二氧化硫对小鼠不同脏器DNA的损伤作用

应用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)研究了SO₂对小鼠不同脏器(脑、肺、肝、脾、肾、肠和睾丸)及血液淋巴细胞遗传物质—DNA的损伤作用.结果表明,SO₂引起所有受试器官和血液淋巴细胞DNA损伤,且随SO₂浓度增加,DNA损伤加剧,并呈明确的剂量-效应关系.随吸入SO₂浓度增加,DNA受损伤的细胞数占总细胞数的比率增加,二者呈正相关.SO₂是一种全身性DNA损伤因子.     

环境激素双酚A与DNA相互作用的电化学研究

采用电化学方法研究了双酚A与DNA间的相互作用。结果表明,DNA的存在使双酚A的氧化峰电流减小,且峰电位正移,双酚A与DNA的相互作用以嵌插作用为主。双链DNA（dsDNA）与双酚A的结合大于单链DNA（ssDNA）,结合比为1∶4,结合常数β为1.35×10^23。     

应用蚯蚓彗星实验检测环境甲醛的生态毒性

为了检测甲醛对环境的生态毒性,用不同剂量的液态甲醛和不同浓度的气态甲醛对赤子爱胜蚓染毒1 h,利用单细胞凝胶电泳技术(又称彗星实验)和氯化钾-十二烷基硫酸钠沉淀法(K-SDS)检测蚯蚓细胞的DNA损伤和DNA-蛋白质交联情况.实验结果发现,甲醛在低剂量或低浓度水平(5、25μmol·L-1;0.522 、1.308 mg·m-3)时,可以引起轻微的DNA损伤--DNA分子断裂(p＜0.01);在高剂量或高浓度水平(125、625μmol·L-1;2.1 mg·m-3)时,可以导致严重的DNA损伤,即DNA-蛋白质交联(p＜0.01).结果表明,低浓度的甲醛可以引起蚯蚓细胞DNA断裂,较高浓度的甲醛可以导致蚯蚓细胞DNA-蛋白质交联,且DNA损伤的程度与甲醛浓度具有良好的量效关系.     

环境遗传毒性研究中的生物标记

生物标记分析是在生物化学和分子生物学技术基础上发展起来的,研究毒性物质对生物体产生毒性效应的方法,正成为生态毒理学和环境风险评价研究中的一项重要技术手段。该方法对检测并定量分析各类混合毒性物质所引发的遗传毒性,具有积极的意义,包括以蛋白质特性为基础的蛋白质标记,检测亚细胞毒性水平遗传毒性的生理性标记,及以遗传物质DNA的结构和多态性为特征的分子标记等。该方法具有测定灵敏、快速的特性,在遗传毒性的研究中将发挥出越来越大的作用。     

用UDS试验检测黄浦江水质致遗传毒性

本文运用UDS试验来检测黄浦江水质致遗传毒性,结果表明,试验条件是可行的。UDS试验从DNA修复合成的角度来反映受试物的致遗传毒性作用,可作为水质评价的方法之一。     

人体颊黏膜细胞彗星实验方法学研究

为探索一种简便、直接检测环境诱变物对人体靶细胞遗传毒性的方法,笔者以甲醛作为染毒剂,对人体口腔颊黏膜细胞彗星实验的染毒时间、染毒温度和2种用于检测交联作用的方案进行了研究。结果显示:经7 5μmol L甲醛37℃染毒30和60min后,DNA的断裂程度较染毒15min更大;而经该浓度甲醛在4,23和37℃下染毒30min后均可引起DNA的断裂,但37℃下染毒对DNA的断裂作用更大。在2种应用于检测交联作用的方案中,加大电泳条件的交联检测方案还可检测兼具交联和断裂效应的诱变物。      

两座污水处理系统中细胞态和游离态抗生素抗性基因的丰度特征

为探究污水处理系统中抗生素抗性基因(ARGs)、特别是胞外游离态ARGs的赋存特征,本研究选取生活污水处理系统和工业废水处理系统各一座,采用荧光定量PCR对细胞态及游离态ARGs丰度变化开展研究.在生活污水处理系统M中,进水sulⅡ、tet C、bla PSE-1和erm B这4种ARGs细胞态的绝对丰度均大幅高于游离态的绝对丰度,生物处理未对抗生素抗性菌(ARBs)产生富集效应;MBR的超滤膜有效削减了水中细胞态和游离态DNA,最终ARGs的总去除率为2.54~4.95 logs.在焦化废水处理系统C中,生物处理对携带sulⅡ的ARBs产生了富集效应,但游离态sulⅡ的相对丰度和绝对丰度均有所降低;其后混凝-砂滤工艺使水中细胞态和游离态sulⅡ的绝对丰度分别出现了下降和上升,游离态sulⅡ在总sulⅡ中的比例从生物处理出水中的0.05%,上升到混凝-砂滤出水中的1.33%,并在25℃恒温避光静置5d后进一步上升至9.31%.ARBs深度去除及残留细胞裂解,使污水处理系统出水中游离ARGs在总ARGs中的比例有所上升.游离态ARGs介导ARGs在污水处理系统出水受纳环境中的传播扩散风险有待后续研究进行深入评估.     

