| 1株对叔丁基邻苯二酚降解菌的筛选鉴定及响应面法优化其降解 |
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| 引用本文： | 贺强礼,刘文斌,杨海君,彭晓霞,关向杰,黄水娥.1株对叔丁基邻苯二酚降解菌的筛选鉴定及响应面法优化其降解[J].环境科学,2015,36(7):2695-2706. |
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| 作者姓名： | 贺强礼 刘文斌 杨海君 彭晓霞 关向杰 黄水娥 |
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| 作者单位： | 湖南农业大学植物保护学院,长沙,410128 |
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| 基金项目： | 长沙市科技局成果转化基金项目(K1403022-31);湖南省自然科学基金项目(2015JJ2079) |
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| 摘 要： | 从某化工厂污水处理车间活性污泥中分离、筛选到1株能以对叔丁基邻苯二酚(p-tert-Butylcatechol,TBC)为唯一碳源和能源生长的菌株YH1.经形态特征、生理生化、BIOLOG细菌自动鉴定系统和16S r DNA序列分析,鉴定菌株YH1为皱纹假单胞菌(Pseudomonas corrugate).在温度为24~36℃,p H为7.0~10.0的条件下,菌株YH1可使浓度低于500 mg·L-1的TBC降解率达到82%以上.运用单因素实验初步确定TBC降解的最适外加碳源和氮源分别为蔗糖和胰蛋白胨,最适温度为30℃,最适初始p H为7.0,最适接种量为2%.为了提高降解率,首先利用Plackett-Burman实验设计评估并筛选出影响TBC降解的3个关键因素:蔗糖、胰蛋白胨、初始p H.用最陡爬坡实验逼近以上3个因子的最大响应区域,采用Box-Behnken实验设计及响应面法分析,确定其最优降解条件为蔗糖浓度3%(ρ)、胰蛋白胨浓度1.44%(ρ)、TBC浓度400 mg·L-1、初始p H值8.12、接种量2.97%(φ)、温度30℃、培养时间96 h,在此条件下TBC降解率可达98.21%.TBC降解酶活性及酶定域实验表明,菌株YH1相关降解酶为胞内酶,且TBC可诱导邻苯二酚1,2双加氧酶(C12O)的合成.通过降解酶特异性引物从菌株YH1扩增得到C12O基因片段,经质粒检测和消除实验发现菌株YH1相关降解基因位于质粒上.此外,菌株YH1能耐受高浓度Na Cl和多种重金属离子,对多种抗生素具有抗性.研究结果为有效处理复杂工业废水提供了理论基础.
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| 关 键 词： | 对叔丁基邻苯二酚(TBC) Pseudomonas corrugate YH1 响应面法 邻苯二酚 1 2 双加氧酶 质粒 |
| 收稿时间： | 2014/12/21 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2015/1/27 0:00:00 |
Isolation, Identification of a p-tert-Butylcatechol-Degradaing Strains and Optimization for Its Degradation by Response Surface Methodology |
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| HE Qiang-li,LIU Wen-bin,YANG Hai-jun,PENG Xiao-xi,GUAN Xiang-jie and HUANG Shui-e.Isolation, Identification of a p-tert-Butylcatechol-Degradaing Strains and Optimization for Its Degradation by Response Surface Methodology[J].Chinese Journal of Environmental Science,2015,36(7):2695-2706. |
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| Authors: | HE Qiang-li LIU Wen-bin YANG Hai-jun PENG Xiao-xi GUAN Xiang-jie and HUANG Shui-e |
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| Institution: | College of Plant Protection, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China;College of Plant Protection, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China;College of Plant Protection, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China;College of Plant Protection, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China;College of Plant Protection, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China;College of Plant Protection, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | p-tert-Butylcatechol (TBC) Pseudomonas corrugate YH1 response surface methodology catechol 1 2-dioxygenase plasmid |
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