川牛膝多糖的体外免疫活性研究

通过体外细胞毒性检测、小鼠脾淋巴细胞增殖实验、NK细胞活性测定以及腹腔巨噬细胞吞噬巾性红等实验,对川牛膝多糖的免疫活性进行了研究.研究结果表明,川牛膝多糖体外在10～300 pg/mL浓度范围内对细胞不具有直接毒性作用,能够促进B淋巴细胞增殖(P0.05).因此,川牛膝多糖既具有体液免疫功能,又能提高NK细胞活性和小鼠巨噬细胞的吞噬能力,表明其免疫活性广泛.     

川牛膝多糖硫酸酯的体外抗单纯疱疹病毒2型活性

从传统的川产道地中药材川牛膝中提取多糖RCP，用氯磺酸-吡啶法制备了它的硫酸酯衍生物s—RCP,产物经红外鉴定，证实RCP硫酸酯化后羟基部分被硫酸基取代，在1250cm^-1和810cm^-1处显示了硫酸基的特征吸收峰值,ω(S)=8．27％，取代度Ds=0．569．体外实验研究了RCP和S—RCP对非洲绿猴肾细胞(Vero cell line)的细胞毒性和抗单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的活性．细胞病变效应法(CPE)和MTT法结果表明RCP在6．0mg／mL以下，S-RCP在4．0mg／mL以下均无细胞毒性，RCP本身无抗病毒活性，经硫酸酯衍生后的S—RCP获得抗病毒活性，0．25—4．0mg／，mL的S—RCP能很好地抑制HSV-2引起的细胞病变,以0．5mg／mL的无环鸟苷(ACV)作为阳性对照，结果显示当S-RCP浓度为2．0mg／mL和4．0mg／mL时有显著的抗病毒作用，效果与阳性ACV相当．图1表8参20     

川牛膝种子保存技术初探

对川牛膝种子开展室温常规贮藏、室温湿沙贮藏、室温超干燥贮藏、4℃低温贮藏、冷冻贮藏等5种贮藏试验,结果表明：①室温湿沙贮藏是川牛膝种子短期保存的最优方法,能显著提高种子发芽率,其值较常规保存高14.5％;其次为4℃低温贮藏.②冷冻贮藏是川牛膝种子长期保存的最佳方法,保存3年后当其他保存方式的种子寿命几乎丧失时,其生活力及发芽率仍保持在较高水平,分别为60.3％和49.9％;其次为超干燥贮藏,种子生活力和发芽率分别为51.3％和41.2％.     

川牛膝及其混淆品的抗炎作用比较

比较4种不同产地的川牛膝及其3种混淆品的抗炎药理作用.采用二甲苯致小鼠耳肿胀和蛋清致大鼠足肿胀炎症模淹,研究川牛膝及其混淆品的抗炎作用.结果显示,板桥、宝兴川牛膝和川牛膝的3种混淆品可减轻二甲苯致小鼠耳肿胀程度和蛋清致大鼠足肿胀程度,且具有明显的量效关系;金口河川牛膝剂量为10g/ks时,可减轻蛋清致大鼠足肿胀程度,表明板桥、宝兴和金口河产川牛膝具有一定的抗炎作用,奉节川牛膝未见有抗炎作用;麻牛膝和“红牛膝”具有明显的抗炎作用.     

川牛膝多糖的分离、纯化及单糖组成

采用水提醇沉法提取川牛膝多糖粗品CPC，经685弱碱阴离子交换柱层析和Bio—Gel P2凝胶柱层析进一步纯化，得到川牛膝多糖RCP(xefined Cyathula officinalis Kuan polysaccharide)．紫外扫描、高效液相色谱、聚丙烯酰胺盘状凝胶电泳证明RCP为均一组分．质谱图显示RCP的分子量(从)主要分布在1000-2200．薄层正交试验确定了RCP完全水解的最优条件．薄层层析及高效液相色谱—蒸发光散射检测(HPLC—ELSD)技术揭示，RCP单糖组成为D-果糖和D-葡萄糖．图11表2参18     

我国川牛膝资源分布及生产状况调查

对我国川牛膝的资源分布及生产状况进行了实地调查,以期为川牛膝的种质系统评价及产业发展提供参考。在查阅文献的基础上,通过实地调查、样品收集、走访当地有关部门发现,目前川牛膝主要为2—3年生,生长环境在海拔1800m左右,市场上大宗商品主要来自四川雅安及金口河区、重庆奉节县、湖南隆回县、龙山县和湖北恩施的板桥等地,不同的种植方式对其生产周期有影响。川牛膝已出现新的产区,各地川牛膝种质有不同程度的混杂或不纯,亟待逐步纯化并培育优良品种。