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112.
113.
HaNPV多角体蛋白在宿主不同组织中的时相性表达 总被引:2,自引:0,他引:2
应用亲和凝胶过滤层析对多角体蛋白多克隆抗血清进行纯化,辣根过氧化物酶进行标记,用于ELISA法检测中肠、血淋巴、脂肪体中的多角体蛋白的含量变化.结果:中肠在感染24h含量最高,48h最低,72h较48h略有升高,96h和120h与72h基本保持一致;血淋巴在感染48h含量最高,然后下降至96h,120h又稍有升高;脂肪体在感染72h开始增加,直至120h.三种组织中多角体蛋白含量变化并不同步.从表达的时相性看,与NPV的感染过程基本一致,即从中肠至血腔再到脂肪体.免疫电镜观察表明,感染72h的中肠,在胞浆中合成的多角体蛋白此时已转运到细胞核中 相似文献
114.
从黑曲霉(Aspergillus niger)nl-1中克隆获得木聚糖酶基因xynB.该基因全长745 bp,含有67 bp内含子,与公布的黑曲霉xynB基因有较高的同源性.将PCR扩增的木聚糖酶成熟肽基因和含有信号肽的基因分别连接到表达载体肠杆菌Top10 F’、DH10B和两种BL21宿主中获得重组菌株.通过IPTG诱导,xynB基因在重组菌株中获得特异性表达.表达产物以胞内可溶性蛋白和不溶性包涵体形式存在.诱导4 h,重组菌株pTrc-99a-xynB[BL21 condon plus(DE3)]表达量最高,胞内酶活达到299 IU/L.重组质粒pTrc-99a-xyn B(S)在不同宿主胞内和胞外均能分泌目的蛋白,诱导10 h,胞外酶活pTrc-99a-xynB(S)[BL21 condon plus(DE3)]达到347 IU/L.而pET-20b-xynB(S)在两种BL21宿主中均不表达.经SDS-PAGE分析,以pTrc-99a和pET-20b作为表达载体时,重组蛋白相对分子质量分别约为45×103和30×103.与pET-20b相比,pTrc-99a以及自身信号肽的引导更有利于重组木聚糖酶的表达. 相似文献
115.
绿色荧光蛋白基因标记内生枯草芽孢杆菌 总被引:14,自引:0,他引:14
用枯草芽孢杆菌168菌株rpsD基因的启动子替换质粒pGFP4412中蜡状芽孢杆菌4412启动子,从而构建了能在枯草芽孢杆菌中表达绿色荧光蛋白基因gfpmut3a的载体pS4GFP,将其导入具有内生、防病、促生作用的野生型枯草芽孢杆菌BS-2菌株中,筛选获得遗传稳定性好且具有良好发光表型的标记菌株BS-2-gfp.该标记菌株在小白菜体内的定殖研究结果表明,该菌株能够在小白菜根际及根、茎、叶内定殖和传导,接菌50d后仍能在其体内分离到标记菌株.图5参17 相似文献
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刘林敏邱子文叶清华谢倩王威陈清西 《应用与环境生物学报》2022,(6):1503-1509
糖外排转运蛋白(sugars will eventually be exported transporters,SWEET)介导植物光合同化产物蔗糖的跨膜运输.以橄榄(Canarium album(Lour.)Raeusch.)果实为材料,通过气相色谱串联质谱(GC-MS)检测橄榄果实中糖组分及含量变化,利用RT-PCR技术克隆得到CaSWEET7和CaSWEET15基因开放阅读框(ORF)序列.结果表明:CaSWEET7和CaSWEET15基因ORF全长分别为774 bp和951 bp,分别编码长度为257个和316个氨基酸残基,具有2个MtN3_slv结构域;进化树分析表明,CaSWEET7属于CladeⅡ,CaSWEET15属于CladeⅢ.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测其在不同发育时期的果实中相对表达量变化,结果表明,随着果实发育,CaSWEET7和CaSWEET15表达量逐渐递增,且与果实发育蔗糖含量变化呈显著正相关(相关性系数分别为0.931和0.904,P<0.05);利用酵母功能互补证明CaSWEET7和CaSWEET15基因编码的蛋白具有转运蔗糖能力.本研究表明CaSWEET7和CaSWEET15基因可能在橄榄果实蔗糖积累中发挥作用.(图9表2参44) 相似文献
117.
灾害地貌专家系统试验研究 总被引:2,自引:0,他引:2
介绍了灾害地貌专家的建造原理与方法,阐述了灾害地貌专家知识的分类分级方法,讨论了灾害地貌专家系统中知识表示的基本原则和知识库中专家知识的组织方式,以及推理机的设计和推理规则的构造原理与方法。系统采用压缩编码方式存储各种地学专题图形和遥感图像数据,具有与图像的存储更新,查询检索、分析处理、图像显少自动制图功能。该系统可以对灾害地貌过程进行专家级的预测和评价,并对灾害地貌的综合治理与区域规划提出几种可 相似文献
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The immunodeficiency associated with a defective expression of HLA molecules is an autosomal recessive disorder leading to death during childhood. We have performed prenatal diagnosis for six fetuses at risk for this disease by membrane immunofluorescence on blood lymphocytes and monocytes, using specific monoclonal antibodies for HLA class I and II molecules. Two pregnancies have been found to be affected. The diagnosis has been confirmed on each abortus by the study of the membrane expression of HLA class I and II molecules on blood lymphocytes and monocytes, and on thymic and splenic cells. The four other cases were found to be normal both during pregnancy and after birth. The detection of the defect as early as the 20th week of gestation allows selective termination. 相似文献
120.
We attempted to develop a prenatal diagnosis in fetuses at risk for immunodeficiency by fetal blood sampling performed under fetoscopy at 18–22 weeks of gestation. In order to obtain normal values, we first investigated thirty-five control fetuses whose blood punctures were undertaken for the diagnosis of haemoglobinopathies. Surface markers and in vitro mitogen-induced proliferation of the fetal lymphocytes were studied using micromethods. We then examined two fetuses at risk for two different types of severe combined immunodeficiency and established their immunological integrity, hence avoiding an unjustified termination of pregnancy. This immunological integrity was confirmed after birth. 相似文献