Pseudomonas sp.L19抗除草剂AHAS基因的克隆、表达及特性

乙酰羟酸合酶(AHAS)是磺酰脲类、咪唑啉酮类、三唑嘧啶类、磺酰胺类和嘧啶水杨酸类等乙酰羟酸合酶抑制剂类除草剂的作用靶标,获得能抗此类除草剂的AHAS突变基因资源具有非常重要的理论和应用价值.从长期使用甲磺隆的农田土壤中分离到1株对乙酰羟酸合酶抑制剂类除草剂有广谱抗性的菌株L19,根据表型特征、生理生化特性和16S rDNA序列系统发育分析,将其鉴定为假单孢菌属(Pseudomonas sp.).利用PCR技术从Pseudomonas sp.L19的总DNA中克隆AHAS基因,氨基酸序列比对结果表明,L19与对除草剂敏感菌株P.putida KT2440的AHAS调节亚基氨基酸序列完全相同,而催化亚基有4个氨基酸位点不同:[Val 29→Ala(L19→KT2440),Pro93→Ser,Val 345→Ala,Pro 484→Arg].分别将菌株L19与KT2440的AHAS催化亚基克隆到pET29a(+)的多克隆位点,构建了表达载体pET-L19AHASc和pET-KT2440AHASc,通过镍柱亲和层析纯化得到带有组氨酸标签的乙酰羟酸合酶.抗性试验结果表明菌株L19的乙酰羟酸合酶对四大类乙酰羟酸合酶抑制剂类除草剂的抗性均要强于KT2440的乙酰羟酸合酶,对甲磺隆、咪唑乙烟酸、唑嘧磺草胺和嘧草醚的抗性倍数分别达到53.6、9.3、8.2和9.5倍.菌株L19的乙酰羟酸合酶比活力、对ThDP和Mg2+的Kc值相应地比KT2440乙酰羟酸合酶的要低;而对底物丙酮酸钠的米氏常数Km值要比KT2440乙酰羟酸合酶的要高近1倍.     

工伤维权 趋势不可小觑

2013年1月8日,北京义联劳动法援助与研究中心发布《义联劳动维权研究报告》,这份报告客观反映了我国工伤维权的现状,给人启发,也让人思考。工伤维权,难在何处,发展趋势必须重视。从2007年到2012年,是中国经济快速发展的5年,同时,也是中国劳动领域法律法规变迁幅度最大的5年。2008年《就业促进法》《劳动合同法》《劳动争议调解仲     

保护儿童是一个全社会的命题

我们始终未能真正把孩子作为一个权益主体来对待,因此,在一些场合我们有意无意地忘却了对他们应有的保护。真正重视孩子作为权利主体的独立权益,而非成人的附属品,我们才有可能站在儿童的角度,在全社会建立起保障儿童安全健康成长的机制。     

更快更有效地维护劳动者权益

劳动关系确认难、时间长,造成了农民工工伤待遇索赔程序复杂,不利于工伤农民工的及时治疗和生活保障。北京致诚农民工法律援助与研究中心（简称致诚中心）通过对329个案件的调研发现,     

细读《工伤保险条例》（上）——概念与调整篇

2011年1月1日实施的《工伤保险条例》（以下简称“新条例”）对于老条例共作了24处修改,主要体现在7个方面,即：扩大了工伤保险的适用范围;调整了工伤认定范围;简化了工伤认定、鉴定和争议处理程序;提高了部分工伤待遇标准;加大了对不参保单位的处罚力度;加强了对未参保工伤职工的权益保障;     

人力资源和社会保障部社会保险个人权益记录管理办法

人力资源和社会保障部令第14号《社会保险个人权益记录管理办法》已经人力资源和社会保障部第67次部务会审议通过,现予公布,自2011年7月1日起施行。部长尹蔚民 二○一一年六月二十九日 第一章 总则 第一条 为了维护参保人员的合法权益,规范社会保险个人权益记录管理,根据《中华人民共和国社会保险法》等相关法律法规的规定,制定本办法。     

武汉钢铁(集团)公司工会 维护职工安全与健康权益

关爱女职工坚持以制度作保障,做好监督检查从2007年起,武汉钢铁(集团)公司(简称武钢)工会就积极推进女职工权益保护专项集体合同工作,对涉及女职工切身利益的民主政治     

用人单位为何屡屡侵犯劳动者的权益

至今 ,我国《劳动法》已颁布实施了５年多 ,然而从执行情况看 ,效果并不十分理想 ,其中 ,用人单位违法违规侵犯劳动者权益的现象较为普遍 ,由此引发的劳动争议日益增多 ,有的因处理不当甚至导致了严重后果 ,影响了当前的社会稳定和经济发展。用人单位为何有法不依、以身试法呢？笔者调查发现主要有以下几个方面原因 :一、劳动法律法规内容的“变量”给用人单位在政策执行上留有很大空间《劳动法》很多内容是一个“变量” ,是一种“活的因素”,地区行业情况不一 ,在政策的掌握上就会有差异。如《劳动法》规定 ,给劳动合同同当事人协商一致 ,…     

失地农民土地权益流失的经济学分析

城市扩张速度的加快带来越来越多的农民丧失土地,从而引发的农民土地权益流失．这与我国“一切与农业为本,一切为农民着想”的扶农政策想违背,为解决这一问题,笔者从经济学角度探讨失地农民土地权益流失的原因,图1,参5．