微生物絮凝剂ZS-7的纯化及其结构特征研究

采用透析、乙醇沉淀、凝胶过滤层析对微生物絮凝剂ZS-7进行了纯化.经鉴定纯化后的微生物絮凝剂ZS-7是一种新型的糖蛋白,其产量大约为0.98 g/L发酵液.ZS-7主要由多糖和蛋白质组成,含量分别为91.5%和8.4%.进一步的分析表明ZS-7中含有酸性多糖包括糖醛酸(16.4%)、丙酮酸(7.1%)和乙酸(0.5%).采用凝胶色谱法测得ZS-7的相对分子质量为6.89×104.红外光谱、X射线能谱图和核磁共振图谱说明糖蛋白絮凝剂ZS-7含有羟基、氨基、羧基、甲氧基和磺酸等功能性基团.单糖组成分析说明ZS-7主要由鼠李糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,各单糖的摩尔比大致为:半乳糖∶葡萄糖∶甘露糖∶鼠李糖=142∶2.2∶4.5∶3.4.     

嗜油菌NY3对蜡质油污泥无害化处理

蜡质油污泥(WOS)成分复杂,含大量老化原油、蜡质油、沥青质及其他化学药剂,属危险性固体废弃物,大量排放已成为石化企业可持续发展的障碍.研究利用铜绿假单胞菌NY3处理高浓度WOS的条件,结果表明,WOS∶木屑(m/m)(d =0.30 mm) 7∶1并结合热熔分散为最佳油污泥预处理条件;液相降解体系含油量为24.5 g/L时,6d内,油泥中C20以下的正构烷烃完全被去除,C21～C34和C35～C38大分子量正构烷烃去除率分别在91％ ～99％和78％ ～ 89％之间.添加鼠李糖脂能明显提高长链烃和多环芳烃的降解率.6d内210 mg/L鼠李糖脂使C29 ～ C38的降解率提高17.27％ ～36.65％,芘、菲分别提高13.67％和16.12％.添加葡萄糖和Fe2+的条件下,NY3菌可将油污泥转化成为糖蛋白,产量达28 g/L.     

岩豆凝集素的纯化及其分子残基的化学修饰和活性关系

岩豆种子经侵取、硫酸铵分级、ＤＥＡＥ－纤维素离子交换和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００分子筛层析，获得ＦＰＬＣ上单一的凝集素样品，对此纯化的凝集素样品用Ｎ－溴代丁二酰亚胺、Ｎ－乙基顺丁烯二酰亚胺、二流苏糖醇，碘乙酸和对氯汞苯甲酸修饰其分子内的色氨酸和巯基．经计算，该凝集素分子内含有４个色氨酸和２４个流基，当色氨酸被修饰后其凝集活性全部丧失，而巯基被修饰后对其凝血活性无任何影响，表明巯基与凝集素分子的凝血活性无关，而色氨酸则是凝集活性所必需的基团．     

苦马豆素致糖基转移酶活性改变对小鼠生殖激素分泌的影响

苦马豆素是疯草主要有毒成分,抑制α-甘露糖苷酶的活性,引起N-聚糖加工过程失调。笔者课题组前期研究得出:苦马豆素致糖蛋白激素(促卵泡素和促黄体素)糖基化位点上糖链结构发生改变,引起促性腺激素功能发生改变。而苦马豆素中毒对家畜生殖激素分泌的调节机制尚不明确。苦马豆素腹腔注射对小鼠进行染毒,收集妊娠期和分娩期小鼠的血液、子宫和卵巢组织,检测糖基转移酶活性、生殖激素水平及其受体mRNA和类固醇限速酶蛋白质表达量。结果表明:在妊娠和分娩期,苦马豆素致子宫内膜固有层大量低聚糖蓄积,显著抑制N-聚糖加工过程关键糖基转移酶的活性(P0.05);染毒组小鼠血液的生殖激素包括促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、雌激素(E2)和孕酮(P4)水平显著低于对照组(P0.05)。在整个妊娠周期,染毒组小鼠4种激素受体mRNA的表达量显著低于对照组(P0.05)。在妊娠后期,染毒组小鼠3-β羟基类固醇脱氢酶(3-βHSD)和芳香化酶(CYP19A1)蛋白表达量显著低于对照组(P0.05)。苦马豆素可使N-聚糖加工紊乱,引起促性腺激素分泌降低,进一步降低生殖激素受体和性类固醇激素限速酶的表达量,致使性类固醇激素分泌下降,导致生殖激素分泌紊乱,最终结果造成机体繁殖性能下降。     

