耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达 |
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作者姓名: | 董晨 曹娟 张迹 沈标 |
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作者单位: | 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室,南京,210095 |
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摘 要: | 高温α-淀粉酶是发酵行业用量最大的酶类,为了实现高温α-淀粉酶基因的高效表达,本研究比较了不同启动子对地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中表达的影响.分别用强启动子P43和地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启动子构建了表达载体pP43NMK-amy和pUBCl9-amy,并在枯草芽孢杆菌BacillussubtilislA752S中进行表达.结果表明,与地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基闪自身启动子相比,采用P43启动子的耐高温α-淀粉酶其表达水平提高了8.9倍.而且在枯草芽孢杆菌B.subtilislA752S中分泌表达的α-淀粉酶仍具有耐高温的特性,酶反应的最适温度为90℃,表明酶的热稳定性南蛋白质本身的氨基酸序列决定的.
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关 键 词: | 耐高温α-淀粉酶基因 启动子P43 amy启动子 高效表达 |
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