应用SCGE技术检测石油烃对马粪海胆性腺细胞的DNA损伤效应

以马粪海胆(Hemicentrotus pulcherrimus)为受试生物,应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术研究了石油烃对马粪海胆性腺细胞DNA的损伤效应。实验结果发现当石油烃分散液(WAFs)浓度低于40 mg/L时,未对马粪海胆性腺细胞的DNA造成损伤;当浓度达到50 mg/L时,马粪海胆性腺细胞DNA则发生了明显的彗星拖尾现象,表明高浓度石油烃分散液可以对海胆性腺细胞DNA造成严重损伤,且马粪海胆性腺细胞的DNA受损率、彗星尾部DNA百分含量以及DNA平均迁移长度与暴露天数呈现出良好的线性关系。     

石油烃对虾夷马粪海胆胚胎发育及四种酶活力的影响

通过虾夷马粪海胆胚胎暴露实验,研究了常见石油烃零号柴油对海胆胚胎发育时间以及发育时期内海胆胚胎的SOD、CAT、GPx及谷胱甘肽转移酶(GST)四种酶活性的影响。结果表明,不同浓度的零号柴油水溶组分对海胆胚胎发育的各个时期具有不同程度的延迟效应,低浓度对海胆胚胎中的四种酶表现出不同程度的诱导效应;四种酶活性的变化程度比较,对GPx和GST酶活力的影响要明显大于对CAT和SOD的影响;随着浓度的不断增大,四种酶活性受到不同程度的抑制作用,高浓度对酶活性的抑制作用尤为显著;囊胚期对影响最为敏感,可作为生物标志物。     

马粪海胆RAPD反应体系的优化

以马粪海胆为研究对象,从影响RAPD实验结果的4个因素(引物、dNTP、Taq酶、DNA)入手,进行单因素设计,从而寻找最佳的反应浓度,达到最佳的反应效果。优化后4种因素的最佳反应浓度分别为:引物100μmol/L、dNTP 2 500μmol/L、Taq酶2U、DNA稀释80倍。在优化的反应条件下,得到的产物重复性和稳定性都比较不错。