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绵农小麦种子巯基蛋白酶抑制剂的纯化及性质研究
引用本文:曾仲奎 于源. 绵农小麦种子巯基蛋白酶抑制剂的纯化及性质研究[J]. 应用与环境生物学报, 1997, 3(2): 140-147
作者姓名:曾仲奎 于源
摘    要:绵农11号小麦种子磨粉后的胚和麸皮,经溶液浸取和硫酸铵分级沉淀获得巯基蛋白酶抑制剂(CPI)粗品,再经木瓜蛋白酶-Sepharose4B亲和层析,DEAE-Sepharose离子交换层析和SephadexG-100分子筛层析,可获得两种CPI.通过SDS-PAGE或凝胶过滤法测得其Mr分别为18800[简称CPI(H)]和10500[简称CPI(L)].它们在PAGE,SDS-PAGE和HPLC上均为单一蛋白带.CPI(L)和CPI(H)对木瓜白酶的抑制活性(ID50)分别为7.8×10-6mol/L和3.40×10-6mol/L.对无花果蛋白酶的抑制活性分别为9.5×10-5mol/L和5.8×10-6mol/L;CPI(H)对菠萝蛋白酶有弱抑制作用,但CPI(L)则无抑制作用;无论是CPI(L)或CPI(H)对胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和胃蛋白酶均无抑制作用.CPI(H)的N-末端为Ile.CPI(H)和CPI(L)在pH2.0~11.0范围内和90℃处理5min,两种CPI的抑制活性均无变化;CPI(H)和CPI(L)对木爪蛋白酶的抑制曲线经Dixon作图法,得出CPI(H)为反竞争性抑制类型,而CPI(L)为竞争性抑制类型,其Ki值为8.32×10-6mol/L.

关 键 词:巯基蛋白酶抑制剂  小麦巯基蛋白酶抑制剂  小麦巯基蛋白酶抑制剂的性质

PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF THE CYSTEINE PROTEINASE INHIBITOR FROM MIANNONG WHEAT SEED
Abstract:
Keywords:cysteine proteinase inhibitor  purification of cysteine proteinase inhibitor  characterization of cysteine proteinase inhibitor
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