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Tet抗性铜绿假单胞菌接合转移pHN102方法研究
引用本文:李闻,谢波,张伟,张伟尉,马静,刘红艳,黄正. Tet抗性铜绿假单胞菌接合转移pHN102方法研究[J]. 应用与环境生物学报, 2007, 13(1): 93-96
作者姓名:李闻  谢波  张伟  张伟尉  马静  刘红艳  黄正
作者单位:1. 华中科技大学同济医学院公共卫生学院/环境与健康教育部重点实验室,武汉,430030
2. 华中农业大学/农业部农业微生物重点实验室,武汉,430070
摘    要:二亲本杂交实验通常要求受体菌不能携带有与质粒上相同的抗性.本次实验中受体菌铜绿假单胞菌(Pseudo-monas aeruginosa)和重组质粒pHN102都带有四环素(Tc)抗性.考虑到质粒pHN102导入受体菌后至少带有两个Tc抗性基因片段,转移接合子的抗性会增强,所以提高四环素浓度至20μg/mL,并利用pHN102上携带的luxAB发光酶基因标记受体菌筛选转移接合子,并设立对照菌株.通过抽提质粒、琼脂糖凝胶电泳检测,确定pHN102成功转入P.aeruginosa中.转移接合子经4次转接后,质粒仍可以稳定存在且能够稳定表达.P.aeruginosa(pHN102)的发光动力学曲线表明,加入底物20min后,发光强度趋于稳定.经液体培养稀释后进行发光度和活菌数测定,发现二者呈显著的线性关系(r=0.994).图4表2参6

关 键 词:铜绿假单胞菌  二亲本杂交  发光
收稿时间:2006-03-23
修稿时间:2006-07-17

Conjugal Transfer of pHN102 into Tetracyline Resistant Pseudomonas aeruginosa
LI Wen,XIE Bo,ZHANG Wei,ZHANG Weiwei,MA Jing,LIU Hongyan,HUANG Zheng. Conjugal Transfer of pHN102 into Tetracyline Resistant Pseudomonas aeruginosa[J]. Chinese Journal of Applied and Environmental Biology, 2007, 13(1): 93-96
Authors:LI Wen  XIE Bo  ZHANG Wei  ZHANG Weiwei  MA Jing  LIU Hongyan  HUANG Zheng
Abstract:
Keywords:luxAB
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