含发光酶基因的转座子质粒载体的改造及向根瘤菌HN01的转座 |
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引用本文: | 莫才清,周俊初.含发光酶基因的转座子质粒载体的改造及向根瘤菌HN01的转座[J].应用与环境生物学报,1997,3(3):252-257. |
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作者姓名: | 莫才清 周俊初 |
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基金项目: | 国家“863”项目,国家自然科学基金 |
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摘 要: | 将从自杀性重组质粒pDB30上分离的3.6kb含卡那霉素抗性基因和发光酶基因(luxAB)的BglⅡ酶切片段,克隆到小Mr的高拷贝质粒pIJ2925上,构成新的质粒,pHNLX1011;然后将pHNLX1011经BglⅡ部分酶切,酶连在含蔗糖酶基因(sacB)的自杀性重组质粒载体pMH1701上,载体分别采用BglⅡ酶切和BamHⅠ酶切.连接转化后共得到4种重组质粒类型的菌株,它们具有不同发光活性;将它们分别与快生型大豆根瘤菌HN01进行三亲本杂交,发现它们的转座频率均较pDB30高.对经转座标记后的根瘤菌进行发光活性检测,只有pHNC3质粒所转座的根瘤菌浇具有较强发光活性.所得发光根瘤菌衍生菌株能在野大豆和栽培大豆黑农39根际形成正常根瘤,能用X光片记录下根瘤的发光活性.
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关 键 词: | 发光酶基因 大豆根瘤菌 标记根瘤菌 |
DEVELOPMENT OF A SUICIDE PLASMID CONTAINING luxAB GENES AND ITS TRANSLOCATION TO RHIZOBIUM FREDII HN01 |
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Abstract: | |
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Keywords: | luxAB gene Rhizobium fredii mark rhizobia |
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