| 直接竞争ELISA检测拟柱孢藻毒素的方法建立和评价 |
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| 引用本文： | 杨丹,刘金平,赖淑燕,肖利娟,雷腊梅.直接竞争ELISA检测拟柱孢藻毒素的方法建立和评价[J].中国环境科学,2023(10):5543-5549. |
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| 作者姓名： | 杨丹 刘金平 赖淑燕 肖利娟 雷腊梅 |
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| 作者单位： | 暨南大学生态学系 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金项目(2023A1515012361)；;国基自然科学基金项目(31770507)； |
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| 摘 要： | 拟柱孢藻毒素(CYN)对人和动物具有高毒性而在世界上广受关注,快速检测方法的建立可为蓝藻毒素的风险评估提供有效的技术手段.本研究基于前期制备的CYN的单克隆抗体N8,旨在建立一种CYN的快速免疫检测方法-直接竞争ELISA.在对HRP-CYN酶标记物和N8单抗的稀释度进行优化后,最适反应条件下建立的直接竞争ELISA在0～200ng/mL CYN浓度下呈现典型的S型反应曲线,该方法的灵敏度为0.069ng/mL,经logit-log拟合的线性范围为0.1～10ng/mL,检出限远低于WHO建议的0.7ng/mL CYN的安全限值.本研究建立的ELISA方法对水库水样和小球藻稀释液中加标回收率分别为80.44%～125.4%和52.97%～155.19%,在测定CYN时与商业Beacon试剂盒的检测结果高度一致.对大沙河水库中CYN的监测表明该毒素在水体中常年存在,但未超过WHO建议的安全限值.本研究发展的ELISA可实现水样和藻样中CYN的快速检测,为供水安全保障提供一种新的技术手段.
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| 关 键 词： | 直接竞争ELISA 拟柱孢藻毒素 单克隆抗体 HRP-CYN连接物 加标回收率 |
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