环状RNA快检方法的建立及在鼻咽癌检测中的应用

环状RNA(circRNA)作为一种潜在的肿瘤标志物，其检测对肿瘤的早期筛查和诊断具有重要意义.为了研究和开发circRNA快检方法，建立circRNA的逆转录实时荧光定量超快速聚合酶链式反应（RT-qVPCR）检测方法，并应用到鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）的相关检测中.基于超快速聚合酶链式反应（VPCR）技术，设计针对hsa-circ-0000284(circHIPK3)的引物和探针，通过优化退火温度、引物和探针浓度等条件，建立一种circRNA的快检方法；以内参基因GAPDH为对照，建立hsa-circ-0000284的相对定量方法；进一步收集鼻咽癌患者和鼻咽部良性病变患者的组织样本，对鼻咽癌和良性增生组织中的hsa-circ-0000284进行相对定量检测.所建立的circRNA RT-qVPCR快检方法只需25 min就能完成检测，重复性好，结果稳定可靠；hsa-circ-0000284在鼻咽癌中的相对表达量为9.67，在良性组织中的表达量为3.75，差异有统计学意义（F=16.380 5,P <0.001）.本研究表明所建立的cir...