共生细菌SB_1降解聚乙烯醇的研究Ⅱ.共生细菌SB_1聚乙烯醇氧化酶的产生、纯 |
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引用本文: | 陈明洁,王银善.共生细菌SB_1降解聚乙烯醇的研究Ⅱ.共生细菌SB_1聚乙烯醇氧化酶的产生、纯[J].环境科学学报,1995(2). |
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作者姓名: | 陈明洁 王银善 |
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作者单位: | 中国科学院武汉病毒研究所 |
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摘 要: | 共生细菌SB_1接种在0.3%聚乙烯醇(PVA)培养基中,30℃摇床振荡培养(500mL三角瓶)或发酵罐(1000L)通气培养时,PVA氧化酶产生的高峰在48h或40h.离心收集的上清液采用40%-50%饱和度的硫酸铵分级沉淀DEAE-Sephadex离子交换柱和Cibacron蓝-Sepharose4B亲和柱层析等纯化步骤,PVA氧化酶收得率30%,比活力提高31倍,该酶经凝胶电泳后,用硝基四氮唑蓝进行活性染色,呈现四条谱带,PVA氧化酶与PVA作用,可释放H_2O_2,同时伴随着粘度降低,PVA氧化酶反应的最适pH为7.0,最适温度为40℃,该酶置-5℃贮存较稳定,贮存500天,其活力仍保留近50%,在所测试的金属离子和化学试剂中,Pb ̄(2+)和水杨酸可使PVA氧化酶活力完全丧失。而Ba ̄(2+)与NaN_3则对酶活力有较强的激活作用。
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关 键 词: | 共生细菌 聚乙烯醇 氧化酶 |
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