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gsh1基因的克隆及其在巴斯德毕赤氏酵母中的表达
引用本文:饶志明,艾丽静,沈微,方慧英,诸葛健.gsh1基因的克隆及其在巴斯德毕赤氏酵母中的表达[J].应用与环境生物学报,2007,13(2):257-260.
作者姓名:饶志明  艾丽静  沈微  方慧英  诸葛健
作者单位:1. 江南大学工业微生物中心和工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡,214036
2. 江南大学工业微生物中心和工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡,214036;齐鲁制药有限公司,济南,250100
基金项目:国家自然科学基金;江苏省青年科技创新人才(学术带头人)基金;教育部长江学者和创新团队发展计划;教育部重点实验室基金
摘    要:利用PCR技术克隆了来源于Saccharomyces cerevisiae ALJ036的γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸合成酶(γ-glutamyl-cysteine synthetase)编码基因gsh1,连接多拷贝表达载体pGAPZA,转化Pichia pastorisx-33,构建了重组菌P.pastorisx-33(pGAPZA-gsh1);在高浓度Zeocin平板上筛选多拷贝阳性转化子,并通过PCR进行了验证.对阳性转化子的γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸合成酶酶活力进行了测定,结果显示,重组酵母的γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸合成酶的酶活是宿主菌的3.0倍,在液体YEPD中重组菌GSH的产量为42.2mg/L,是宿主菌的1.6倍.图7表1参10

关 键 词:巴斯德毕赤氏酵母  克隆  表达
收稿时间:2006-06-13
修稿时间:2006-09-29

Cloning and Expressing of gsh 1 gene in Pichia pastoris
RAO Zhiming,AI Lijing,SHEN Wei,FANG Huiying,ZHUGE Jian.Cloning and Expressing of gsh 1 gene in Pichia pastoris[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2007,13(2):257-260.
Authors:RAO Zhiming  AI Lijing  SHEN Wei  FANG Huiying  ZHUGE Jian
Abstract:
Keywords:gsh1
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