虾夷扇贝毒素(yessotoxin)诱导的栉孔扇贝(Chlamys farreri)体内P糖蛋白转运活性及其分布研究

大量研究表明P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)介导的多型异源物质抗性机制(multi-xentiobiotic resistance,MXR)在贝类耐受或抵抗污染水域中有毒有害物质的毒害中具有重要作用,但是该机制在贝类抵抗或耐受食源性毒素方面作用的研究却很少。本研究以栉孔扇贝(Chlamys farreri)为实验动物,向其投喂产虾夷扇贝毒素(yessotoxins,YTXs)的网状原角藻(Protoceratium reticulatum),通过检测栉孔扇贝鳃和消化腺组织中YTX毒素含量随时间的变化情况,结合2种组织中P-gp介导的MXR活性变化及P-gp在组织中的表达和分布,探讨P-gp在扇贝耐受YTX毒素中可能的作用。研究结果表明,随着毒藻暴露时间的延长,栉孔扇贝鳃和消化腺中YTX含量逐渐增加,且具有明显的时间依赖关系。YTX的大量累积虽未导致扇贝死亡,但是仍然对扇贝组织产生不同程度的毒性。苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色发现,染毒12 h后,栉孔扇贝鳃组织前端出现明显黑化,消化腺组织导管上皮细胞部分脱落入管腔中,腺管内细胞界限模糊,部分腺管崩解。罗丹明B(rhodamine B,Rho B)外排实验表明YTX毒素暴露能显著增强栉孔扇贝鳃和消化腺组织中P-gp的转运活性,暴露12 h后鳃和消化腺Rho B的排出速率就已分别达到对照组的3.8倍和1.4倍,随着暴露时间的延长,P-gp活性略有增强,72 h后开始下降;P-gp的功能性抑制剂维拉帕米(verapamil,VRP)在实验设定的浓度下没有抑制反而增强了Rho B的外排;免疫定位显示,毒素暴露后栉孔扇贝鳃丝前端纤毛柱状细胞及消化腺导管上皮柱状细胞和腺管消化细胞P-gp免疫阳性信号增强,说明YTX毒素暴露提高了P-gp的表达量。综上推断,YTX毒素可能是P-gp的底物,它能够诱导P-gp转运活性增强,并增加P-gp的表达量来参与扇贝对YTX毒素的耐受或抗性;设定浓度的VRP不能抑制P-gp的活性,这可能是由于种属差异造成的,关于VRP对栉孔扇贝Pgp的作用还有待进一步的研究。     

DDT、苯并[a]芘暴露对阿部鲻虾虎鱼P糖蛋白mRNA表达的影响

建立了阿部鲻虾虎鱼(Mugilogobius abei)P糖蛋白(P-gp)mRNA荧光定量RT-PCR检测方法,利用该检测方法探讨不同时间、不同浓度DDT和苯并[a]芘(BaP)暴露对阿部鲻虾虎鱼P-gp基因表达的影响。结果显示,该检测方法能在低质量浓度污染物(0.01 mg·L-1DDT、0.005 mg·L-1BaP)暴露下检测到P-gp基因表达量的显著变化(P<0.05)。P-gp基因在正常阿部鲻虾虎鱼肌肉、肝脏、心脏、肠、脑组织中均有表达,在鳃、脾组织中没有检测到表达,DDT和BaP能诱导肝脏和脑中P-gp基因表达量升高。2种污染物暴露5 h均可诱导肝脏表达量的显著变化,随着暴露时间延长,表达量均升高,24 h达到较高表达量。低质量浓度DDT和BaP均能诱导肝脏P-gp基因表达,并呈现良好的剂量-效应关系,而高质量浓度均抑制P-gp的表达。DDT和BaP可影响阿部鲻虾虎鱼肝脏P-gp基因表达,其变化可作为生物标志物,来评价化学污染物对水生动物的生物学效应。     

糖蛋白和寡糖化学进展

本文简要介绍近年来糖蛋白和寡糖化学的进展,包括糖蛋白中寡糖链的分类和寡糖链的结构分析方法,糖蛋白的生物合成和寡糖的化学合成。     

高山植物唐古特红景天粘液细胞及叶肉细胞表面糖蛋白与抗冻性的关系

分布于青海高原海拔4000m高山的唐古特红景天有很强的抗冻能力，其叶片半致死温度可达－26.5℃。在北京地区夏季（7月）驯化20d后，长出新叶片的半致死温度升高为－15.5℃。光镜组织化学切片显示，在唐古特红景天叶片中，特别是维管组织周围，存在多糖、蛋白质或糖蛋白含量丰富的粘粹细胞；高温驯化后长出的新叶片这种粘液细胞明显减小或消失。电镜细胞化学研究揭示，在细胞壁外层及细胞间隙中分布着明显的糖蛋白，在北京地区驯化20d的唐古特红景天叶片中这种糖蛋白明显减少。因此推测，粘液细胞和叶肉细胞表面的糖蛋白层，对唐古特红景天抗冻能力可能起着重要的作用，图版1图2参20。     

身体中少了不行的维生素B12

在维生素这个大家族里,有一种维生素含有金属元素,那就是维生素B₁₂。由于维生素B₁₂含有金属元素钴,所以又被称为钴胺素。维生素B₁₂是一种在1948年被美国和英国学者发现并命名的红色晶体状物质。维生素B₁₂在消化道内的吸收依赖于一种胃黏膜细胞分泌的糖蛋白内因子,当维生素B₁₂从食物中的蛋白质复合体中释放出来,它们会与内因子结合,逐步被人体吸收。     

果胶酶激发子对黄瓜叶片病程相关蛋白及细胞壁物质的影响

以草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)的固态发酵产物———果胶酶粗提液喷雾诱导黄瓜,研究了该激发子对黄瓜细胞内几丁质酶和-β1,3-葡聚糖酶2种病程相关蛋白(PR s蛋白)以及细胞壁物质的影响.结果表明,经激发子处理后,黄瓜叶片中几丁质酶和-β1,3-葡聚糖酶活性诱导升高,木质素及富含羟脯氨酸糖蛋白(HRGP)含量也诱导增强;同时,在激发子处理后接种黑星病菌的黄瓜中,上述2种PR s蛋白及细胞壁物质被大量诱导合成.其中,两种PR s蛋白均在接种后d 4达到最高值,分别为22.72 U/mg(pro)和268.16 U/mg(pro);木质素和HRGP含量在接种后d 3后达最高,分别比对照高196.12%和272.98%.表明果胶酶激发子在接种前期对黄瓜几丁质酶、-β1,3-葡聚糖酶、木质素及HRGP的诱导产生是导致病情降低的内在机制.图4参16