慢生型花生根瘤菌16S rRNA分析

以２１株分离自四川,云南不同花生产区的慢性型花生根瘤菌和６株参比菌株为材料,进行了１６ＳｒＤＮＡＰＣＲ－ＲＦＬＰ,结果除证实了慢性型花生根瘤菌同慢生型大豆根瘤菌（Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍｊａｐｏｎｉｃｕｍ）高度的遗传相似性外,还发现了一些菌株同Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｉｂｉｕｍｌｉａｏｎｉｎｇｅｎｓｉｓ和Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍｅｌｋａｎｉｉ有较高的遗传相似性,菌株Ｓｐｒ１－２的１６ＳｒＲＮＡ     

花生根瘤菌的生长特性和脂肪酸组成研究(英文)

用73株慢生根瘤菌B．Japonicum、B．elkanii和B．"intermedium"为对照．对22株花生根瘤菌的生长速度、产碱能力和细胞脂肪酸组成进行了测定．结果表明：花生根瘤菌属于慢生根瘤菌属（Bradyrhizobiumsp．arachis）；除花生根瘤菌含有比大豆根瘤菌（B．japonicum）较高的脂肪酸16：1w5c（16个碳原子1个双键的脂肪酸）而外，花生根瘤菌与大豆根疚菌相似，表明了他们在系统发育及进化方向上的一致性．细胞脂肪酸分析法是根瘤菌系统发育研究中一种简便而可信的方法．     

慢生花生根瘤菌的遗传多样性研究

用ＲＥＰ１Ｒ１和ＲＥＰ２１ＤＮＡ为引物，对２２株四川土著慢生花生根瘤菌染色体ＤＮＡ的基因外回文重复序列（ＲｅｐｅｔｉｔｉｖｅＥｘｔｒｏｇｅｎｉｃｐａｌｉｎｄｒｏｍｉｃｓｅｑｕｅｎｃｅＲＥＰ）进行了ＰＣＲ扩增和凝胶电泳，并对电泳结果的指纹图型进行了相似性聚类分析．结果表明了四川土著慢生花生根瘤菌的遗传多样性．指纹图形是根瘤菌多样性研究中一种简便而有效的方法     

南洋楹根瘤菌株分离和应用的研究初报

南洋楹根瘤菌株分离和应用的研究初报潘超美，杨风，李幼菊（广东省土壤研究所，广州５１０６５０）ＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙＳｔｕｄｙｏｎＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＮｏｄｕｌｅＢａｃｔｅｒｉａＳｔｒａｉｎｓｏｆＡｌｂｉｚｉａＦａｌｃａｔ...     

慢生型大豆根瘤菌的遗传多样性研究

采用选择性扩增片断长度多态性 (简称AFLP)DNA指纹技术对来自泰国北部的 2 45株慢生型大豆根瘤菌进行遗传多样性的研究 .通过AFLP图谱揭示出该地区的慢生型大豆根瘤菌有较显著的遗传多样性 .从 2 45株中选择出 92个代表株用计算机进行的树状图分析结果表明 ,所分析的菌株在 82 %的相似性水平上聚类成 8个群 .对这 92个代表株的部分菌株和慢生型大豆根瘤菌的参比菌株进行多聚酶链反应 (PCR)扩增的 16SrDNA的 4种限制性内切酶长度多态 (简称 16SrDNAPCR RFLP)分析 ,得出 2个不同的 16SrDNAPCR RFLP类型的菌株 ,分别与慢生型大豆根瘤菌的参比菌株Bradyrhizobiumjaponicum和Bradyrhizobiumelkanii相同 .图 1表 2参 14     

用celB基因检测慢生花生根瘤菌竞争性的可行性

采用大肠杆菌和根瘤菌接合的方法，将celB标记基因分别导入了两株慢生型花生根瘤菌Spr3-5和Spr4-5中，对出发菌株和标记菌株的代时测定结果表明，二者之间没有显著差异．在标记菌株与出发菌株等量接种的前提下，比较了二者的竞争结瘤能力；结果显示，标记菌株形成的根瘤（蓝瘤）的占瘤率与50％相比，差异不显著，为了研究标记菌株与出发菌株的固氮有效性，测定了标记菌株与出发菌株各自共生植株的干重、全氮和叶绿素含量；结果表明，标记菌株与出发菌株的这3项指标之间没有显著差异．说明利用celB基因研究慢生花生根瘤菌的竞争结瘤能力是可行的，表5参7     

