青稞β—1，3—葡聚糖酶Ⅱ基因启动子的克隆分析及表达载体的构建

根据本实验室克隆并公布的藏青稞β—1，3—葡聚糖酶Ⅱ(BGH Ⅱ)基因序列，以藏青稞QB09基因组DNA为模板，构建DNA步移文库，并通过步移技术克隆出BGH Ⅱ起始密码子上游调控序列BGHP．鉴定和分析表明，BGHP具备大多数高等植物启动子的保守元件，预测它对BGHⅡ基因的表达具有一定的作用．为鉴定BGHⅡ基因的基本启动子元件，将基因5′侧翼序列做缺失片段分析，利用PCR方法从BGHP中得到3个不同大小两端带有Hind Ⅲ、BamH I酶切位点的片段BGHP1、BGHP2和BGHP3，定向插人载体pMGFP4(pBI221改建，报告基因为GFP)中，取代原有的CaMV35S启动子，构建了由驱动报告基因GFP的植物表达载体BGHPVl、BGHPV2和BGHPV3，用于大麦的遗传转化，为进一步研究其功能奠定了基础．图5表1参15     

RAPD扩增中商品酶体系对扩增产物的影响

随机选用了10条RAPD引物，采用3种商品TapDNA聚合酶体系，以5个不同物种的动植物总DNA为模板，进行RAPD扩增，实验发现，在对同一模板、采用同一引物进行的RAPD扩增中，仅仅因为使用了不同的商品TaqDNA聚合酶，获得的扩增产物差别极大；不同商品来源的PCR反应缓冲体系，对扩增产物也有一定影响，但相对较小，这说明，不同的商品酶体系对RAPD扩增产物影响很大，因此，影响RAPD扩增产物稳定性的一个关键因素是商品TaqDNA聚合酶本身；研究中前后一致地使用同一商品TaqDNA聚合酶体系，是成功进行RAPD分析的基础。     

表面活性剂AE对黄鳝保护酶SOD、CAT和GSH-PX活性的影响

以肝脏组织保护酶λ(SOD)、λ(CAT)和λ(GSH PX)为指标 ,研究了表面活性剂AE(脂肪醇聚氧乙烯醚 )污染对黄鳝 (Monopterusalbus)的损伤作用 .结果显示 :ρ(AE) 1.5mg/L处理液对黄鳝的损伤较小 ;随着 ρ(AE)升高 ,损伤程度加剧 .ρ(AE) >4 .5mg/L的处理液对黄鳝损伤较大 ,保护酶λ(SOD)、λ(CAT)在处理 96h后被抑制 ,λ(GSH PX)升高 .发现环境中AE的残留量对黄鳝种群有影响 .也证实了λ(SOD)、λ(CAT)和λ(GSH PX)变化可以反映黄鳝的伤害程度 .表 3参 14     

米曲霉产氨基酰化酶条件及部分酶学性质研究

通过单因子和多因子摇瓶正交优化试验,确定了米曲霉液态发酵产氨基酰化酶的最佳发酵条件.优化发酵培养基组成(ρ/gL-1):葡萄糖40,蔗糖10,可溶性淀粉20,蛋白胨2.5,马铃薯液1000mL,pH自然.培养基装量50mL/250mL三角瓶,接种量4%.培养温度30℃,转速100r/min,发酵时间42h.每50mL培养物的总酶活由优化前的2627u提高到7338u,是优化前的2.79倍.研究了米曲霉氨基酰化酶的部分酶学性质.该酶催化反应的最适pH为7.0,最适温度为40℃,低浓度的Co2 (5×10-4mol/L)对酶活激活作用显著.图5表2参8     

