| 一株苯酚降解菌的筛选鉴定及响应面法优化其降解 |
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| 引用本文： | 贺强礼,刘文斌,杨海君,彭晓霞,关向杰,黄水娥. 一株苯酚降解菌的筛选鉴定及响应面法优化其降解[J]. 环境科学学报, 2016, 36(1): 112-123 |
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| 作者姓名： | 贺强礼 刘文斌 杨海君 彭晓霞 关向杰 黄水娥 |
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| 作者单位： | 湖南农业大学植物保护学院, 长沙 410128,湖南农业大学植物保护学院, 长沙 410128,湖南农业大学植物保护学院, 长沙 410128,湖南农业大学植物保护学院, 长沙 410128,湖南农业大学植物保护学院, 长沙 410128,湖南农业大学植物保护学院, 长沙 410128 |
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| 基金项目： | 长沙市科技局成果转化基金项目(No.K1403022-31);湖南省自然科学基金项目(No.2015JJ2079) |
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| 摘 要： | 从某化工厂污水处理车间活性污泥中分离、筛选到一株能以苯酚为唯一碳源和能源生长的菌株YH8.基于形态特征、生理生化特性、BIOLOG细菌自动鉴定系统、16S rDNA和gyrB基因序列同源性分析鉴定菌株YH8,鉴定菌株YH8为Acinetobacter guillouiae.在苯酚浓度低于1200 mg·L-1,温度为26~34℃,pH为7.0~10.0时,菌株YH8培养60 h对苯酚的降解率达70%以上.运用单因素实验初步确定苯酚降解的最适外加碳源和氮源分别为山梨醇和NaNO3,最适温度为30℃,最适初始pH为9.0,最适接种量为5%.为了提高菌株YH8的降解率,首先利用Plackett-Burman实验设计评估并筛选出影响苯酚降解的3个关键因素为初始pH、苯酚浓度、山梨醇浓度.用最陡爬坡实验逼近以上3个因子的最大响应区域,采用Box-Behnken实验设计及响应面法分析,确定其最优降解条件为初始pH 9.26、苯酚浓度1163.63 mg·L-1、山梨醇浓度7.81%、接种量5%、NaNO_3浓度2%、温度30℃、培养时间96 h,在此条件下苯酚降解率可达98.95%.苯酚降解酶活性及酶定域实验表明,菌株YH8相关降解酶为胞内酶,且苯酚可诱导苯酚羟化酶(LmPH)和邻苯二酚1,2-双加氧酶(C_(12)O)的合成.通过降解酶特异性引物从菌株YH8扩增得到LmPH和C12O基因片段,经质粒检测和消除实验发现菌株YH8相关降解基因位于质粒上.此外,菌株YH8能耐受高浓度NaCl和多种重金属离子,对多种抗生素具有抗性.
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| 关 键 词： | 苯酚 Acinetobacter guillouiae YH8 响应面法 gyrB 邻苯二酚1,2-双加氧酶 质粒 |
| 收稿时间： | 2015-02-08 |
| 修稿时间： | 2015-04-01 |
Isolation, identification of a phenol-degradaing strain and optimization for phenol degradation using response surface methodology |
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| HE Qiangli,LIU Wenbin,YANG Haijun,PENG Xiaoxi,GUAN Xiangjie and HUANG Shui''e. Isolation, identification of a phenol-degradaing strain and optimization for phenol degradation using response surface methodology[J]. Acta Scientiae Circumstantiae, 2016, 36(1): 112-123 |
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| Authors: | HE Qiangli LIU Wenbin YANG Haijun PENG Xiaoxi GUAN Xiangjie HUANG Shui''e |
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| Affiliation: | College of Plant Protection, Hunan Agricultural University, Changsha 410128,College of Plant Protection, Hunan Agricultural University, Changsha 410128,College of Plant Protection, Hunan Agricultural University, Changsha 410128,College of Plant Protection, Hunan Agricultural University, Changsha 410128,College of Plant Protection, Hunan Agricultural University, Changsha 410128 and College of Plant Protection, Hunan Agricultural University, Changsha 410128 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | phenol Acinetobacter guillouiae YH8 response surface methodology gyrB catechol 1,2-dioxygenase plasmid |
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