根瘤菌新类群的全细胞蛋白电泳及16S rDNA全序列分析

应用ＳＤＳ全细胞蛋白电泳技术对根瘤菌３个新类群进行聚类分析，并对３个新类群中心菌株的１６Ｓ ｒＤＮＡ全序列（Ｍｒ≈１．５ｋｂ）进行了测定。将所测序列与ＥＭＢＬ／ＢａｎｋＩＴ／ＤＤＢＪ资料库中根瘤菌及相关菌已知种的１６Ｓ ｒＤＮＡ全序列进行聚类比较，得到系统发育树状图，树状图中，菌株ＳＨ２２６２３和ＳＨ１９３１２与山羊豆根瘤菌、葡萄土壤杆菌、根癌土壤杆菌和悬钩子土壤杆菌在同一个分支上，彼此亲缘关系较     

山西根瘤菌资源多样性与特异性研究

从山西不同生态条件下,采集豆科植物根瘤,经分离、纯化、回接原寄主,获得来自３１属７１种豆科植物寄主的纯根瘤菌株２１２株．对１５４株进行了ＢＴＢ反应和生长速度测定,在ＹＭＡ培养基上产酸快生型占９７．４％．选用了其中５０株,以快生型苜蓿根瘤菌（Ｒ．ｍｅｌｉｌｏｔｉ）和豌豆根瘤菌（Ｒ．ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｒｕｍ）各３株为ＣＫ,进行了其它生理生化鉴定．结果表明,５６株参试菌株均不产生３－酮基乳糖．山西分离的菌株能在蛋白胨肉汤上生长的１３株;能利用柠檬酸盐的７株;石蕊牛奶反应,产酸的１２株,其中酸凝的８株,产碱的３０株,其中胨化的１１株,石蕊还原的７株．唯一碳源和氮源利用比ＣＫ更广泛．对温度的适应范围宽．比ＣＫ有更强的耐盐、耐碱和对抗菌素的耐受能力     

脂肪腈化物的微生物降解

从长期被腈化物污染的土壤中，筛选到３株对腈化物化物降解能力很强的细菌，分别为霍夫曼棒杆菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈｏｆｆｍａｎｉｉ Ｂ－２１）、微黄色节杆菌（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ Ｂ－２２）和克雷伯氏杆菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｓｐ．Ｐ－２１）。该菌可将乙腈（Ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）、丙腈（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｔｒｉｌｅ）、丁腈（Ｂｕｔｙｒｏｎｉｔｒｉｌｅ）和丙烯     

侵染大豆的蚕豆萎蔫病毒研究

从杭州市郊的大豆病株上获得一病毒分离物Ｓ１,温室人工摩擦接种７科１６种植物,Ｓ１能侵染其中的５科１４种植物．Ｓ１能由桃蚜、豆蚜以非持久性方式传毒,该分离物的钝化温度为５０～５５℃,稀释限点为１０－３～１０－４,体外保毒期为３～４ｄ（２５℃）．用昆诺藜作繁殖寄主可提到大量球状病毒粒子,ｄ为２５～３０ｎｍ．病毒外壳蛋白主要由两种亚基构成,Ｍｒ分别为４４．７×１０３和２１．９×１０３,病毒基因组由两条ＲＮＡ分子组成,大小分别为６．２ｋｂ与３．８ｋｂ,Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ结果显示３．８ｋｂＲＮＡ与ＢＢＷＶ２蚕豆分离物ＲＮＡ２ｃＤＮＡ有明显杂交反应．病毒粒子电泳后产生相似于豇豆花叶病毒科的快、慢两个电泳型．琼脂双扩散试验中,Ｓ１和ＢＢＷＶ２均能与蚕豆萎蔫病毒２（ＢＢＷＶ２）抗血清形成明显沉淀线,且沉淀线互相融合,Ｗｅｓｔｅｒｎ检测亦表明,此分离物的大小亚基均可与ＢＢＷＶ２抗血清反应．根据以上特性,Ｓ１分离物被鉴定为ＢＢＷＶ２．     

不同菌源的微生物对邻苯二甲酸二甲酯生物降解性的比较

从处理石化厂废水的活性污泥中分离出１ 株邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１（ 荧光假单胞菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ Ｆ Ｓ１） ,从处理焦化厂废水的活性污泥中分离出２ 株邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ２（ 铜绿假单胞菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎａｓａ Ｆ Ｓ２） 和 Ｆ Ｓ３（ 短杆菌 Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ ． Ｆ Ｓ３） ． 研究了邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１ , Ｆ Ｓ２ 和 Ｆ Ｓ３ 对邻苯二甲酸二甲酯（ Ｄ Ｍ Ｐ） 的最适降解条件,比较了其降解特性． Ｆ Ｓ１ 、 Ｆ Ｓ２ 和 Ｆ Ｓ３ 最适酸度分别为ｐ Ｈ６ ．５ ～８ ．０ 、ｐ Ｈ７ ．０ ～８ ．０ 和ｐ Ｈ７ ．０ ～８ ．０ ,温度为２０ ～３５ ℃、１５ ～３５ ℃和１５ ～３５ ℃．邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１ 、 Ｆ Ｓ２ 和 Ｆ Ｓ３ 对邻苯二甲酸二甲酯的降解的半寿期： Ｆ Ｓ１ ＜ Ｆ Ｓ２ ＜ Ｆ Ｓ３ ,邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１ 是一株高效的邻苯二甲酸二甲酯降解菌     

