| 大肠杆菌磷酸果糖激酶基因在氧化硫硫杆菌Tt-7中的表达 |
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| 引用本文： | 田克立,林建群,刘相梅,刘缨,张长铠,颜望明.大肠杆菌磷酸果糖激酶基因在氧化硫硫杆菌Tt-7中的表达[J].应用与环境生物学报,2004,10(1):108-112. |
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| 作者姓名： | 田克立 林建群 刘相梅 刘缨 张长铠 颜望明 |
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| 作者单位： | 山东大学微生物技术国家重点实验室,济南,250100 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (NO .30 1 70 0 2 6)，教育部重点基金资助项目 (NO .991 81 )~~ |
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| 摘 要： | 专性自养极端嗜酸性氧化硫硫杆菌缺乏EMP、ED途径以及三羧酸循环的关键酶 (如磷酸果糖激酶等 ) ,不能氧化有机物获得能量 .本文利用PCR技术扩增E .coliK 12磷酸果糖激酶 1基因 (pfkA) ,将该基因与广泛寄主的IncQ质粒pJRD2 15连接构建重组质粒pSDK 1,该质粒可与pfk基因缺陷株E .coliDF10 10互补 .通过接合转移的方式将其导入氧化硫硫杆菌Tt 7中并得到表达 .pSDK 1在宿主Tt 7中有较好的稳定性 ,在无选择压力条件下连续传 5 0代仍可保留 75 % .酶活性测定表明 ,pSDK 1的pfkA基因在缺陷株E .coliDF10 10中表达水平〔(96 .6± 0 .6 6 )U/g蛋白〕略高于原始菌株E .coliK 12〔(85 .9± 1.12 )U/g蛋白〕 ;而在氧化硫硫杆菌中则以较低水平进行表达〔(12 .4± 0 .73)U/g蛋白〕 ,并且其表达水平不受培养基中葡萄糖的影响 .实验表明 ,在无机盐培养基中加入葡萄糖时 ,含质粒pSDK 1的氧化硫硫杆菌Tt 7可利用培养基中的葡萄糖而加快生长 ,而对照菌株的生长则未受明显影响 ;但是重组菌利用葡萄糖的速度较缓慢 .图 5表 2参 16
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| 关 键 词： | 氧化硫硫杆菌 磷酸果糖激酶 接合转移 表达 |
| 修稿时间： | 2002年12月9日 |
EXPRESSION OF PHOSPHOFRUCTOKINASE-1 GENE FROM E.COLI K-12 IN OBLIGATELY AUTOTROPHIC BACTERIUM THIOBACILLUS THIOOXIDANS |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Thiobacillus thiooxidans phosphofructokinase conjugation expression |
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