| 粘红酵母△12-脂肪酸脱氢酶基因的克隆和表达 |
| |
| 引用本文： | 杨晓霞,何仕武,魏云林,林连兵,季秀玲,张琦.粘红酵母△12-脂肪酸脱氢酶基因的克隆和表达[J].应用与环境生物学报,2015(3):421-426. |
| |
| 作者姓名： | 杨晓霞 何仕武 魏云林 林连兵 季秀玲 张琦 |
| |
| 作者单位： | 昆明理工大学生命科学与技术学院 |
| |
| 摘 要： | Δ12-脂肪酸脱氢酶一般特异性催化在油酸的Δ12位引入双键转变成亚油酸.为了从粘红酵母YM25079中克隆全长Δ12-脂肪酸脱氢酶基因序列,参考已知的Δ12-脂肪酸脱氢酶基因序列设计基因特异性引物,通过PCR扩增获得到全长为1 353 bp的c DNA序列,序列分析结果表明该序列具有一个编码450个氨基酸的完整开放阅读框,所编码蛋白质的大小为50.9×103.与报道的Δ12-脂肪酸脱氢酶一样,推测的氨基酸序列具有膜整合脂肪酸脱氢酶特异性的3个组氨酸保守区,表明该序列为一个新的编码Δ12-脂肪酸脱氢酶的基因.为了验证其功能,把开放阅读框序列亚克隆到表达载体p YES3/CT,构建重组表达载体p YRGD12,并转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INVScl进行表达.脂肪酸气相色谱(GC)分析表明,该序列所编码的蛋白质具有Δ12-脂肪酸脱氢酶活性,能将油酸转化为亚油酸,亚油酸的含量占酵母总脂肪酸的4.31%.以上结果表明,PCR所获得序列是新的Δ12-脂肪酸脱氢酶基因.
|
| 关 键 词： | 粘红酵母 Δ12-脂肪酸脱氢酶 亚油酸 克隆和表达 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
