| 地衣芽孢杆菌2709和 6816碱性蛋白酶基因在大肠杆菌中的克隆、表达及序列分析 |
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| 引用本文： | 唐雪明,邵蔚蓝,沈微,王正祥,方惠英,诸葛健.地衣芽孢杆菌2709和 6816碱性蛋白酶基因在大肠杆菌中的克隆、表达及序列分析[J].应用与环境生物学报,2002,8(2):209-214. |
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| 作者姓名： | 唐雪明 邵蔚蓝 沈微 王正祥 方惠英 诸葛健 |
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| 作者单位： | 江南大学教育部工业生物技术重点实验室,无锡,214036 |
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| 基金项目： | 教育部高等学校骨干教师资助项目，江南大学太湖学者专项基金资助~~ |
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| 摘 要： | 用PCR方法从地衣芽孢杆菌 2 70 9和 6 816中扩增了碱性蛋白酶基因 (apr1和apr2 ) ,扩增的DNA片段插入到大肠杆菌载体 pET -2 8a中 ,构建成重组分泌型表达载体pAPR1、pAPR2 .pAPR1、pAPR2中碱性蛋白酶基因在大肠杆菌宿主JM 10 9(DE3)中得到表达 .SDS -PAGE分析显示融合表达产物的分子量均为 30 .5× 10 3 ,同核酸序列测定所推导的值相符 .表达产物分别占细胞总蛋白的 8.0 %和 7.5 % .2 70 9重组菌所得酶活为 12 10u/mL ,6 816重组菌所得酶活为 1175u/mL .研究发现 ,重组的碱性蛋白酶在进入大肠杆菌周质空间时可能存在前肽自动脱落的现象 .同时 ,对地衣芽孢杆菌 2 70 9碱性蛋白酶基因序列进行了测定和比较分析 ,发现与地衣芽孢杆菌 6 816碱性蛋白酶基因的同源性为 98% .图 5参 11
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| 关 键 词： | 地衣芽孢杆菌 2709 6816 碱性蛋白酶基因 大肠杆菌 克隆 表达 序列分析 |
| 修稿时间： | 2001年6月19日 |
CLONING, EXPRESSION AND SEQUENCE ANALYSIS OF THE GENE ENCODING ALKALINE PROTEASE FROM BACILLUS LICHENIFORMIS 2709 AND 6816 IN E.COLI |
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| TANG Xueming ,SHAO Weilan,SHEN Wei,WANG Zhengxiang,FANG Huiying & ZHUGE Jian.CLONING, EXPRESSION AND SEQUENCE ANALYSIS OF THE GENE ENCODING ALKALINE PROTEASE FROM BACILLUS LICHENIFORMIS 2709 AND 6816 IN E.COLI[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2002,8(2):209-214. |
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| Authors: | TANG Xueming SHAO Weilan SHEN Wei WANG Zhengxiang FANG Huiying & ZHUGE Jian |
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| Institution: | TANG Xueming **,SHAO Weilan,SHEN Wei,WANG Zhengxiang,FANG Huiying & ZHUGE Jian |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bacillus licheniformis alkaline protease gene cloning and expression sequence analysis E coli |
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