基于原代培养背角无齿蚌鳃细胞的镉毒性效应评价

为了探究淡水贝类背角无齿蚌鳃细胞的原代培养途径，并阐释其在评价水体Cd²⁺毒性效应上的潜力，本研究比较了不同酶分解方法（链霉蛋白酶、胰蛋白酶）的鳃细胞存活率差异，并分析了L-15培养基中不同血清浓度（10% FBS、20% FBS）对鳃细胞存活率的影响，细胞置于20℃生化培养箱中培养.进而根据Cd²⁺对鳃细胞的LC₂₅值设定0.0625、0.125、0.25、0.5和1.0 mg·L^-1 5个Cd²⁺理论浓度梯度，对原代培养的鳃细胞进行24 h暴露，分析了细胞活力、总超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和酸性磷酸酶（AcP）的变化特征.结果表明：0.025%链霉蛋白酶在4℃分解16 h的鳃细胞存活率为98.2%±0.2%，显著高于0.25%胰蛋白酶在26℃分解30 min的89.4%±3.5%鳃细胞存活率（p<0.05）；L15培养基加入10% FBS的细胞存活率总体显著高于添加20% FBS的细胞存活率（p<0.05）.在上述较佳的分解和血清浓度组合条件下，细胞培养120 h后，其存活率仍高达90.1%±4.7%.鳃细胞活力随着Cd²⁺浓度的增加而降低，两者之间呈显著的线性负相关（p<0.05）；随着Cd²⁺浓度的增加，SOD和AcP含量总体增加，而CAT含量呈现出"诱导-抑制"的变化趋势.本研究初步建立了较为适宜的背角无齿蚌鳃细胞的原代培养方法，并揭示了其原代培养鳃细胞的细胞活力及SOD、CAT、AcP水平，具有作为评价水环境Cd²⁺毒性/污染的生物指标的潜力.     

林丹短期暴露下的斑马鱼(Brachydanio rerio)组织学变化

以斑马鱼(Brachydaniorerio)为受试生物,初步探讨了林丹对斑马鱼的急性毒性以及不同浓度(0.01μg·L-1、1.0μg·L-1、100.0μg·L-1)的林丹暴露36d后对斑马鱼鳃和肝组织结构变化的影响.结果表明,林丹对斑马鱼96h-LC50为97.98μg·L-1,95%可信限为94.38￣101.72μg·L-1.当林丹浓度为0.01μg·L-1时,斑马鱼的鳃和肝组织结构未发生明显变化,而暴露在1.0μg·L-1和100.0μg·L-1林丹溶液中的斑马鱼的鳃和肝组织结构变化显著.斑马鱼鳃组织变化为:上皮细胞残损、脱落,鳃小片上皮细胞水肿,柱细胞变形.斑马鱼肝组织变化为:部分肝细胞肿大,细胞核萎缩变形或偏离细胞中心,胞质疏松,空泡明显增加,细胞质中可见脂沉积.与1.0μg·L-1林丹暴露相比,暴露在100μg·L-1林丹溶液中的斑马鱼鳃和肝组织结构受到的损害更为严重.     

Cd~(2+)污染对草鱼不同组织中过氧化物酶活性的影响

采用细静水生物测试法研究Cd2+对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)的肝胰脏、肾脏和鳃组织过氧化物酶(POD)活性的影响。结果表明,在7 d的试验时间内,低浓度Cd2+胁迫时,肝胰脏和肾脏组织POD活性随时间变化均呈先降低后升高再降低的变化趋势,而高浓度Cd2+胁迫时,肝胰脏组织POD活性始终受到显著抑制(P<0.05),肾脏组织POD活性短时间内被诱导,但随着暴露时间的延长,其受到显著抑制(P<0.05);鳃组织在受到Cd2+污染时POD活性随时间变化呈先升高后降低变化趋势。草鱼鳃组织POD活性明显低于肝胰脏和肾脏组织。     