沙地云杉生态型同工酶研究

沙地云杉是内蒙古地区特有树种,只分布于浑善达克沙地东部边缘;由于长期适应干旱生态条件,分化出3种土壤生态型,即紫果型、红果型和绿果型沙地云杉,并在很多生态、生理特征上表现出明显的差异.本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了3种生态型沙地云杉的过氧化物同工酶和酯酶同工酶的酶谱特征.结果表明:不管是过氧化物同工酶还是酯酶同工酶,紫果型沙地云杉的酶带条数最多,红果型其次,绿果型酶带条数最少.在酶带强度方面也有类似的结果,紫果型沙地云杉具有较多的强、次强、中带,红果型其次,绿果型最少.这在一定程度上表明,在干旱条件下产生的3种不同生态型沙地云杉,以紫果型对干旱抗性最强,绿果型最弱,红果型居于二者之间,这一结论将为沙地云杉的经营管理及品种选择提供科学依据. 图2参21     

人参皂苷β-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学特性

通过硫酸铵分级沉淀、透析和高效液相色谱等技术分别从两株黑曲霉Aspergillusniger 4 8g和A .niger 84 8g中分离纯化出了具有水解人参皂苷葡萄糖苷键的 β 葡萄糖苷酶 ,并对其酶学特性进行了研究 .结果表明 :两株黑曲霉A .niger 4 8g和A .niger 84 8g所产的 β 葡萄糖苷酶的表观分子量不同 ,分别为 34× 10 3 和 31× 10 3 kD ;两株菌所产的 β 葡萄糖苷酶的反应特性基本相同 .图 4表 4参 15     

酶催化合成草浆木质素—对甲酚共聚物的研究

在反相微乳液体系(十六烷基三甲基溴化铵＼正丁醇＼异辛烷＼水)中，用辣根过氧化物酶催化合成木质素—对甲酚共聚物，证实了反应的可行性。红外光谱的结果表明，木质素与对甲酚发生了聚合反应，差示扫描量热分析的结果也表明，引入对甲酚改善了木质素的热性能，合成的共聚物最高分子量可达189万。     

生物膜与A／O工艺耦合快速降解氨氮

应用由城市污水处理厂序批式间歇反应器（SBR）中筛选得到的4株特殊氨氧化菌，分别在SBR和有回流的生物膜与A／O工艺耦合体系培养中，考察其降解低碳高氨氮废水的功能。结果表明，自养硝化与异养氨氧化菌的混合菌群较单一自养硝化菌株降解氨氮速率快；在生物膜与A／O工艺耦合系统中，自养硝化与异养氨氧化菌协同代谢加速氨氮氧化脱除，氨氮脱除速率远比SBR系统快。对生物膜与A／O工艺耦合系统中氨氮脱除动力学进行了研究，模拟了NH4^＋、NO2^-；质量浓度与氨氮脱除比速率之间的关系，模型得到了较好的验证。     

自制便携式振荡装置/间接竞争酶联免疫吸附法在水库微囊藻毒素-LR快速应急监测中的应用

应用自制便携式振荡装置,运用间接竞争酶联免疫吸附法(icELISA)建立快速测定水中微囊藻毒素(MC)-LR的现场初筛方法。结果表明:(1)自制便携式振荡装置的检测结果与手工振荡不存在差异,可用自制便携式振荡装置替代手工来进行振荡孵育操作。(2)icELISA建立了快速测定MC-LR的现场监测方法,MC-LR的标准曲线线性关系较好(r=-0.997 0),满足定性定量分析的要求,检出限为0.03μg/L,测定下限为0.12μg/L,空白溶液与实际水样加标回收率为96.2%～113.0%,方法精密度、准确度均较好。     

铁镍对煤层生物产气过程中的关键酶影响分析

为了解铁和镍对煤制生物甲烷发酵的促进机制,选择F420、氢化酶、纤维素酶3种辅因子为对象,研究铁镍及两者组合对煤发酵产甲烷的影响。结果表明:1)对照样比空白样的辅酶F420活性要高;2)氢化酶、纤维素酶活与单因子浓度关系表明,存在低促高抑效应,且Fe2+激活酶活性的能力要比Ni2+强;3)两种酶活性随时间变化曲线表明,最佳离子组合时酶活都高于单离子最佳浓度。