通过阴离子交换层析、凝胶层析和高压液相色谱,从金针菇中分离纯化获得了一种蛋白质Zb.经SDS-PAGE测定该蛋白分子量(Mr)为 30×103,等电聚焦电泳表明该蛋白质的等电点为 4. 7,且该蛋白质不含糖.N-端测序表明,该蛋白质N-端的 20个氨基酸为PQVKTSWEDLANLGWPIQQV.此外,在HepG2. 2. 2. 15细胞株上检测该蛋白质体外对肝炎病毒的抑制作用,发现对HBsAg抑制作用明显,抑制中浓度为 0. 117μg/mL,但对HBeAg几乎无作用.以胃癌细胞株MGC80-3为研究对象,检测表明,该蛋白质对MGC80-3抑制率在 50%时的蛋白质浓度约为 0. 75μg/mL.以起始浓度为 0. 296mg/mL的Zb检测它的血凝活性时发现,Zb对兔血红细胞和人A、B、O血红细胞的血凝滴度为 2-12.但同时观察到Zb处理后的兔血红细胞形态发生改变. 图 6表 1参 15     

草原沙化和人工固沙草地生态演替中昆虫群落多样性变化的数值分析

对宁夏沙坡头自然保护区不同沙化和人工固沙草地地段昆虫和植物群落特征参数、环境因子进行了调查．按不同营养层类群、栖息型类群和重要目分别进行了昆虫多样性变化规律的研究,应用主分量分析法和相关分析法,分析了草原沙化和人工固沙草地生态演替中昆虫不同类群多样性间以及多样性变化与植物、环境因子的关系．结果表明,昆虫多样性随草地沙化的加重而降低,以直翅目、膜翅目和食叶类群的下降率最大;随草地的恢复昆虫多样性趋于增加,以鳞翅目、同翅目、半翅目、脉翅目及捕食类群增长率为大．寄生类群和捕食类群多样性取决于植食类群多样性;杂食类群与地栖性类群成显著性相关．影响昆虫多样性变化的主要环境因子为植物种类、层次结构、盖度和表土层厚度、坚硬度等．     

云南蛇纹岩发育土壤与植被中重金属含量的分析

对云南蛇纹岩发育土壤进行了植物和土壤的重金属含量调查和分析.结果表明,Ni、Co为土壤中的主要污染金属,在土壤中的含量范围分别为565~4844mg/kg和69~481mg/kg,Cu、Zn含量则在正常范围内;土壤中Ni、Co生物可利用态的含量均较低.统计分析显示,土壤中Ni、Co含量之间存在显著正相关(R=0.794,P<0.01).调查蛇纹岩发育土壤上隶属21科的42种高等植物,并分析其重金属含量,发现植物体内Ni、Co含量也存在显著相关,可能受到土壤因素的影响所致.调查并未发现Ni、Co的超累积植物,但发现此区域存在较多的Ni、Co耐性植物,对Ni矿废弃地的植被重建有一定的研究意义.图1表6参8     

川西山区苹果属（Malus）植物野生种表型相似性和地理亲缘

用表型数量分析方法，结合地理分布对川西苹果属11个野生种进行研究，探讨其种间关系与地理分布的联系．得结论如下：1．不同系数的WPGMA和UPGMA聚类结果基本相同．表型数量骤类分析能大体反映近缘种间的亲缘关系；2．滇池海棠与沧江海棠在形态上高度相似，聚类图上极靠近，分布上相重叠，在塑定上有时感到困难；3．花叶海棠与变叶海棠和稻城海棠与小金海棠，从表型及分布上看显然是地理替代种；4．本文所列各种，大都分属两大植物区系范围内，例如花叶海棠属中国-日本区东范围内，变叶海棠属中国-喜马拉雅区系范围内；5．发现沿康定-理塘-巴塘（约（N）30°）存在一条南北物种分布的分界地带线，称康-巴线；沿岷江上游和大渡河流域也存在一条明显的地带线，称岷江-大渡河带，这一带就是中国-喜马拉雅区系和中国-日本区系的交界地带，通过这一地带有些向南分布的种可以越过康-巴线以东地区到达金沙江边，向北分布的种有时也可越过康-巴线以东达到岷江上游。在这南北和东西交界带上，不同物种会集，无疑是物种分化以及种质渗入十分活跃的地带；6．与其它地区相比较，四川西部山区是我国野生苹果植物分化的多样中心。     

大鸨生长期能量代谢和蛋白质沉积量的初步研究

对不同日龄笼养大鸨 (Otistarda)的能量代谢和蛋白质沉积量进行研究 .结果表明 ,5 0日龄、70日龄、30 0日龄和 4 0 0日龄雄性大鸨的能量日摄入量分别为 14 98.9kJ、2 376 .2kJ、2 397.4kJ和 2 4 6 5 .9kJ;能量代谢率分别为 82 .3%、81.8%、81.8%和 83.1% ;蛋白质的日沉积量分别为 5 .8g、13.4g、15 .8g和 13.5g .表 3参 9     

TMV或宁南霉素处理对烟草叶片及类囊体膜蛋白组成的影响

对烟草花叶病毒(TMV)侵染、宁南霉素钝化处理的烟草叶片进行了叶片全蛋白多肽组分、类囊体膜蛋白组成的分析.结果表明,TMV侵染或钝化实验的烟草叶片中均出现TMV衣壳蛋白;但是与对照相比,TMV侵染叶片中Rubisco大亚基减少、小亚基增加,类囊体膜蛋白中PsaA、PsaB和Mr=33×103蛋白含量减少.表明TMV侵染要同时影响叶片细胞核基因组和叶绿体基因组的基因表达,从而影响光合作用碳代谢和类囊体膜光系统Ⅰ和Ⅱ.宁南霉素对TMV病毒短时间内具有钝化作用,而较长时间的作用效果不同,10 min钝化样品的蛋白组分保持较为完整,而30 min钝化样品的多肽缺失较为严重.图5表1参11