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含发光酶基因的转座子质粒载体的改造及向根瘤菌HN01的转座 总被引:8,自引:2,他引:8
将从自杀性重组质粒pDB30上分离的3.6kb含卡那霉素抗性基因和发光酶基因(luxAB)的BglⅡ酶切片段,克隆到小Mr的高拷贝质粒pIJ2925上,构成新的质粒,pHNLX1011;然后将pHNLX1011经BglⅡ部分酶切,酶连在含蔗糖酶基因(sacB)的自杀性重组质粒载体pMH1701上,载体分别采用BglⅡ酶切和BamHⅠ酶切.连接转化后共得到4种重组质粒类型的菌株,它们具有不同发光活性;将它们分别与快生型大豆根瘤菌HN01进行三亲本杂交,发现它们的转座频率均较pDB30高.对经转座标记后的根瘤菌进行发光活性检测,只有pHNC3质粒所转座的根瘤菌浇具有较强发光活性.所得发光根瘤菌衍生菌株能在野大豆和栽培大豆黑农39根际形成正常根瘤,能用X光片记录下根瘤的发光活性. 相似文献
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从西红柿根圈土壤中分离纯化到一株生物素依赖型菌株bio - 5 ,经测定其内源抗生素抗性和脂肪酸特征 ,初步定名为假单胞菌bio - 5 .这一菌株对生物素非常敏感 .建立了以此菌株用于测定生物素浓度的标准方法 .利用这一方法 ,测定了不同作物叶子中生物素的含量 ,并将这一方法成功用于筛选转stv基因烟草植物 .与传统生物素测定菌株LactobacillusplantarumATCC80 14比较 ,我们所分离的菌株具有易于获得 ,易于培养 ,快速用于生物素浓度测定的特点 .图 7表 2参 2 2 相似文献
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