朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶的原核表达及其活性分析

乙酰胆碱酯酶(ACh E)在神经信号传导过程中起重要作用,是氨基甲酸酯类和有机磷类农药的主要作用靶标.对朱砂叶螨ACh E进行体外表达和纯化,并分析其活性.将朱砂叶螨ace基因序列插入到原核高效表达载体p ET-30a中,构建表达载体p ET-30a/ace,转入表达菌株Escherichia coli BL21(DE3)中,IPTG诱导高效表达;镍柱纯化目的蛋白,经SDS-PAGE和Western Blot鉴定目的蛋白;以纯化的螨ACh E为抗原制备抗螨ACh E特异性抗体;改良的Ellman法测定螨ACh E活性.结果获得了相对分子质量(Mr)约为68×103的较高纯度的螨ACh E蛋白,检测大部分为可溶性表达,酶活检测具有乙酰胆碱酯酶活性,并制备了107效价的抗螨ACh E特异性抗体.采用重组ACh E(IC50=5.4 mmol/L)检测毒扁豆碱抑制活性比螨粗酶液(IC50=58.7 mmol/L)灵敏度提高11倍.本研究构建了螨ACh E体外高效表达载体并获得了具有较好活性的重组螨ACh E,可为抗ACh E杀螨剂的体外高通量筛选和以ACh E为靶标的农药残留检测奠定基础.     

无指盘臭蛙皮肤抗菌肽的分离纯化与氨基酸序列测定

在抗菌活性跟踪下对四川冕宁产无指盘臭蛙(Odorrana grahami)皮肤分泌物进行一系列层析分离,最终纯化得到4种抗菌肽,分别命名为Odorgrin A、Odorgrin B、Odorgrin C和Odorgrin D.质谱测得单一同位素分子量Mr分别为3364.8、3817.9、4859.4和3287.9.Edman降解法测得OdorgrinA的氨基酸序列为GLLDTFKNLALNAAKSAGVSV-LNSLSCKLSKTC.将以上结果与国内外对该物种抗菌肽研究的已有结果进行了比较分析,证明本研究分离到的4种抗菌肽与前人分离到的部分抗菌肽间具有一致性.     

酸性多糖微生物絮凝剂的提取、纯化与分析

对一株链球菌发酵获得的絮凝活性物质进行了分离和提取,并应用DEAE-Sephadex A25,Sephdarose 4B凝胶色谱柱从发酵液中提取活性物质并纯化.通过薄层色谱、气相色谱、紫外光谱、红外光谱、元素分析等表征,初步推测了其主要成分为酸性多糖,其中多糖含量(73%)、糖醛酸含量(20.6%)、多糖分子量为4.3×105,可能还有少量氨基或短肽结构.     

豆豉溶栓酶基因在毕赤酵母中的表达及其产物的纯化

将含有和不含前肽的豆豉溶栓酶编码序列在毕赤酵母中分别进行表达研究,发现在含有前肽的豆豉溶栓酶基因转化的毕赤酵母工程菌用甲醇诱导时,其培养液中可检测到较强的溶栓酶活性;而在不含前肽的豆豉溶栓酶基因转化的毕赤酵母菌用甲醇诱导时,培养液中未检测到溶栓酶活性.对毕赤酵母表达和分泌的豆豉溶栓酶进行了分离纯化,并对其纯化产物进行溶栓酶活性、SDS-PAGE电泳、抑制剂作用及免疫印迹分析.结果表明,分泌到培养液中的豆豉溶栓酶已经过剪切加工,其前肽已被切除,重组与天然的豆豉溶栓酶具有相同的溶栓酶活性,其所测定的各理化指标均一致.本研究实现了豆豉溶栓酶在毕赤酵母菌中成功表达,并首次直接证明了前肽对豆豉溶栓酶在毕赤酵母中分泌表达是必须的.图3表1参20     

烟气CO2捕集纯化装置设计要点分析

利用CO2驱油不仅可以提高原油采收率和延长油井生产寿命,还可以减少CO2的排放,保护大气环境,而CO2捕集技术是驱油过程中的重要环节之一.对现有的装置设计技术进行了研究分析,同时结合工程经验,分别从装置的组成、预处理系统的设计要点、吸收解析系统中化学吸收剂的选择、引风机的设置、系统水平衡的保持措施、系统能量的回收利用措...     