三株产甲烷细菌表面层研究

用电子显微镜的负染色技术,对史氏甲烷短杆菌Ｈ１３（ Ｍｅｔｈａｎｏｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｓｍｉｔｈｉｉ Ｈ１３）、嗜热甲酸甲烷杆菌ＣＢ１２（ Ｍｅｔｈａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏｆｏｒｍｉｃｉｃｕｍ ＣＢ１２） 、拉布雷甲烷粒菌Ｚ（ Ｍｅｔｈａｎｏｃｏｒｐｕｓｃｕｌｕｍ ｌａｂｒｅａｎｕｍ Ｚ） 的表面结构观察比较结果表明：史氏甲烷短杆菌Ｈ１３ 和嗜热甲酸甲烷杆菌ＣＢ１２ 的表面层由规则排列的四边形亚单位组成;前者每个亚单位直径为５～７ ｎｍ ,亚单位之间的中心距离为５ ～８ ｎｍ ,后者亚单位直径为９～１２ ｎｍ ,亚单位之间的中心距离为１１～１４ ｎｍ ．拉布雷甲烷粒菌Ｚ的表面层是条纹和颗粒状或丝状组成的网状结构．每根条纹宽３～４ ｎｍ ,条纹之间的距离为６～８ ｎｍ ．３ 株产甲烷细菌的表面层各不相同,其中嗜热甲酸甲烷杆菌ＣＢ１２ 和拉布雷甲烷粒菌Ｚ的表面层结构十分独特,明显不同于已报道的产甲烷细菌和古细菌的表面层结构．     

微生物降解蔬菜残留农药研究

从富集培养物中筛选到以甲胺磷为唯一碳源生长的菌株ＮＭＪ５和以乐果为唯一碳源生长的菌株ＮＭＬ３，经鉴定分别为芽孢杆菌属（Ｂａｃｉｌｕｓｓｐ．）和假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．）．它们利用甲胺磷、乐果生长的最适条件及在无机盐培养基中农药最大耐受浓度分别为ｐＨ７．５，ｔ＝３５℃，ρ＝１０００ｍｇ／Ｌ和ｐＨ７．５，ｔ＝３０℃，ρ＝２０００ｍｇ／Ｌ．在无碳基础培养基内单菌株培养８ｄ，５２４ｍｇ／Ｌ的甲胺磷好气降解４２．５％，厌气降解３５．９％，２５０ｍｇ／Ｌ的乐果好气降解５０．２％，厌气降解１６．４％．小区试验表明，ＮＭＪ５、ＮＭＬ３的菌液制剂对普通白菜的变种南农矮脚黄（Ｂｒａｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｓｐ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓＬ．ｖａｒ．ｃｏｍｍｕｎｉｓＴｓｅｎｅｔＬｅｅ）中残留的甲胺磷、乐果有明显的去除作用．     

陕甘宁地区根瘤菌数值分类与DNA同源性分析

在陕甘宁地区根瘤菌资源调查的基础上,选取其中与黄芪、岩黄蓍、木兰、鸡眼草及胡枝子共生的４０株快生根瘤菌和２５株参比菌株,对１３３项表型性状进行聚类分析,在８２％的相似性水平上构成５个不同于已知种的新亚群．对第１、２、３、４亚群ｘ（Ｇ＋Ｃ）／％测定及ＤＮＡ同源性分析结果表明,４个亚群ｘ（Ｇ＋Ｃ）／％含量均处于Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ属范围;各亚群内菌株ＤＮＡ同源性均在７５％以上,每个亚群中心菌株与１３个已知种模式菌株的ＤＮＡ同源性均小于６３％．从而证明,第１、２、３、４亚群为４个独立的快生根瘤菌新种群     

慢生根瘤菌交叉结瘤及其系统发育关系的研究

选用包括6株花往根瘤菌[Bradyrhizobium sp.(Arachis)]在内的13株慢生根瘤菌，进行了6种豆科植物结瘤试验及共系统发育分析。研究结果表明，慢生根瘤菌与试验的豆科宿主植物间普遍存在交叉结瘤，还发现有些菌株在原宿主外的豆科植物根部形成类根瘤的现象。16S rDNA和23S rDNA的PCR－RFLP分析揭示出这些菌株rDNA基因的差异性，不同宿主来源的慢生根瘤菌株可以同属一个rDNA类型，而从同一宿主中分离的根瘤菌菌株可分属多种不同的rDNA类型，研究结果表明，采用rDNA PCR-RFLP等遗传背景分析的手段，可能筛选出广谱的根瘤菌力株，表4参8。     

