摘 要: | 环状RNA(circRNA)作为一种潜在的肿瘤标志物,其检测对肿瘤的早期筛查和诊断具有重要意义.为了研究和开发circRNA快检方法,建立circRNA的逆转录实时荧光定量超快速聚合酶链式反应(RT-qVPCR)检测方法,并应用到鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的相关检测中.基于超快速聚合酶链式反应(VPCR)技术,设计针对hsa-circ-0000284(circHIPK3)的引物和探针,通过优化退火温度、引物和探针浓度等条件,建立一种circRNA的快检方法;以内参基因GAPDH为对照,建立hsa-circ-0000284的相对定量方法;进一步收集鼻咽癌患者和鼻咽部良性病变患者的组织样本,对鼻咽癌和良性增生组织中的hsa-circ-0000284进行相对定量检测.所建立的circRNA RT-qVPCR快检方法只需25 min就能完成检测,重复性好,结果稳定可靠;hsa-circ-0000284在鼻咽癌中的相对表达量为9.67,在良性组织中的表达量为3.75,差异有统计学意义(F=16.380 5,P <0.001).本研究表明所建立的cir...
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