青稞β—1,3—葡聚糖酶Ⅱ基因启动子的克隆分析及表达载体的构建 |
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作者姓名: | 曾宇 苗琛 唐琳 徐莺 王胜华 陈放 |
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作者单位: | 曾宇(四川大学生命科学学院,成都,610064) 苗琛(四川大学生命科学学院,成都,610064) 唐琳(四川大学生命科学学院,成都,610064) 徐莺(四川大学生命科学学院,成都,610064) 王胜华(四川大学生命科学学院,成都,610064) 陈放(四川大学生命科学学院,成都,610064) |
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基金项目: | 国家基础性工作专项基金、教育部高等学校骨干教师资助计划资助项目 |
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摘 要: | 根据本实验室克隆并公布的藏青稞β—1,3—葡聚糖酶Ⅱ(BGH Ⅱ)基因序列,以藏青稞QB09基因组DNA为模板,构建DNA步移文库,并通过步移技术克隆出BGH Ⅱ起始密码子上游调控序列BGHP.鉴定和分析表明,BGHP具备大多数高等植物启动子的保守元件,预测它对BGHⅡ基因的表达具有一定的作用.为鉴定BGHⅡ基因的基本启动子元件,将基因5′侧翼序列做缺失片段分析,利用PCR方法从BGHP中得到3个不同大小两端带有Hind Ⅲ、BamH I酶切位点的片段BGHP1、BGHP2和BGHP3,定向插人载体pMGFP4(pBI221改建,报告基因为GFP)中,取代原有的CaMV35S启动子,构建了由驱动报告基因GFP的植物表达载体BGHPVl、BGHPV2和BGHPV3,用于大麦的遗传转化,为进一步研究其功能奠定了基础.图5表1参15
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关 键 词: | 青稞 β-1 3-葡聚糖酶Ⅱ基因 启动子 基因克隆 DNA步移技术 表达载体 基因表达 |
修稿时间: | 2002-12-19 |
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