Germline mosaicism complicates molecular diagnosis of Lesch–Nyhan syndrome

A healthy female with a brother suffering from Lesch–Nyhan syndrome was assigned a carrier status on the basis of haplotype analysis employing flanking and intragenic polymorphic markers of the HPRT gene. Her mother has been confirmed as a definite carrier by cell growth selection studies in cultured fibroblasts. In our proposita's first pregnancy, a male fetus was identified carrying the risk allele. Afterwards, the underlying novel mutation A161E (GCA→GAA at position c482) could be identified in the affected brother and in the heterozygous mother but not in the DNA of the pregnant sister and fetus. The fetus was also confirmed to be normal by uptake of 14C-hypoxanthine in cultured amniotic cells. To test the discrepancy, the investigation was extended by recruiting additional family members. The data obtained showed that the mother had passed her risk haplotype to the affected son as well as to her mutation-carrying and non–mutation-carrying daughters. This provides the first evidence of concomitant somatic and germline mosaicism in Lesch–Nyhan syndrome. The study has a bearing on genetic counselling and cautions against the reliability of only using indirect genetic diagnosis even with intragenic markers. Copyright © 2004 John Wiley & Sons, Ltd.     

Applicability of DNA isolated from syncytiotrophoblast vesicles to gene amplification and molecular analysis

Maternal contamination of fetal DNA represents a major problem when highly sensitive molecular techniques are used in the prenatal diagnosis of genetic diseases. For this reason, we have studied the possibility of using DNA isolated from syncytiotrophoblast vesicles as a target of gene amplification (PCR). Three PCR systems were selected which included a repetitive 149 bp fragment of the Y chromosome, the VNTR locus D1S80, and a portion of the β-globin gene. The results of these experiments indicate that DNA isolated from syncytiotrophoblast vesicles is free of maternal contamination and is suitable for gene amplification and DNA analysis.     

一株处理含对苯二甲酸废水的工程菌的构建

采用染色体ＤＮＡ转化原生质球的方法，构建一株处理含ＰＴＡ废水的工程菌ＬＥＹ３。ＬＥＹ３能同时降解６种化合物：ＰＴＡ，萘，苯甲酸，十六烷，乙二醇，甲醇。用ＬＥＹ３对含ＰＴＡ生产废水作降解试验，ＣＯＤ的去除率在６６％￣９１％之间。     

DNA加合物8-氢基脱氧鸟苷特性研究

作为DNA氧化损伤的生物学标志物，8-羟基脱氧鸟苷（8-OH-dG）的特性研究，对稳定、灵敏、准确地定量8-OH-dG，进而研究有毒化学物质对生物体内的氧化损伤很重要，该文研究了氧化损伤DNA中8-OH-dG的分析、水解、储存、稳定性等方面的问题，采用Fenton型产羟自由基系统如螯合剂Fe^2 -H2O2为氧化源，与脱氧鸟苷和小牛胸腺DNA反应，生成的8-OH-dG用高压液相色谱-电化学法检测，并对8-OH-dG的分析条件进行优化，该法最低检出限为32fmol，比光学吸收法高2～3个数量级，线性范围可高达4个数量级，从0.32pmol到3.2nmol，相关系数0.9996。并对酶水解DNA的条件、储存酸度、中性偏酸的缓冲液中损失较少，其形成与所处介质环境有关，在氧化源存在或有氧环境中一定时间内有积累作用，添加抗氧化剂等干预措施后，能灵敏而稳定地对DNA中的8-OH-dG进行测定。     

锌离子对活性污泥微生物DNA序列多样性的影响

研究了锌离子对活性污泥微生物群落结构的影响.不同浓度的锌离子对有机物的降解和氮的转化均有抑制.经过驯化后,处理系统对有机物的降解可以逐步得到恢复,而对于氨氮和亚硝酸氮的降解则并不随着驯化时间的延长而得到改善.随机扩增多态性RAPD分析表明,在不同的驯化阶段,DNA序列的分子多样性是不同的.结果显示,加入锌离子的微生物多样性明显小于对照组,驯化成熟的实验组尽管在COD的去除率上和对照组没有什么差别,但在生物多样性、丰富度、均匀度和相似性上与驯化初期有较大的差别.从RAPD条带上可清楚地看到某些细菌的消失,以及耐受锌离子的种类的持续存活.      

限制性片段长度多态性分析(ARDRA)方法对重金属污染土壤中细菌群落多样性的研究

限制性片段长度多态性分析(ARDRA)是用限制性内切酶消化扩增后的细菌16S rDNA,通过凝胶电泳分析微生物种群多样性的分子标记技术,该技术在微生物生态学领域有着广泛的应用.实验采用2种途径评价了这种方法应用于研究土壤中细菌种群多样性的可行性.通过对未污染土壤细菌16S rDNA的克隆,获得了经内切酶HaeⅢ消化的不同16S rDNA的ARDRA类型,并对测序的19个克隆子建立了系统发育树.此外,还对不同Cd和Pb污染水平的土壤微生物进行了群落水平上的ARDRA分析.结果表明,5 mg·kg-1 Cd和500 mg·kg-1 Pb污染对微生物群落组成有一定影响,但此范围内的重金属含量对微生物群落多样性没有相关性影响.     

醛类化合物-DNA加合物结构研究进展

综述了环境中常见的7种醛类污染物与DNA形成加合物的结构研究现状,包括单核苷酸-醛试管反应、DBA-醛试管反应、细胞培养、动物体以及人体内所产生的加合物结构的研究方法与结论,并对加合物结构研究的难点和发展方向进行了探讨。