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利用TAIL-PCR和RT-PCR技术克隆云芝植酸酶基因
引用本文:杨帆,林俊芳,苗灵凤,郭丽琼.利用TAIL-PCR和RT-PCR技术克隆云芝植酸酶基因[J].应用与环境生物学报,2006,12(5):618-622.
作者姓名:杨帆  林俊芳  苗灵凤  郭丽琼
作者单位:1. 中国热带农业科学院热带作物生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室,海口,571101;中国科学院成都生物研究所,成都,610041
2. 中国热带农业科学院热带作物生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室,海口,571101;华南农业大学食品学院生物工程系,广州,510640
3. 右江民族医学院,广西,百色,533000
基金项目:国家自然科学基金;广东省自然科学基金;华南农业大学校科研和教改项目
摘    要:从采绒革盖菌(Coriolus versicolor,常被称为杂色云芝)中筛选到产植酸酶基因.根据植酸酶基因的保守序列设计引物P1、P2,从云芝中分离克隆植酸酶基因的片段.再在分离到的已知序列的5′端和3′端设计嵌套的特异引物SP1、SP2、SP3和SP1′、SP2′、SP3′,利用TAIL-PCR技术进行分离已知序列的侧翼序列.结合Blastn、ORF和Primer5.0软件,在侧翼序列上设计特异引物P3、P4,最终从云芝中分离克隆到全长的植酸酶基因B4.再在B4序列的基础上设计引物phyP rt1、phyP rt2,利用这两个引物通过RT-PCR技术从云芝中克隆到全长的植酸酶基因B5.通过分析,分离克隆到的植酸酶基因可能是新的基因.图4参12

关 键 词:云芝  植酸酶  TAIL-PCR  RT-PCR
收稿时间:2005-09-12
修稿时间:2005-11-03

Cloning of Phytase Gene from Coriolus versicolor by TAIL-PCR and RT-PCR
YANG Fan,LIN Junfang,MIAO Lingfeng,GUO Liqiong.Cloning of Phytase Gene from Coriolus versicolor by TAIL-PCR and RT-PCR[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2006,12(5):618-622.
Authors:YANG Fan  LIN Junfang  MIAO Lingfeng  GUO Liqiong
Institution:1.State Key Laboratory of Biotechnology of Tropical Crops, Institue of Tropical Bioscienee and Biotechnology, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou 571101, China;2 Department of Biotechonolgy, College of Food Science, South China Agriculture University, Guangzhou 510640, China;3 youjiang Medical College for Nationalities, Baise 533000, Guangxi, China;4Chengdu Institute of Biology, Chinese Academy of Sciences, Chengdu 610041, China
Abstract:
Keywords:Coriolus versicolor  phytase  TAIL-PCR  RT-PCR  
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