苏云金芽胞杆菌菌株WB9编码活性因子的基因分析

采用PCR—RFLP及PCR技术对苏云金芽胞杆菌新分离菌株WB9的ICP、VIP、几丁质酶和肠毒素4种活性因子的编码基因进行了分析．结果表明，该菌株含有编码ICP的cry1Aa、cry1Ab、cry1Cb、cry1Fa和cry1GaS个cry1基因型，编码Vip3A蛋白的vip3A基因以及编码3种肠毒素的hblA、bceT和entS基因；不含编码几丁质酶的基因．将vip3A、hblA、bceT和entS基因PCR产物回收纯化后直接测序，经在线的BLAST软件进行同源性分析，前两个基因片段与Bt已公布基因序列的相应片段同源性分别为99％和96％～98％，bceT基因片段与蜡质芽孢杆菌bceT相应片段同源性为97％．     

多能硫杆菌1,5—二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶的酶学特征及…

从固体平板的生长情况及ＲｕｂｉｓＣｏ酶活性测定结果，表明多能硫杆菌是通过卡尔文循环固定的Ｃ为蔗糖或糊精有该循环的关键酶－１，５－二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶，进一步将我能硫杆菌染色体ＤＮＡ用各种限制性内切酶酶切，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转移到硝酸纤维滤膜上，与光合Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒ ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓＣ基因探针杂交，显示出杂交带型，说明多能硫杆菌具有Ｒ．ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ同源的羧化酶基因，并初步     

油田土壤中脱除有机硫菌株的分离与鉴定

从中原油田采集的土壤样品中分离得到有脱除有机硫(二苯并噻吩)能力的菌株ZYX。该菌株为革兰氏染色阳性,无运动性,专性需氧,固体培养基上菌落为浅黄色、圆形、湿润、有光泽、边缘整齐,培养2d后平均直径为1.5mm,在液体培养基中有明显的杆-球状生长周期。对该菌株的16SrDNA的全序列测序,并进行DNA同源性分析,发现它与与Arthrobactersp.P2的同源性为99.53%,其主要形态及生理生化特征也与Arthrobacter属相符。实验表明,最佳生长所需的DBT浓度是0.01g·L-1,最适pH值为7.0,最佳碳源和氮源分别为甘油和谷氨酰氨。     

根癌农杆菌介导的高赖氨酸蛋白基因转化叶用莴苣的研究

构建了植物表达载体pLBI，该载体携带35S启动子、高赖氨酸蛋白基因(LRP)、NPTⅡ基因和NOS终止子，对影响根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens L.)转化的多种因素进行探索后，建立了一种农杆菌介导的稳定的叶用莴苣遗传转化系统．选择目前生产上大量推广应用的叶用莴苣品种，以其无菌苗子叶为外植体，经农杆菌LBA4404(含质粒pLBI)感染，在含ρ(Kan)／mgL^-1=100的芽分化培养基上筛选转化芽，转入含相同浓度抗生素的生根培养基上进行生根筛选，直至得到完整的再生植株．PCR扩增及Southern blot的检测结果均表明，高赖氨酸蛋白基因已整合到叶用莴苣基因组中．图4表4参6     

抗真菌多肽——捷安肽素高产菌的选育

从新疆棉株上分离得到一株细菌ZK ,经培养物性状和生理生化鉴定 ,确定该菌为芽孢杆菌属 (Bacillussp.)菌 ,其代谢产物为一种抗病原真菌的肽类物质———捷安肽素 .以此株菌作为出发菌株 ,进行紫外线、微波和亚硝基胍诱变 ,诱变处理后获得高产突变株Mv2 8,在摇瓶试验中 ,该变异株产捷安肽素活性比出发菌株提高 31.6 % .图 5表 5参 12     

