细菌二氯甲烷脱氯酶基因对拟南芥的转化

卤代烷烃是一类很普遍的环境污染物 ,在工业生产中常伴随着废气废物释放出来 ,严重污染土壤及地下水 ,并且严重破坏臭氧层 .在此类污染物含量较高的土壤中分离出一些细菌 ,它们能以卤代烷烃为唯一碳源进行生长 ,且将这些有毒废物分解成无毒的化合物 .我们曾经将细菌卤代烷烃脱卤酶基因克隆到拟南芥中并得到高效表达[1] .Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ和Ｈｙ ｐｈｏｍｉｃｒｏｂｉｕｍ属的细菌能利用二氯甲烷作为唯一碳源进行生长[5] ,其代谢过程如图 1.其中参与反应的关键酶是二氯甲烷脱氯酶 ,此酶属于谷胱甘肽转移酶类 ,在脱ＣＩ时 ,先…     

桃ACC合酶基因组DNA（pACSG01）的序列分析及其表达

以桃基因组DNA为模板,用套式PCR技术扩增并克隆了桃ACC合酶基因片段,将其克隆（定名为pACSG01）并进行序列测定,表明该自然全长1320bp,并富含HindⅢ和EcoRⅠ位点,与其它ACC合酶基因结构序列有一定的相似性,内含有两个内含子,编码的氨基酸序列与已克隆桃ACC合酶cDNA推导的氨基酸序列的同源性分别为57．4％和56．8％,pACSG01与我们已克隆的两个桃ACC合酶cDNA基因表达有所不同,RNA点杂交和RT－PCR结合Southern杂交分析表明,该基因在成熟和乙烯处理的果实均不表达,伤处理、LiCl和生长素处理也不能诱导核基因的表达,在衰老花瓣中也不表达,图3参18。     

非离子型表面活性剂AE对稀脉浮萍的损伤作用

以过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）相对活性、植物生长量和培养液pH值变化作为观测指标,研究了非离子型表面活性剂脂肪醇聚氧乙烯醚（AE）对稀脉浮萍（Lemna paucicostata L.）的损伤作用,结果显示：稀脉浮萍的损伤程序与AE浓度直接相关,浓度小于1.0mg/L时,AE对稀脉浮萍的损伤较轻,λ（CAT）、λ（POD）的增加,能清除膜上的过氧化物,在10.0mg/L时,稀脉浮萍的生理功能受到中等程序的伤。CAT、POD相对活性升高,生长率下降,光合作用受到一定程度的抑制,培养液pH值下降0.2左右;AE为100.0mg/L时,植物受伤严重,CAT、POD相对活性下降,培养液pH值降低幅度为0.6左右,植物大部分死亡。     

农作物秸秆酶解与磷细菌肥的生产

以农作物秸秆为酶水解原料 ,用纤维素酶进行酶水解 ,水解液用于培养磷细菌肥生产菌 ,再用粉碎至一定粒度的作物秸秆对培养菌液进行吸附。实验结果表明 ,经酶解得到的水解液在添加一定的辅料后 ,可以作为培养磷细菌的料液。适宜条件下 ,菌量可达 5 1× 1 0 8/ml。     

一株高产纤维素酶真菌的分离及产酶特性研究

一株高产纤维素酶真菌D1,经纤维素刚果红平板识别、滤纸崩解实验初筛以及液体发酵产酶复筛,从腐烂秸秆中被分离出来.经形态观察和18S rDNA基因片断分析,被鉴定为草酸青霉(Penicillium oxalicum).通过单因子及正交实验,D1液态发酵产酶条件得到优化.最佳产酶条件为:碳源为麸皮∶稻草=3∶7(w/w),...     

交联木聚糖酶聚集体的制备及其性质研究

制备了交联木聚糖酶聚集体(CLEAs),并对其酶学性质进行了研究,以提高木聚糖酶的稳定性.通过毛栓菌发酵分离得木聚糖酶,经硫酸铵沉淀后以戊二醛作为交联剂对其进行化学交联,制得CLEAs,并用常规方法测定了各种因素对游离木聚糖酶和CLEAs的影响.在对耐热性、有机相中稳定性和耐酸碱性的研究中,CLEAs均表现比游离酶有较高的稳定性,因此运用CLEA技术可提高木聚糖酶的稳定性,使其广泛应用于饲料等工业生产中.     

淀粉废水水解酸化处理中的酶比活变化特性

以淀粉废水水解酸化处理系统中的蛋白酶、淀粉酶、脱氢酶为研究对象,考察了在无机离子、营养元素、pH等条件作用下的酶比活变化规律.实验结果表明:Mg2+和Co2+对酶比活有显著影响,MgCl2·6H2O加入量为30 mg/L时蛋白酶、淀粉酶、脱氖酶的比活分别是空白的5.6倍、1.6倍、1.5倍,COD去除率提高17.6%;而CoCl2·6H2O加入量为10 mg/L时,蛋白酶和淀粉酶的比活较单独投加30 mg/L的MgCl2·6H2O时分别下降了80.6%和42.5%,脱氢酶比活却提高了13.2%;以NH4Cl与CO(NH2)2作为混合N源(m(NH4Cl):m(CO(NH2)2)=1:2)时蛋白酶、淀粉酶、脱氢酶的比活分别是单独以CO(NH2)2为N源时的3.0倍、1.4倍、1.8倍,COD去除率提高了11.8%;中性偏碱性条件较利于酶促反应的进行.     

壬基酚降解酶的分离纯化及性质研究

从恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)X-8中分离纯化出一种壬基酚降解酶,研究其酶学特性.将该菌株X-8在NP-尿素培养基中振荡培养26 h(30℃),其细胞经超声波破壁,得到粗提酶液.粗提酶液经硫酸铵分级盐析、透析脱盐、Sephadex G-200分子筛柱层析、DEAE-Sepharose Fast' Flow离子交换层析,得到凝胶电泳均一的NP降解酶.SDS-PAGE电泳结果表明,该酶相对分子质量为37 000±1,适宜作用条件为30℃、pH=7.0.该酶在pH=7.0～10.0、10～50℃时非常稳定.本研究得到的壬基酚降解酶活力强,常温下反应速度快、稳定性高,可用于污水中壬基酚的生物降解.将壬基酚降解酶纯化至电泳纯时工艺复杂、收率较低,但实际应用中只需对该酶进行粗分离,其工艺简单、收率高,因此该酶可用于含NP废水的处理.     

酶联免疫吸附分析法测定环境水体中的萘

使用自制的包被原和抗萘多克隆兔抗体,建立了测定环境水体中痕量萘的间接竞争酶联免疫吸附法,并优化了实验条件.工作曲线线性方程为I=8.394logρ+50.21(I为抑制率,ρ为萘的质量浓度),线性范围10~(-3)～10 μg/L内的相关系数为0.985 6,方法灵敏度为0.944 μg/L,检出限为0.250 ng/L,回收率为86.00%～106.00%,批间误差为5.00%～15.00%,批内误差为2.00%～8.00%,与四种结构类似物的交叉率均小于14.0%.