N2O回收利用及减排技术研究进展

减排N₂O对控制地球温室效应和保护人类健康具有重要的意义。综述了有关分离纯化N₂O的技术及N₂O回收利用于芳烃氧化制苯酚的研究进展,介绍了N₂O的热分解及催化分解等减排技术的研究成果。指出：采用N₂O直接氧化芳烃制苯酚技术需要解决的技术关键是开发高选择性的催化剂;催化分解是目前可行的N₂O减排技术,而制备高活性且抗O₂、水蒸气及硫化物干扰的催化剂是今后的研究热点。     

聚合氯化铝中纳米Al13电荷特性及其混凝效果

采用聚丙烯酰胺凝胶柱层析法分离纯化聚合氯化铝(PAC)中的Al₁₃形态,并采用Al-Ferron逐时络合比色法和ZATESIZER 3000HSA测定仪对分离所得纳米Al₁₃形态以及AlCl₃和PAC进行了分析表征和电荷特性的对比性研究;采用烧杯实验法对3个样品处理实际和模拟水样的混凝效果进行了对比性研究.Al-Ferron逐时络合比色法的结果表明,采用层析法分离可得到含量99%左右的纳米Al₁₃形态;电荷特性和混凝效果研究结果表明纳米Al₁₃形态较其它两者具有更好的除浊、除腐殖酸和脱色效果并且具有更强的电中和能力,因此Al₁₃形态是一种具有较高正电荷和较高的水解稳定性,在给水和废水处理中的一种较为有效的Al形态.     

微囊藻毒素的提取纯化及制备方法研究

蓝藻水华污染所带来的主要危害是由毒蓝藻向水体中释放多种不同类型的微囊藻毒素(Microcystis,MCs),其中微囊藻毒素MC-LR和MC-RR是我国富营养化水体中最主要的2种藻毒素.为解决对MCs进行深入研究中的MCs纯品缺少问题,迫切需要研究1种有效提取.纯化、制备MCs的方法.以天然水华蓝藻为原料,建立了以甲醇溶液提取、固相萃取和半制备色谱分离为主要步骤的微囊藻毒素提取、纯化和制备的方法.通过优化提取、分离和制备条件,制备了一定量的微囊藻毒素MC-LR和MC-RR高纯度样品.样品经HPLC鉴定分析,纯度可达98%以上.干燥后可得2种微囊藻毒素纯品分别为MC-RR121.1μg,MC-LR62.8μg.     

耐铅、铜微生物的筛选及吸附性能研究

采用浓度梯度筛选的方法,从重金属污染土壤中分离筛选到两株耐受和吸附铅、铜的细菌G、Y。用单因素的方法得到G最适的培养条件为．T=30℃;pH=6．O;NaCl浓度为0．5％;Y的最适培养条件分别为：T=37℃;pH=8．5;NaCl浓度为0．5％。用原子吸收分光光度法测得,G、Y的冻干菌体对Pb2＋、Cu2＋的吸附量分别为：G铅 126．42mg／g,G铜75mg／g,Y钢61．08mg／g,Y钢45．86mg／g。G湿菌体对铅、铜的吸附率分别为：G铅94．66％,G铜92．84％;Y湿菌体对铅、铜的吸附率分别为：Y铅99．74％,Y铜97．96％。经检测,其遗传性状稳定。可进一步开发为重金属吸附剂。     

雾化法生产镍粉 实现资源再利用

我国镍资源相当稀少 ,利用低成本的废弃镍网、片角料生产高纯度、高附加值、经济效益可观的超细镍粉不仅可变废为宝 ,还减少环境污染。2 0 0 2年 1 0月 1 1日 ,中国环境保护产业协会就曾主持召开了江苏省江阴市镍网厂关于研制“废弃镍网、片资源回收与开发再利用技术”的评议会 ,与会专家一致认为超细镍粉的市场前景十分广阔。它主要应用于“焊工工艺材料领域、不锈钢领域、多孔材料领域等等。江阴市镍网厂研制的技术 ,采用中频炉熔融雾化法生产“超细镍粉”(镍含量≥ 99.8% ) ,粉度达 80 0目 ,且在 80 0目下可调。据专家介绍 ,一般情况下由…