L-山梨糖还原酶基因在大肠杆菌中的表达及融合蛋白的酶学特性

为获得L 山梨糖还原酶 (SR)整个操纵子序列 ,以 pGEM 3zf( )作为载体构建了Gluconobactersp .S6基因文库 .结合转化子在以L 山梨糖为唯一碳源培养基上的生长情况 ,利用PCR技术筛选到一个含L 山梨糖还原酶基因的阳性克隆pGEM 3zf( ) sr3/E .coli,酶切鉴定插入片断长度约 5 .0kb左右 .以 pGEM 3zf( ) sr3/E .coli质粒DNA为模板 ,扩增SR结构基因 .PCR产物经测序验证为SR基因序列后 ,与表达载体Pet32a( )相连 ,转化宿主大肠杆菌AD4 94 (DE3)对SR基因进行表达 ,并利用重金属离子亲和层析技术对SR融合蛋白进行了纯化 ,对其酶学特性进行了研究 .结果表明 :还原型辅酶II(NADPH)是SR酶蛋白的最适电子供体 ;SR酶蛋白的最适反应pH为 7.0 ,pH为6 .5时保持稳定 ,酶活力较高 ;最适反应温度是 5 0℃ ,30℃时热稳定性较好 .SDS PAGE电泳分析 ,SR融合蛋白的Mr 在6 5× 10 3 左右 ,由此推测出天然SR的Mr 在 5 3× 10 3 左右 ,与SR基因序列推测出的分子量大小一致 .图 13表 2参 6     

硫／石灰石自养反硝化工艺的研究

本文对上流式硫／石灰石生物自养反硝化法的各种工艺参数及影响因素进行了试验研究。研究结果表明：滤柱原本中需投加少量的磷酸盐．当温度为２２℃时，滤柱的临界硝酸盐体积负荷为５５５９ＮＯ３－－Ｎ／ｍ３·ｄ。１２℃时，临界负荷为３８０ｇＮＧ３－－Ｎ／ｍ３·ｄ．滤柱若在高于临界负荷下运行，则不可能达到完全反硝化出水中存在亚硝酸盐．若在低于临界负荷下运行，反硝化效率为１００％，亚硝酸盐在滤柱底部产生，而在滤柱上部还原为氮气，出水中不存在亚硝酸盐．     

产木聚糖酶嗜碱细菌的筛选及产酶条件研究

利用透明圈法筛选到一株产木聚糖酶的嗜碱芽孢杆菌NT－9，该菌株产木聚糖酶为组成型，正交设计实验结果表明，合适的产酶条件为：木糖15．0g/L，硫酸铵2．5g/L,Tween-80 2.0g/L,K2HPO4 1.0g/L MgSO4-7H2O 0.2g/L,pH值10．0，37℃，200r/min，振荡培养72h，其木聚糖酶活力可达到6．36IU／mL。     

微生物代谢与Fe3+催化氧化脱除烟气中SO2的研究

利用自制的鼓泡反应器,进行了含氧化亚铁硫杆菌的酸性铁溶液脱除烟气中SO2的实验研究.结果表明,细菌直接脱硫的效果较差;Fe3 在脱硫实验过程中既有催化作用,又有氧化作用;细菌主要起氧化Fe2 为Fe3 的作用,再通过Fe3 脱硫.Fe3 存在一个最佳质量浓度,在7～8 g/L左右.当初始Fe3 质量浓度为7.37 g/L时,脱硫10 h,其效率仍高达80%.     

动胶菌接触氧化法处理含油废水的工艺设计基础

根据动胶菌接触氧化法处理含油废水中试结果，为日处理１ ０００ ｍ３ 含油废水的生物接触氧化池进行了工艺设计，按负荷法（ 二种） 和降解动力学模型（ 三种） 进行了池容的计算，评价了它们的合理性．发现，其中以中试为基础的三种计算方法：一种降解动力学模型（ 据中试结果计算油去污系数） 、二种负荷法（ 据中试中填料容积负荷、从中试扩大为生产规模的入流流量） 较为合理，可作为设计池容的推荐方法．