BACILLUS SP. BT-7木聚糖酶基因克隆与鉴定

报道了从一株有较高半纤维素酶活性的Ｂａｃｉｌｕｓｓｐ．ＢＴ７克隆内切木聚糖酶基因的结果．以大肠杆菌ＸＬ１ｂｌｕｅ为宿主菌,采用水解圈检测法,在含有ＲＢＢ木聚糖（４氧甲基Ｄ葡萄糖苷Ｄ木聚糖Ｒｅｍａｚｏｌ亮蓝Ｒ）的平板上分离到能水解ＲＢＢ木聚糖的阳性克隆３个,对它们进行的限制酶作图和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析表明,它们属于３种不同的内切木聚糖酶基因     

与黑龙江大豆主栽品种匹配的优良根瘤菌筛选与鉴定

根瘤菌剂在大豆上能否充分发挥共生固氮效应涉及到根瘤菌的结瘤固氮能力、与大豆品种的匹配性、土壤特性等多种因素.黑龙江省是我国大豆的主产区之一,为筛选得到适于在黑龙江推广应用的根瘤菌资源,从黑龙江、河北和湖南等地区采集土壤样品,采用大豆结瘤法,从10个土样中分离获得59株大豆根瘤菌株,再依据BTB显色反应和16S r DNA分析,鉴定出36个慢生型大豆根瘤菌.沙培结果表明,有34株根瘤菌能够在大豆品种黑农61上有效结瘤;再从中选出4株共生效应较好的菌株做进一步实验.匹配实验表明,这4株菌SN2-5、NW5-3、SN7-2和SN10-3同样能与黑龙江另外16个主栽大豆品种结瘤;与不接根瘤菌的对照组相比,SN2-5、NW5-3、SN7-2和SN10-3处理的大豆的根瘤固氮酶活和生物量显著提高,且整体表型优于HN01和USDA110.土壤盆栽实验结果表明,NW5-3、SN10-3、SN7-2在黑土中具有显著的接种效果,且在10 mmol/L NH_4NO_3高氮处理下,4个优良供试菌均能够与黑农61结瘤.与不加氮素的处理相比,其中NW5-3和SN10-3形成根瘤具有近50%的固氮酶活性.本研究筛选的4个慢生型大豆根瘤菌SN2-5、NW5-3、SN7-2、SN10-3与黑龙江的主栽大豆品种具有良好匹配性能,可进一步用于黑龙江大豆产区的田间实验.     

光合细菌在水产养殖中的应用[综述]

光合细菌（ＰｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃＢａｃｔｅｒｉａ,以下简称ＰＳＢ）是地球上最早出现的一大类能以光作为能源,以ＣＯ２和有机物作为光合作用碳源,以有机物、氢气或硫化物为供氢体而营养繁殖的原核生物的总称;除蓝细菌外都能在厌氧光照条件下进行不产氧的光合作用．ＰＳＢ分布广泛（见表１）,类型多样,根据《伯杰细菌鉴定手册》（第九版）ＰＳＢ可分为六个类群,２７个属（见表２）．其中的红色非硫细菌由于其分解利用有机物能力强、营养丰富,因而得到广泛的应用．表１　各种环境下ＰＳＢ数量（ｎ（ＰＳＢ）／ｇ－１）Ｔａｂ…     

2℃低温下冬小麦幼苗质膜Ca^2＋—ATPase的活性变化

用氯化铈（ＣｅＣｌ３）沉淀的电镜细胞化学方法，对常温下及２℃低温自理后的冬小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｉｕｍ Ｌ．）幼苗质膜Ｃａ＾２＋＿ＡＴＰａｓｅ活性进行定位。结果显示：（１）常温下生长的冬小麦幼苗，质膜上有部分Ｃａ＾２＿ＡＴＰａｓｅ活性反应。（２）冬小麦幼苗经２℃低温处理１ｈ，质膜上Ｃａ＾２＿ＡＴＰａｓｅ活性增加。处理３ｈ，活性进一步加强。２℃下处理１２ｈ，有强的酶活性反应。处理２４ｈ     

光合细菌光合产氢机理研究进展[综述]

７０年代以来，随着全球性的能源危机和温室效应的加剧，无污染、可再生的氢能的研究开发日受重视．物制氢技术是氢能开发研究的一项重要内容．至今已知的具产氢活性的微生物有“光合细菌”（ｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａ，ＰＳＢ）、藻类（ａｌｇａｅ）和非光合细菌（ｎｏｎｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａ）［１］．由于ＰＳＢ光合产氢的速度要比藻类快，能量利用率比非光合细菌高，且能将产氢与光能利用、有机物的去除有机地耦合在一起，因而得到了众多研究者的关注．本文就ＰＳＢ的产氢的机理及影响产…