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水传病原微生物PCR-纳米金显色快速检测方法
引用本文:叶成松,张胜华,刘春林,冯琳,张洪武,于鑫.水传病原微生物PCR-纳米金显色快速检测方法[J].环境科学学报,2014,34(8):2163-2168.
作者姓名:叶成松  张胜华  刘春林  冯琳  张洪武  于鑫
作者单位:中国科学院城市环境研究所环境与健康重点实验室, 厦门 361021;中国科学院城市环境研究所环境与健康重点实验室, 厦门 361021;辽宁师范大学化学化工学院, 大连 116029;中国人民大学环境学院, 北京 100872;中国科学院城市环境研究所环境与健康重点实验室, 厦门 361021;中国科学院城市环境研究所环境与健康重点实验室, 厦门 361021
基金项目:国家科技支撑计划(No.2012BAC06B04);国家高科技研究发展计划 (No.2012AA062607);厦门市科技计划项目(No.3502Z20132013)
摘    要:水传病原微生物是腹泻等肠胃疾病发病的主要原因,而发展快速、有效的检测方法对于控制和减少该类微生物的传播风险十分重要.因此,本文研究了PCR反应结合不修饰的纳米金颗粒(Gold nano-particles,AuNPs)显色检测方法的最佳盐浓度、探针含量、PCR反应条件等,并从纳米金制备、病原菌种类、检测特异性等方面进行考核,确定了最优检测条件为:10μL PCR扩增产物混合20 pmol探针,95℃反应5 min,55.5℃反应3 min后,40℃杂交10 min;此时,先后加入90μL实验用纳米金和一定浓度的PBS溶液,室温观察颜色变化.结果发现,纳米金溶液由红色变为紫色或近于无色为阳性结果,对应的吸光度值迁移出530 nm,以此可达到快速检测病原微生物的目的.

关 键 词:纳米金  水传病原微生物  DNA检测  紫外可见光谱  PCR反应
收稿时间:2013/11/5 0:00:00
修稿时间:2013/11/29 0:00:00

Rapid detection of waterborne pathogens using PCR amplification and nanogold visualization
YE Chengsong,ZHANG Shenghu,LIU Chunlin,FENG Lin,ZHANG Hongwu and YU Xin.Rapid detection of waterborne pathogens using PCR amplification and nanogold visualization[J].Acta Scientiae Circumstantiae,2014,34(8):2163-2168.
Authors:YE Chengsong  ZHANG Shenghu  LIU Chunlin  FENG Lin  ZHANG Hongwu and YU Xin
Institution:Key Lab of Urban Environment and Health, Institute of Urban Environment, Chinese Academy of Sciences, Xiamen 361021;Key Lab of Urban Environment and Health, Institute of Urban Environment, Chinese Academy of Sciences, Xiamen 361021;College of Chemistry and Chemical Engineering, Liaoning Normal University, Dalian 116029;School of Environment and Natural Resources, Renmin University of China, Beijing 100872;Key Lab of Urban Environment and Health, Institute of Urban Environment, Chinese Academy of Sciences, Xiamen 361021;Key Lab of Urban Environment and Health, Institute of Urban Environment, Chinese Academy of Sciences, Xiamen 361021
Abstract:
Keywords:nanogold  waterbornoe pathogens  DNA detection  UV-Vis spectra  PCR reaction
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