重组GST-Crosstide蛋白的表达纯化及其在AGC型蛋白激酶活性检测中的应用

AGC型蛋白激酶在信号通路中占据着极为重要的地位,通过对各种信号通路的调控来影响细胞的生长、增殖和凋亡进程.为方便检测AGC型蛋白激酶的活性,设计并构建了新型AGC型蛋白激酶特异底物GST-Crosstide.通过同位素标记体外磷酸化的方法研究了酵母表达的Pkh1、Ypk1和大肠杆菌表达的Akt1三种AGC型蛋白激酶磷酸化GSTCrosstide的能力.结果显示,酵母表达的有活性的Pkh1和Ypk1均可有效磷酸化GST-Crosstide,并且由于Pkh1对Ypk1的进一步激活,二者共同作用可显著增加GST-Crosstide磷酸化.而仅采用大肠杆菌表达的没有被活化的Akt1则无法磷酸化GST-Crosstide,但Akt1可以被Pkh1或Ypk1激活,从而获得磷酸化GST-Crosstide的能力.研究表明,GST-Crosstide可以作为AGC蛋白激酶活性检测的有效工具,并将有效促进真核生物蛋白激酶调控的细胞信号转导通路的研究.     

Caco-2细胞模型评估金属人体生物有效性的研究进展

随着环境重金属污染的加剧和营养学的发展,人们越来越重视对重金属元素及营养金属元素肠道吸收过程的探讨及其生物有效性影响因素的研究。Caco-2细胞模型能有效的模拟人体小肠上皮细胞的转运与吸收过程,可结合基因技术、分子技术等手段用于研究人体肠道吸收物质的机制和影响因素。首先,总结了近年来利用Caco-2模型对镉、铬、铅、砷等多种重金属及铜、铁、锌、钙等多种营养金属在小肠内的吸收、转运方式、代谢机制及影响吸收、转运过程的各类条件等的研究工作,然后对Caco-2细胞模型研究方法及其在未来评估金属人体生物有效性的应用进行了展望。     

大气中细颗粒物对肺癌细胞A549迁移和侵袭作用的影响

采集大连城区大气中可吸入性细颗粒物(PM_(2.5)),研究其对肺癌A549细胞迁移、黏附和侵袭力的影响,利用明胶酶谱法检测细胞分泌的基质金属蛋白酶活性,利用Western blot法测定A549细胞中转移相关蛋白的表达。结果表明,在无明显细胞毒性浓度下,PM_(2.5)可增加A549细胞的迁移速率;细胞与细胞外基质的黏附率增加;细胞侵袭实验结果表明PM_(2.5)可增加A549细胞穿透基底膜的能力;用明胶酶谱法检测发现PM_(2.5)可使A549细胞分泌的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活性增强。转移相关蛋白——细胞钙粘蛋白-N(N-cadherin)的表达量升高,而钙粘蛋白-E(E-cadherin)的表达量下降,实验结果表明,PM_(2.5)可增强A549细胞的侵袭性,大气中的可吸入性颗粒可能导致肺癌转移发生率增加。     

体外预应力索的破坏及其修复与更换

介绍了可换索体系对各组成部分的要求。分析了体外索在自然灾害环境下劣化破坏的原因：在腐蚀环境下，体外索腐蚀导致其力学性能发生变化，甚至发生应力腐蚀破坏和氢脆或疲劳腐蚀破坏；火灾环境下，钢筋力学性能劣化；动荷载作用下，体外索产生疲劳破坏。针对不同的情况，提出了相应的体外索修复、二次张拉和更换的方法。     

In vitro thyroid disrupting e ects of organic extracts from WWTPs in Beijing

It is generally known that there are many endocrine disrupting compounds (EDCs) in the e uents from wastewater treatment plants (WWTPs). Most research has focused on the occurrence of estrogenic or androgenic activities, while ignoring that there are environmental chemicals disrupting thyroid system, which is essential for growth and development in both humans and animals. In the present work, a two-hybrid yeast assay was conducted to evaluate the removal e ciencies of agonistic or antagonistic thyroid receptor (TR) mediated e ects in di erent treatment processes of three WWTPs located in Beijing. We found no TR agonistic, but TR antagonistic activities in all processes from the WWTPs. The TR antagonistic activities in organic extracts of water samples were then calibrated regarding to a known TR-inhibitor, amiodarone hydrochloride (AH). The observed concentration of TR disrupting substances ranged from 2.35 10??8 to 6.19 10??7 mol/L AH in Gaobeidian WWTP, 3.76 10??8 to 8.75 10??8 mol/L AH in Lugouqiao WWTP, and 4.80 10??9 to 2.55 10??8 mol/L AH in Beixiaohe WWTP. Of the three WWTPs, the removal rates were 92.7%, 42.2%, and 23.1% respectively. Industrial sewage may contain more TR disrupting substances compared with domestic sewage. The recipient waters were found to contain considerable concentrations of TR disrupting substances that may cause adverse e ects on the exposed organisms.     

土壤不同粒级中Cr(Ⅵ)生物可给性及健康风险

为定量分析土壤不同粒级中Cr(Ⅵ)的健康风险,将铬污染土壤筛分为粗砂(500～1 000μm)、中砂(250～500μm)、细砂(100～250μm)、粗粉砂(50～100μm)、粉砂及以下(0～50μm),利用激光粒度分析仪、积累因子法(accumulation factors, AF)及基于生理的提取实验(physiologically based extraction test, PBET)研究不同粒级质量分布、Cr(Ⅵ)分布特性及Cr(Ⅵ)生物可给性,并采用美国环境保护局(United States Environmental Protection Agency, US EPA)推荐的暴露模型评价Cr(Ⅵ)通过经口摄入途径引起的健康风险。结果表明,土壤不同粒级组分间Cr(Ⅵ)积累因子分布与Cr(Ⅵ)含量分布规律一致,碱性土壤中Cr(Ⅵ)倾向于在粗颗粒内积累;考虑生物可给性的情况下,Cr(Ⅵ)产生的健康风险下降43.65%～99.19%;细砂组分对Cr(Ⅵ)经口摄入的健康风险贡献最大,为48%～78%,说明粒级质量占比和生物可给性越高,其对健康风险的贡献越大。本研究量化了粒级质量...     

安全教育要从少年儿童抓起

出于职业习惯,上小学六年级的孩子每次要去参加学校组织的外出活动时,我总免不了要叮嘱几句安全方面的话。说得多了,孩子确也掌握了一些基本的安全常识,在班上担当起“安全员”的角色,在集体外出活动中,不但自己注意安全,还能及时制止同学们的一些不安全的行为。     

气态甲醛对人体颊黏膜细胞遗传毒性的研究

气态甲醛;遗传毒性;人体颊黏膜细胞;彗星实验;体外实验     

六种农药对乙酰胆碱酯酶活性的体外毒性效应

通过体外毒性试验,研究乙酰甲胺磷、巴丹、高效氯氰菊酯、甲基硫菌灵、异菌脲和哒螨灵6种农药对乙酰胆碱酯酶活性的毒性效应。结果表明,在体外反应体系中, 6种农药均对乙酰胆碱酯酶活性有明显的抑制作用,其中乙酰甲胺磷对乙酰胆碱酯酶活性抑制率随着浓度增高先下降后上升, 1mg·L-1时抑制率最低,为10. 07%;甲基硫菌灵对乙酰胆碱酯酶活性抑制率随着浓度增高先上升后下降, 0. 125mg·L-1时抑制率最高,达60. 32%;巴丹、高效氯氰菊酯、异菌脲、哒螨灵对乙酰胆碱酯酶活性抑制率随浓度增高而上升。