环境诱变剂对人血红细胞膜蛋白巯基结合位置性质的影响

用不同链长的马来酰亚胺氮氧自由基Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ和Ⅴ标记健康人血红细胞膜的ESR波谱表明,在单独作用时,重铬酸钾(Cr~(6+)),氟化钠(F-)和丝裂霉素C(Mit C)降低W/S值(弱固定化组分/强固定化组分),而秋水仙素(Colch)则增大;在联合作用时,除保留Cr~(6+)和Mit C与Colch的不同以外,F-与其它三种诱变剂产生协同效应,尤在链长Ⅰ和Ⅴ较为明显.在以上四种诱变剂作用前后,以下三项均无特异的变化:五种链长自旋标记物标记测得的2A//均值±标准差为66.6±2.85G;W/S值随自旋标记物分子链长的增加而增大,与膜蛋白巯基结合位置呈圆锥形,其深度为15.33A;Ⅰ和Ⅲ链长分子与膜蛋白巯基结合位置的ESR波谱中出现Q峰,Ⅱ的大于Ⅲ的.     

用自旋捕集技术研究氟化物刺激人多形核白细胞呼吸爆发产生的活性氧自由基

用ESR波谱研究证明,F~-刺激人多形核白细胞(PMN)呼吸爆发产生活性氧自由基(O_2~-和·OH),同时消耗O_2.用DMPO自旋捕集技术表明,在高浓度F~-刺激下PMN产生DMPO-OOH加合物;在低浓度F~-刺激下则产生DMPO-OH;在适中浓度F~-刺激下PMN先产生DMPO-OOH,随浓度降低变为DMPO-OH.用超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的实验确定氧自由基主要来自O_2~-.用CTPO和CrOX的自旋探针测氧法证明,PMN受F~-刺激产生氧自由基时消耗的O_2是细胞外介质中的O_2.     

用自旋标记方法研究环境诱变剂对健康人红细胞膜动态性质的影响

健康人的完整血红细胞膜用脂肪酸自旋标记物Ⅰ(12,3)和Ⅰ(1,14)标记,测得其ESR波谱·氟化钠、重铬酸钾、丝裂霉素C和秋水仙素等环境诱变剂较显著地改变膜的序参数S和旋转相关时间,尤在膜表层,S和明显增大。温度曲线表明,人血的完整红细胞膜的相变点在膜表层和深层分别是38℃和40.0℃。在诱变剂作用下,膜类酯的动力学性质有明显变化。     

香烟气相物质引发的脂质过氧化与粒细胞呼吸爆发关系的ESR研究

香烟气相物质和空气都能使卵磷脂脂质体发生脂质过氧化.用ESR自旋捕集技术,以DMPO为捕捉剂,研究这种过氧化的脂质体对大鼠腹腔粒细胞(RPG)呼吸爆发的影响.结果表明,一定过氧化程度的脂质可增加促癌剂PMA刺激RPG产生的O_2~-.脂浓度为0.5mg/ml时,这种作用随充烟量的增加先不断增强,30s左右达最大值,然后又逐渐减小.空气引发的脂质过氧化对RPG呼吸爆发有相似的作用.     

吸烟烟气的细胞毒性作用和茶多酚保护作用的研究

以体外培养的中国仓鼠肺成纤维细胞V79为模型,用分光光度法和ESR自旋标记方法研究了吸烟烟气对细胞的损伤以及抗氧化剂茶多酚（GTP）的保护作用。结果表明,吸烟烟气能引发V79细胞膜的脂质过氧化,导致细胞死亡,使膜浅层的流动性增加,但对膜深层的动态性质没有明显改变。加入GTP后能抑制烟气引起的膜脂过氧化和膜流动性的改变以及细胞死亡,且这种抑制作用与GTP的浓度呈量效关系,而GTP本身对细胞膜浅层的流动性无明显作用,但对深层的流动性则有一定的影响。此外,还用马来酰亚胺自旋探针研究吸烟烟气对细胞膜膜蛋白巯基结合位点局部构象的影响,结果发现,随着烟气作用增强,ESR波谱的强弱固定化比值（S/W）增大,表明膜蛋白上巯基结合位点处结构变得紧密,这说明吸烟烟气改变了膜蛋白的构象,GTP本身在高浓度（＞0.1mg/mL）时也能使S/W增大,当低浓度（＜0.05mg/mL）则没有影响。当GTP浓度为0.01mg/mL时就可以抑制烟气引起的S/W的增大。     

用自旋捕集技术研究氟化物刺激人多形核白细胞呼吸爆发产生的活性氧自由基

用ESR波谱研究证明,F^-刺激人多形核白细胞（PMN）呼吸爆发产生活性氧自由基（O₂^-和·OH）,同时消耗O₂.用DMPO自旋捕集技术表明,在高浓度F^-刺激下PMN产生DMPO-OOH加合物;在低浓度F^-刺激下则产生DMPO-OH;在适中浓度F^-刺激下PMN先产生DMPO-OOH,随浓度降低变为DMPO-OH.用超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的实验确定氧自由基主要来自O₂^-.用CTPO和CrOX的自旋探针测氧法证明,PMN受F^-刺激产生氧自由基时消耗的O₂是细胞外介质中的O₂.     

用ESR研究香烟烟气对多形核白细胞呼吸爆发的影响

用自旋捕集技术,以二甲基吡咯啉氮酮DMPO(5,5-dimethyl—1-oxide)作为捕捉剂,对吸烟中的气相物质能否刺激人多形核白细胞(PMN)进行呼吸爆发以及吸烟中的气相物质对促癌剂咐(口拜)醇PMA(phorbol myristate acetate)刺激的PMN释放的O_2~-动力学过程的影响进行了研究。结果表明,香烟烟气不能刺激PMN释放O_2~-,但可以改变受PMA刺激的PMN释放O_2~-的动力学过程,且随香烟烟气量的增加,PMN释放出O_2~-的浓度逐渐减小。     

Cr6+对人血红细胞膜的损伤及茶多酚对其保护作用的分子机理研究

采用TBA(thiobatbrturic acid)法和ESR自旅标记技术,测定了无机致癌物重铬酸钾(Cr~(6+))对红细胞膜的蛋白巯基和磷脂的作用,结果表明,Cr~(6+)引发红细胞膜产生脂质过氧化的同时,膜上蛋白巯基构象和磷脂的流动性发生改变.而茶多酚对Cr~(6+)引起红细胞膜上的这些变化均有明显抑制作用.