低质量浓度2-硝基-4′-羟基二苯胺暴露对鲫鱼鳃组织HSP70诱导的影响

采用实验室模拟的方法，以日本锦鲫（Carassius auratus）作为实验生物，运用SDS变性胶（SDS-PAGE）蛋白电泳和免疫印迹（Western Blotting）等分子生物学技术，研究了1mg／L 2-硝基-4’-羟基二苯胺（HC Orange No．1）在不同暴露时期对鲫鱼鳃组织应激蛋白HSP70诱导表达的情况，并探讨了鲫鱼鳃组织HSP70作为该有机污染物生物标志物的可行性。结果表明：鲫鱼鳃组织HSP70在暴露2d后相对于空白对照组开始有显著的表达（P〈0．05），并随着暴露天数的增加其表达量显著增加；在暴露4d后其表达量达到最大值；在暴露7d后其表达量开始下降，但可能由于长时间的有机物毒性胁迫，造成了鲫鱼鳃组织损伤和病变，HSP70在随后的暴露时间段内表达量明显下降，均显著低于空白对照组（P〈0．05），因此，鲫鱼鳃组织HSP70并不适宜作为该有机污染物在自然界水生生态系统中的生物标志物。     

不同浓度Cu2+对青海湖裸鲤鳃细胞培养的影响

文章通过实验对青海湖裸鲤鳃组织细胞在不同浓度梯度Cu2+条件下的体外培养,即Cu2+浓度分别为国家渔业水质标准的5倍、10倍、20倍和40倍,分别为0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L和0.4mg/L,了解Cu2+对裸鲤鳃细胞生长状况的影响;实验结果显示:5倍国家水质标准浓度的Cu2+对细胞基本无影响,20倍浓度的Cu2+对细胞产生明显影响,224m in后细胞出现死亡,485min后10倍浓度细胞出现死亡,618min后40倍浓度细胞全部死亡;实验揭示了重金属铜对裸鲤鳃细胞生长状况产生的影响以及鳃细胞死亡的临界浓度。     

镉对鲫鱼鳃和肝脏超氧化物歧化酶活性的影响

使用浸浴法以 0 mg/ L、0 .73 mg/ L、1 .46 mg/ L、2 .95 mg/ L 4个镉 (Cd Cl2 · 2 .5H2 O)浓度为丰产鲫 (Carassiusauratus of Penze(♀ )× Cyprinusacutidorsalis(♂ ) )幼鱼染毒 ,测定了 1 4 4 h内鳃及肝组织中超氧化物歧化酶 (SOD)活性的变化。结果表明 ,低浓度组Cd曝露时 ,鲫鱼鳃和肝组织中 SOD活性的变化短时间内不明显 ,但随着处理时间的延长 ,Cd提高了鳃和肝组织中 SOD的活性 ,导致“毒物兴奋效应”。高浓度组 Cd曝露时均抑制了肝和鳃中的 SOD活性 ,其作用随着曝露时间的延长和浓度的升高而增强 ,SOD酶活性降低所造成的活性氧伤害是引起鲫幼鱼死亡的重要原因。肝组织中的 SOD酶活性和敏感性高于鳃 ,这与其执行的生理功能有关     

镉对罗非鱼鳃线粒体结构和能量代谢的影响

为探明水环境镉对罗非鱼(Oreochromis niloticus)鳃线粒体结构和能量代谢的影响及其作用机理,本研究采用室内模拟方法,将罗非鱼在Cd²⁺浓度为0　μg/L、50　μg/L和500　μg/L的水中暴露7　d后,观察鳃线粒体超微结构并测定线粒体超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和鳃组织中磷酸果糖激酶(PFK)、ATP酶(ATPase)活性、乳酸(LD)、ATP、ADP、AMP含量及血浆中Na⁺、K⁺、Ca²⁺浓度和渗透压,并计算能荷值(EC).结果表明,50　μg/L组鱼鳃线粒体结构未受损, 除SOD酶活性被显著诱导外,其余测定指标与对照组相比无显著差异(p>0.05); 而500　μg/L组鱼鳃线粒体严重受损, LD、MDA、ADP、AMP和血浆K⁺含量显著高于对照组, SOD和ATPase活性显著低于对照组(p<0.05), PFK和渗透压无显著变化(p>0.05),但有降低趋势.结果表明,高浓度镉短期暴露将降低鱼鳃线粒体SOD活性而导致线粒体氧化损伤,同时抑制ATPase和PFK活性,影响鳃的能量供应和利用,最终降低鳃血浆渗透压和离子浓度调节能力可能是其毒性机理之一.     

