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人载脂蛋白A5基因的克隆、表达、纯化及多克隆抗体制备
引用本文:任东升,官家发,李德华,梁波,吴洽庆. 人载脂蛋白A5基因的克隆、表达、纯化及多克隆抗体制备[J]. 应用与环境生物学报, 2009, 15(1). DOI: 10.3724/SP.J.1145.2009.00095
作者姓名:任东升  官家发  李德华  梁波  吴洽庆
作者单位:1. 中国科学院成都生物研究所,成都,610041;中国科学院研究生院北京100049
2. 中国科学院成都生物研究所,成都,610041
3. 成都地奥制药集团有限公司,成都,610041
4. 中国科学院成都生物研究所,成都,610041;成都地奥制药集团有限公司,成都,610041
摘    要:人载脂蛋白A5(ApoA5)是血浆三酰甘油水平的重要决定因素之一,与心血管疾病密切相关,因此获得高纯度的载脂蛋白A5及其抗体具有重要的意义.本文利用PCR技术,从人肝癌细胞系7721的cDNA中扩增出ApoA5基因,并克隆到pThioHisD载体中导入大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中进行表达.经优化条件,发酵得到高效表达的融合蛋白,利用融合蛋白上的一段组氨酸序列,用镍离子亲和柱进行纯化,得到纯度大于95%的融合蛋白.使用纯化蛋白免疫新西兰大耳兔,得到多克隆抗体,Western印迹结果显示此多克隆抗体能与ApoA5特异性结合.图6参28

关 键 词:载脂蛋白A5  原核表达  发酵  纯化  抗体

Cloning, Expression, Purification and Polyclonal Antibody Preparation of Human Apolipoprotein A5
REN Dongsheng,GUAN Jiafa,LI Dehua,LIANG Bo,WU Qiaqing. Cloning, Expression, Purification and Polyclonal Antibody Preparation of Human Apolipoprotein A5[J]. Chinese Journal of Applied and Environmental Biology, 2009, 15(1). DOI: 10.3724/SP.J.1145.2009.00095
Authors:REN Dongsheng  GUAN Jiafa  LI Dehua  LIANG Bo  WU Qiaqing
Abstract:
Keywords:
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