植物根瘤内痕量Frankia DNA的提取及鉴定

建立了一种简捷、快速植物根瘤内痕量Frankia DNA的提取方法，即采集自然态下根瘤，剥离瘤瓣，取瘤瓣尖经液氮研主民粉末，以20g/L CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）消化胞壁，然后以d=5-10μm的石英粉吸附DNA，再以无菌去离子蒸馏水释放DNA，所获DNA产率及纯度较酚／氯仿法好。经对辽宁沙棘、色赤杨根瘤的瘤内痕量Frankia DNA及体外培养的9种Frankia菌株DNA分纯，并用于酶切及PCR，获满意结果。图3参12     

固氮放线菌Frankia与放线菌根植物共生进化的研究进展

固氮放线菌Frankia是能够诱导大范围的放线菌根植物(actinorhizal plants)产生根瘤放线菌.放线菌根植物是植物受Frankia侵染后能够形成根瘤的植物[1].目前,它们之间的进化研究虽然取得了很大进展,但是仍然存在许多不清楚的东西.本文根据最近对植物和Frankia系统进化研究成果、根瘤中放线菌Frankia的多样性研究情况,综述放线菌根植物和共生Frankia进化的研究进展.     

不同宿主植物根瘤Frankia及其生物学特性

对从木麻黄、杨梅、桤木和胡颓子等宿主植物根瘤中获得的19株分离菌的离体培养形态特征、生理特性和交叉侵染特性等进行了比较分析.结果表明,各分离菌均有Frankia属所特有的分枝状菌丝、孢囊、泡囊或串珠状菌丝等形态结构;细胞壁类型多属胞壁Ⅲ型,生理类型多属B型,无氮诱导培养下都具有同氮酶活性,在BAP、JA或S培养液中菌体生长较好,以吐温-80和酪蛋白水解物为最佳碳、氮源.但不同宿主分离菌的形态和培养特征差异明显,木麻黄属分离菌菌丝较粗,孢囊数量较少,在BAP培养液中多旱荔肉白絮状颗粒沉淀;杨梅属菌丝较细,孢囊数量较多,在BAP培养液中多是浅红色颗粒沉淀;桤木属和胡颓子属的菌体形态特征在BAP培养液中与木麻黄属的相似,但桤木属菌丝较细,胡颓子属的菌丝较粗.根据回接及交叉侵染特性可将分离菌分为2个宿主特异类群:能侵染木麻黄苗木的木麻黄类群;只侵染原宿主并能在杨梅属、胡颓子属和桤木属间相互侵染,但不能使木麻黄属苗木结瘤的杨梅-桤木-胡颓子类群.图2表5参19     

利用rep-PCR研究云南尼泊尔桤木根瘤内Frankia基因多样性

利用rep-PCR指纹技术对云南5个地区的尼泊尔桤木根瘤内Frankia菌基因多样性进行研究,实验发现Frankia菌呈现丰富的基因多样性.所有71个样品被分为11种不同的基因类型.除高黎贡山外,不同地域都有某种基因型占优势,显示Frankia菌基因型与地域有紧密关系.所观察的5个地区中,高黎贡山Frankia菌基因型种类最多,多样性指数最高,基因多样性最为丰富.结合高黎贡山地理资料及其它生物多样性相关研究,推测与高黎贡山尼泊尔桤木共生的Frankia可能作为种储备库,为其它地区的寄主植物提供了祖先菌株.图8表1参13