Cd^2＋污染对草鱼不同组织中过氧化物酶活性的影响

采用细静水生物测试法研究Cd2＋对草鱼（Ctenopharyngodon idellus）的肝胰脏、肾脏和鳃组织过氧化物酶（POD）活性的影响。结果表明,在7 d的试验时间内,低浓度Cd2＋胁迫时,肝胰脏和肾脏组织POD活性随时间变化均呈先降低后升高再降低的变化趋势,而高浓度Cd2＋胁迫时,肝胰脏组织POD活性始终受到显著抑制（P〈0.05）,肾脏组织POD活性短时间内被诱导,但随着暴露时间的延长,其受到显著抑制（P〈0.05）;鳃组织在受到Cd2＋污染时POD活性随时间变化呈先升高后降低变化趋势。草鱼鳃组织POD活性明显低于肝胰脏和肾脏组织。     

Cd^2＋对长江华溪蟹谷胱甘肽系统的影响

采用急性毒性方法,研究了Cd2 对长江华溪蟹(Sinopotamon yangtsekiense)肝胰腺和鳃谷胱甘肽系统的影响.Cd2 浓度设置为7.25、14.5、29、58和116 ms/L,同时设对照组.分别在24、48、72和96 h用分光光度法测定了还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量,谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)和谷胱甘肽还原酶(GR)活力以及GSH/GSSG比值.结果显示,随着Cd2 浓度的增加和处理时间的延长,肝胰腺中GSH含量呈现逐渐降低的趋势,在96 h、Cd2 浓度116 mg/L时GSH含量降至最低值(28.805±2.239)mg/g;GPx活力先升后降;GSSG含量和GST与GR活力均无显著变化.鳃中GSH、GSSG含量和GPx活力的变化趋势与肝胰腺基本一致.GST和GR活力则随着Cd2 浓度的增大和处理时间的延长逐渐降低,在96 h、Cd2 浓度116 mg/L时GST和GR活力较对照组分别下降了44%和79%.肝胰腺和鳃中GSH/GSSG比值随着Cd2 浓度的增大和处理时间的延长逐渐降低.结果表明Cd2 对GSH和GSSG含量.GPx、GST、GR活力均产生了不同程度的影响;GSH/GSSG比值的变化能灵敏反映Cd2 对水生动物的胁迫程度及毒性大小,可作为一种准确敏感的生物学指标用以指示Cd2 污染.     

盐度对军曹鱼稚鱼血液生理生化及鳃Na~+-K~+ ATPase活性的影响

军曹鱼稚鱼[体重(6.52±0.71)g]在适应不同盐度(5、10、20、30和37)14 d后盐度5和10处理组特定生长率(SGR)显著低于其它组(P﹤0.05),且该两组血红蛋白、血细胞比容和红细胞数也显著低于盐度30和37组, 而血清皮质醇和乳酸含量则明显高于盐度30和37组.此外,低盐度组中稚鱼血糖有升高趋势,门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量随盐度降低而升高,但碱性磷酸酯酶(ALP)变化则相反.血清渗透压、Na+ 和Cl-离子浓度与盐度呈正相关,而K+浓度呈负相关.鳃NKA活性在盐度20组中最低,在盐度10组中最高.研究显示军曹鱼稚鱼有较强的盐度适应能力,适度降低盐度并不影响其生长,但在过低盐度中仍呈应激反应,且盐度变化还可影响多项血液生理生化指标.