壳寡糖诱导转反义mapk基因烟草的TMV抗性和PAL活性研究

壳寡糖具有诱导植物对病原物防御反应的作用,而PAL活性的升高通常被认为是发生抗性反应的标志之一.本文以mapk基因受到反义抑制的转基因枯斑三生烟草为试材,比较了壳寡糖诱导后转基因型和野生型烟草的PAL活性变化及对TMV抗性的变化.由实验结果初步推测,在壳寡糖诱导的植物抗性信号通路中,mapk可能为PAL的一个重要的上游基因,同时mapk在烟草抗TMV信号转导中亦为一个重要组分.图4表2参13     

TMV或宁南霉素处理对烟草叶片及类囊体膜蛋白组成的影响

对烟草花叶病毒(TMV)侵染、宁南霉素钝化处理的烟草叶片进行了叶片全蛋白多肽组分、类囊体膜蛋白组成的分析.结果表明,TMV侵染或钝化实验的烟草叶片中均出现TMV衣壳蛋白;但是与对照相比,TMV侵染叶片中Rubisco大亚基减少、小亚基增加,类囊体膜蛋白中PsaA、PsaB和Mr=33×103蛋白含量减少.表明TMV侵染要同时影响叶片细胞核基因组和叶绿体基因组的基因表达,从而影响光合作用碳代谢和类囊体膜光系统Ⅰ和Ⅱ.宁南霉素对TMV病毒短时间内具有钝化作用,而较长时间的作用效果不同,10 min钝化样品的蛋白组分保持较为完整,而30 min钝化样品的多肽缺失较为严重.图5表1参11     

宁南霉素对烟草花叶病毒的生物活性

研究了宁南霉素 (Ningnanmycin)对烟草花叶病毒 (tobaccomosaicvirus,TMV)的预防、治疗和钝化作用 .结果表明 ,宁南霉素喷施 5d后接种TMV ,对烟草花叶病毒的预防效果为 5 8.4 1% ;宁南霉素浓度为 15 0～ 2 0 0 μg/mL时 ,对烟草花叶病毒的治疗效果达 79.6 5 %～ 84 .96 % ,治疗效果最好为接种TMV 1d后喷施 2 0 0 μg/mL宁南霉素 ;宁南霉素对烟草花叶病毒的钝化效果为 76 .99%～ 83.19% ,混合 4 5min的TMV与宁南霉素等体积混合液效果更好 .试验证明 ,宁南霉素对烟草花叶病有很好的治疗作用 ,对烟草花叶病毒有显著的钝化效果 .图 1表 3参 15     

烟草花叶病毒siRNA设计及其植物表达载体构建

RNA干扰技术已广泛应用于沉默基因表达的研究.本文分析烟草花叶病毒(TMV)基因序列,选择设计编码小分子发卡结构RNA(hpRNA)的cDNA;并根据农杆菌双元载体质粒p2355多克隆位点区限制性酶切位点,两端分别加入XbaI和BamHI酶切位点;分别合成单链DNA复性后插入到p2355上,经PCR、测序验证,表明已成功构建了具有潜在表达烟草花叶病毒siRNA的植物表达载体.图3表1参26     

废水活性污泥处理过程去除TMV效果研究

对间歇及连续运行废水活性污泥处理过程去除人为污染高浓度烟草花叶病毒(tobaccomosaicvirus,TMV)的效率及其影响因素进行了研究.结果显示活性污泥去除TMV的效果受工艺参数的影响,其中污泥浓度直接影响所加入TMV的去除效率.同时,曝气强度也影响病毒的去除效率.在2个具不同运行工艺参数的活性污泥系统中连续加入枯斑数达(2 5～6 7)×104·L-1的TMV,连续运行一周其去除率仍均大于98%.当污泥BOD负荷率在0 534～0 899kg·(kg·d)-1,水力停留时间在4 8～10 2h,平均MLVSS在1780～3250mg·L-1范围内,TMV的去除效率同这些参数关系不大,说明活性污泥系统可有效地去除植物病毒而不过分地依赖于工艺条件,这为活性污泥法去除植物病毒的稳定性提供了保证.然而病毒的去除不等于灭活,很大程度上病毒仅是从液相转移到了固相,污泥中的病毒浓度往往比游离高出许多倍.因此在污泥农用、处置时要充分考虑到污泥的病毒学安全性问题.同时,在评价废水处理的有效性时也要考虑到这种现象.