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树状多节孢原生质体的制备和再生 总被引:7,自引:1,他引:6
研究了酶系组成、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂、PH值,培养基成分、培养方式,预处理、保护剂等因素对紫杉醇产生菌树状多孔孢原生质体制备和再生的影响。结果表明:将树状多节孢在PDA液体培养其中静止培养2-3d,离心收集菌体,用PH5.5-6.0的0.7mol/L的NaCl配制成的含有3%纤维素酶、2%蜗牛酶和1%溶菌酶的复合酶,30℃恒温酶解9h,原生质体制备率最高。但是考虑到原生质体的再生,参酶解7h左右为宜,获得的原生质体经过纯化,用0.7mol/LNaCl配制的PDA再生培养基进行双层平板培养法再生,原生质体的再生率最高。本研究为以后通过原生质体诱变、转化、融合构建紫杉醇工程菌株奠定了基础,图3表9参16 相似文献
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