Production of monoclonal antibody and application in indirect competitive ELISA for detecting okadaic acid and dinophytoxin-1 in seafood

Background, aim, and scope

Okadaic acid (OA) and analogues of dinophysistoxin (DTX) are key diarrheic shellfish poisoning (DSP) toxins, which possibly arouse DSP symptoms by consuming the contaminated shellfish. Because of the stable toxicity in high temperature and the long-term carcinogenicity, the outbreaks of DSP related to consumption of bivalve mollusks contaminated by DSP toxins pose a hazard to public health. Therefore, it is worth developing a fast and reliable analytical method for the detection of OA and analogues in shellfish. In this paper, an indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) (icELISA) for detecting OA and DTX-1 in seafood was developed based on monoclonal antibody (McAb).

Methods

The OA was conjugated to human immunoglobulin G (IgG) and bovine serum albumin (BSA) by the active ester method as the immune antigen and the detective antigen. The spleen cells from BALB/c mice immunized with OA-IgG were fused with SP2/0 myeloma cells. A hybridoma cell line, which secreted McAb against OA, was selected by ??limiting dilution?? cloning. An icELISA was developed based on immobilized conjugate (OA-BSA) competing the McAb with the free OA in seafood sample.

Results

A hybridoma cell line, which secreted IgG1 subclass monoclonal antibody (McAb) against OA, was selected. The IC₅₀ of the McAb for OA and dinophytoxin-1 (DTX-1) were 4.40 and 3.89 ng/mL, respectively. Based on the McAb, an indirect competitive ELISA for detection of OA and DTX-1 in seafood was developed. The regression equation was y?=?54.713x???25.879 with a coefficient correlation of R ²?=?0.9729. The linear range and the limit of detection were 0.4?C12.5 and 0.45 ng/mL, respectively. The average recovery of OA and DTX-1 spiked shellfish was 82.29% with the coefficient of variation of 7.67%.

Conclusion

The developed icELISA is a fast, sensitive, and convenient assay for detecting of total amount of OA and DTX-1 in seafood.     

长庆低渗透油田废弃钻井液处理探讨

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气浮/曝气生物滤池/多级过滤/离子交换工艺在印染中水回用中的应用

以宁波某印染企业印染中水回用工程为例,对已建工程进行了具体介绍和分析,探讨了气浮/曝气生物滤池(BAF)/多级过滤/离子交换工艺在印染中水回用中的应用.结果表明,在染色机清污分流的基础上,气浮/BAF/多级过滤/离子交换工艺可以成功应用于印染中水回用,同时具有良好的环境效益和经济效益.     

浸没式MBR技术在养猪场废水处理中的应用

采用浸没式MBR,并结合传统的A/O工艺处理高COD和高NH₃-N浓度的养猪场废水。结果表明,当废水处理站进水水质COD为9 100 mg/L,BOD5为3 788 mg/L,SS为4 490 mg/L,NH₃-N为450 mg/L时,出水COD<85 mg/L,BOD₅<10 mg/L,SS<5 mg/L,NH₃-N<5 mg/L,达到DB 31/199-1997一级标准。实验证明,浸没式MBR法可用于畜禽养殖业废水处理。     

给水厂与污水厂污泥制陶粒技术研究

对天津凌庄自来水厂的给水厂污泥和天津东郊污水处理厂的污水厂污泥的成分进行了分析,在此基础上根据焙烧陶粒的原理,设计了以2种污泥为原料焙烧陶粒的工艺流程。通过实验,研究了其工艺过程中的影响因素并确定了工艺参数。性能检验结果表明,添加量为30％的混合污泥陶粒,在1 140℃焙烧5 min,可得到强度标号为40 MPa的高强陶粒。因此,以2种污泥为原料烧制陶粒的处置方法可行,并能带来一定的经济效益、社会效益和环境效益。得到的产品符合国标中高强陶粒的要求,可广泛应用于建筑行业中的承重结构。     

轻质滤料生物滤池对微污染原水的中试研究

以微污染东江水作为实验原水进行了对轻质滤料生物滤池对主要污染物的处理效果、反冲洗对处理效果的影响以及能耗等方面的中试研究。结果表明,轻质滤料生物滤池工艺可以明显地改善原水水质。对于本实验原水而言,轻质滤料生物滤池对浊度、CODMn和氨氮的平均去除率分别为43%、28%和76%。反冲洗对CODMn的去除效果影响较大,反冲后1 h去除率约为7%,大致需要12 h恢复至反冲前水平的25%;对氨氮的去除效果影响较小,约4 h就能恢复至反冲前水平。同时,由于轻质滤料生物滤池特殊的滤料和反冲洗方式,能耗较小,运行管理简单。     

秦皇岛地区地热资源开发利用方向

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反硝化脱氮固体碳源材料研究进展

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凤眼莲去除垃圾渗滤液中的COD、NH_3-N和TP

在静态水培实验条件下,对不同浓度垃圾渗滤液条件下凤眼莲的生长状况及其净化效果进行了研究。结果表明,在高浓度（COD 3 546.7 mg/L、NH3-N 527.5 mg/L、TP 8.02 mg/L）垃圾渗滤液条件下（HCL）凤眼莲全部被毒害致死,在中浓度（COD 1 233.3 mg/L、NH3-N 182.9 mg/L、TP 2.83 mg/L）垃圾渗滤液条件下（MCL）生长状况差,生物量减少为实验前的32.6%。在低浓度（COD 660.0 mg/L、NH3-N 99.7 mg/L、TP 1.59 mg/L）垃圾渗滤液条件下（LCL）能够正常生长,且对低浓度垃圾渗滤液有较好的净化效果。24 d后COD、NH3-N和TP的去除率分别为85.9%,99.8%和84.8%。COD与NH3-N均达到《生活垃圾填埋场污染控制标准（GB16889-2008）》排放标准,TP达到《地表水环境质量标准（GB 3838-2002）》Ⅳ类排放标准。