| 摘 要： | 构建含有核呼吸因子1(NRF1)cDNA全长的质粒NRF1-pcDNA3.1,用该质粒转染H9C2細胞,探讨NRF1在NaHSO_3诱导心肌细胞线粒体损伤中的作用.用空质粒或NRF1-pcDNA3.1转染H9C2细胞,100pmol/L的NaHSO_3处理转染后的H9C2心肌细胞24h后,首先采用Western blot免疫印迹法检测H9C2心肌细胞中NRF1和线粒体转录因子A(TFAM)蛋白的表达情况.其次,采用化学发光法检测細胞中ATP含量,考察NRF1对NaHSO_3诱导H9C2心肌细胞线粒体损伤的影响.结果表明,与未染毒组相比,空质粒转染组NaHSO_3染毒24h后,NRF1和TFAM蛋白的表达及ATP含量均降低;而NRF1-pcDNA3.1转染显著上调了NRF1和TFAM蛋白表达和细胞内ATP含量;NRF1-pcDNA3.1转染的H9C2细胞经过NaHSO_3染毒24h后,与空质粒转染后NaHSO_3染毒组相比,NRF1和TFAM的蛋白表达及ATP含量均极显著上升.甶此说明:NaHSO_3可降低H9C2细胞中NRF1和TFAM表达及ATP含量.NRF1的高表达可通过调控下游基因TFAM的表达进而増加細胞内ATP的产生,并且NRF1的高表达可使暴露于NaHSO_3所引起的线粒体功能异常得到缓解,掲示NRF1在调节NaHSO_3诱导的线粒体损伤过程中有重要意义.
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