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绿色木霉AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅲ基因的克隆与表达 总被引:6,自引:0,他引:6
为研究构建可降解纤维类固体废弃物的工程菌,采用RT-PCR方法克隆到绿色木霉(Trichoderma viride)AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅲ(EGⅢ)的cDNA 基因,测序后构建到酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)诱导型表达载体pYES2 上,用正交实验对超声波辅助酵母转化系统进行了优化.转化获得的EGⅢ转化子用2%的β-D-半乳糖诱导,用Northern 杂交、刚果红染色法和CMC糖化力法分别对目的基因的转录和表达产物的葡聚糖内切酶活性进行检测.结果表明, EGⅢ的cDNA 基因开放阅读框长度为1254bp,编码418个氨基酸,推测蛋白质分子量为44.1×103.正交实验中较优组合为第5组(超声波处理60s,温育40min,单链DNA 150μg,热激5min); 刚果红染色显示,转化子可产生明显的水解圈;CMC酶活检测显示该基因能在酿酒酵母中表达有生物活性的EGⅢ并分泌到胞外,发酵液中的酶活在培养60h达到最高0.041 U/mL;最适酶解温度为50℃;最适pH 值为5.8. 相似文献
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53.
以拟康宁木霉(Trichoderma koningiopsis)活菌体为吸附剂探讨了接触时间、初始铜浓度、投菌量、葡萄糖用量、碱浓度等因素对木霉活菌体处理含铜废水效果的影响.结果表明,在初始铜浓度100 mg/L,投菌量3 g/L,预处理碱浓度0.2mol/L的条件下,木霉活菌体吸附铜效果最佳,吸附量可达5.01 mg/g(湿).吸附Cu前后的拟康宁木霉菌降解四环素实验结果表明,吸附前后木霉对有机物均有降解效果,吸附过程属活菌体吸附.TEM结果显示,木霉去除铜的机制为表面吸附/络合和胞内富集,FTIR揭示了羟基是活性菌体吸附的主要基团,XRD分析结果证实了羟基与铜结合并以水蓝铜矾[Cu4(SO4)(OH)6H2O]形式络合于菌种细胞壁上,Langmuir吸附等温线较好地拟合了活菌对铜离子的吸附,表明菌体对铜离子主要为均质单层吸附. 相似文献
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55.
测定废水中的甲醛,在国内,目前常用的有乙酰丙酮比色法、变色酸比色法和盐酸苯肼比色法。采用上述方法时,水样均需预蒸溜。蒸溜时,由于酚类和其他醛类的干扰,条件较难控制。采用直接气相色谱法测定时,由于水与甲醛在色谱柱上分离不好,且甲醛在氢火焰离子检测器上响应不大,效果也不理想。本 相似文献
56.
补增UV-B辐射对焕镛木(Woonyoungia septentrionalis)叶片光合参数的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
补增UV B辐射 ,焕镛木 (Woonyoungiaseptentrionalis)叶片的光饱和光合速率较自然光下的降低 2 9% ,叶片的光合量子产率降低 5 0 .4 % ,光能转换效率亦降低 4 9% .补增UV B辐射抑制光下呼吸速率 (Rd) ,但不明显改变不包括光下呼吸的CO2 补偿点 .补增UV B辐射 ,焕镛木叶片的RuBP饱和的最大羧化速率和最大电子传递速率分别较自然光下的低 4 3.4 %和 4 6 .4 % ,Jmax:Vcmax亦降低 ,显示补增UV B辐射对Jmax的影响较Vcmax明显 .补增UV B辐射亦引起磷酸三碳糖利用速率降低 .叶片多个生化过程被抑制可能是引起植物光合速率降低的原因 .补增UV B辐射 ,降低了气孔对空气CO2 浓度和相对湿度变化的敏感度 ,则可能影响植株对环境因素变化的适应性 .图 3表 4参 2 3 相似文献
57.
大豆苷元和染料木素的提取、分离及定性、定量方法 总被引:5,自引:0,他引:5
建立了大豆苷元和染料木素的提取、分离以及定性、定量的方法.首先用正己烷对豆粕脱脂,脱脂豆粕再用70%的乙醇提取,浓缩乙醇提取液至无醇,然后用与水相相同体积的乙酸乙酯萃取3次,合并并浓缩乙酸乙酯相.用GF254层析板,并以甲苯-氯仿-丙酮(V:V:V=4:1.8:1.8)为展开剂对乙酸乙酯相进行薄层层析,然后对Rf=0.50和Rf=0.63的荧光斑进行高效液相色谱分析,并与大豆苷元和染料木素标准品的HPLC色谱图对比,证实Rf=0.50的物质为大豆苷元,Rf=0.63的物质为染料木素,用紫外-可见分光光度法进行定量.在本实验条件下,大豆苷元和染料木素提取率相对标准偏差分别为1.40%和0.87%,含量测定值的相对偏差分别为3.69%和3.52%,表明本实验建立的大豆苷元和染料木素的提取分离方法稳定有效,定量方法准确可靠.图1表4参9 相似文献
58.
垃圾堆肥高效纤维素分解菌的筛选与培育技术 总被引:2,自引:0,他引:2
从堆肥、马粪、果园土、污泥等20个样品中,分离筛选出3株对滤纸分解旺盛的纤维素分解菌:C1、C2、C3,并外购康氏木霉、白腐菌、变色栓菌一起作为出发株,经紫外诱变处理后,在含葡萄糖的产酶培养基平板上筛选到能形成较大透明圈的突变株,并进行CMC酶活、微晶纤维素酶活及天然粗纤维分解能力测定。实验结果证明白腐菌经紫外线照射60s诱变而得的C16不仅透明圈大,CMC酶活高(60.08U/mL)是出发株的2倍,而且其对天然粗纤维分解能力强,10d分解率达35%。 相似文献
60.
台湾明道中学的花工班长蔡敏郎,在校内负责园艺工作。8年前学校成立了蝴蝶园。在他的努力下,现在校内四处蝴蝶起舞。为了更好地丰富校园的角落,蔡敏郎先生做出了许多努力。他曾参加中兴大学有机农业的训练课程,把有机概念带到校园,不在学校的植物上喷洒农药除虫。"但是一定要忍受阵痛期,刚开始植物都会被吃得很惨。"蔡敏郎回忆说。学校当时的物种都是园艺上的种类,对生物没有什么吸引力,但蔡敏郎要的是搞清楚植物跟昆虫的关系,他发现原 相似文献