粉葛根腐病菌的生物学特性及防治研究

粉葛根腐病是粉葛生产上新发现的一种毁灭性土传病害。作者对病原作了人工分离和接菌试验，观测了温度、pH对病原菌菌丝体生长的影响；对防治药剂进行了筛选和试验，探讨了该病的有效防治药物及对策。     

一株草莓根腐尖孢镰刀菌拮抗内生细菌的分离鉴定及抑菌特性

为筛选对草莓根腐尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)有较好抑菌活性的草莓内生细菌,从草莓的根、茎、叶和果实中分离内生细菌,采用平板对峙法筛选具有抑菌活性的菌株,经形态特征观察、生理生化特性及分子鉴定后,进行拮抗菌抑菌特性分析.结果筛选到1株对草莓根腐尖孢镰刀菌具有较高抑菌活性(抑菌带达9.8 mm)、稳定性较好的菌,标记为SY-4.此外,该菌对桃褐腐病菌(Monilinia fruticola)、棉花红腐病菌(Fusarium moniliforme)和草莓根腐石楠拟盘多毛孢(Pestalotiopsis photiniae)等也有较好的拮抗作用.SY-4经鉴定确定为枯草芽胞杆菌.SY-4发酵液在培养时间48 h、培养温度37℃、pH值为7时,抗菌效果最好,但发酵产物不耐高温、不耐酸、较耐碱性,对蛋白酶敏感,初步说明存在蛋白类抑菌活性物质.电镜观察发现SY-4发酵液处理草莓根腐尖孢镰刀菌后,菌丝形态变得不规则.该拮抗内生细菌是潜在的植物病原真菌生防菌资源,具有一定的开发与应用价值.     

微生物源槐糖脂对水果致腐真菌的抑制作用

致腐真菌是诱发水果采后病害,造成水果在运输、货架期间和贮藏过程腐败变质的主要原因.从腐烂水果上分离得到17株菌,其中9株为致腐真菌,研究了由拟威克酵母发酵产生的槐糖脂对该9株菌的作用,包括抑菌圈直径、抑菌率和对菌丝蔓延的影响.发现槐糖脂对9株致腐真菌有很好的抑制作用,浓度达到2.0 g L-1时,致腐菌(孢子)抑制率达...     

八种镰刀菌毒素的电子捕获气相色谱分析

通过对各种反应条件的选择,建立了八种主要镰刀菌毒素同时检测的电子捕获气相色谱分析方法(GC-ECD法).在SE-54涂布的弹性石英毛细管交链柱上,八种镰刀菌毒素达到完全分离。T-2毒素,HT-2毒素、新茄病镰刀菌烯醇、二乙酰蘸草镰刀菌烯醇,玉米赤霉烯酮等的最低检测限为5×10~(-11)g,脱氧雪腐镰刀菌烯醇、雪腐镰刀菌烯醇、镰刀菌烯酮-X的最低检测限为3×10~(-12)g.     

影响甜菜黑腐丝囊霉的几种生态学和生物学因子

通过对河西灌区甜菜(Beta vulgaris L.)黑腐病(Sugar Beet Black Rot)为期3a的研究，探讨了甜菜栽培品种与病害发病率及病原菌黑腐丝囊霉（Aphanomyces cochlioides)分离频率的关系以及3种环境因子即温度、pH值、不同天然培养基与甜菜黑腐丝囊霉的关系。结果表明：各栽培品种在田间的发病率与室内病原分离频率不同，其中工农2号田间发病率为1．3％，室内分离频率为93％，工农5号分别为1％和7．2％，宁甜301分别为2％和6．1％，工农2号具有更大的耐病性；甜菜黑腐丝囊霉的生长温度范围为5—30℃，最适温度为25—27℃，对高温敏感，33℃为其致死温度；甜菜黑腐丝囊霉可在pH3．5—11范围内生长，最适pH为5—9．9；甜菜黑腐丝囊霉在PDA、玉米粉琼脂、甜菜汁、麦芽糖—胨、麦芽糖酵母汁及燕麦琼脂培养基上均可生长，其中在甜菜汁培养基上生长最好．图4表3参11     

黄绿木霉T1010对花生根腐病生防效果研究

土壤种植管理不科学,可导致镰刀菌(Fusarium spp.)成为土壤优势菌,侵染花生(Arachis hypogaea L.)而致其发生根腐病;木霉(Trichoderma spp.)是土壤和植物根际常见真菌、重要生防菌,能防治土传病。2016年和2017年进行盆栽及小区试验,以伤口和自然接种法接种镰刀菌及黄绿木霉(T.aureoviride)T1010,定殖于土壤,观察镰刀菌侵染致花生根腐病,检测T1010对镰刀菌的防治效果。病原菌接种试验结果表明:分自一棵花生病株的5株镰刀菌混合接种处理花生发病严重;根部伤口处接种,花生感病迅速、严重,发病率为100%,病情级数为5~9级;浸种接种镰刀菌,花生主根细短,侧根稀少,病情级数为5级;土壤接种镰刀菌5×10~5 cfu·g~(-1)(干土),接种混合株花生发病严重,出苗率为43.33%,成株发病率为100%,主根、侧根分别比清水对照短72.74%、96.10%,侧根及根瘤数量分别降低97.17%、95.53%。生防试验结果表明:土壤接种病菌后再撒播T1010发酵物,出苗率达90%以上,成苗率为100%,防病效果达73.79%以上;T1010+F组花生主根长是F组的1.73倍,侧根长,侧根数提高数倍,根瘤数大幅度增加,开花多,入土果针多,F组土壤中镰刀菌数量为1.02×10~4 cfu·g~(-1),而T1010+F组仅为F组的3.62%,防病效果为79.16%。小区试验结果表明:空白对照组花生根腐病严重,与常规对照相比,开花下针期T1010处理组花多、根系发达、发病率低,饱果期土壤中镰刀菌数量仅为常规对照的2.62%,防病效果为88.96%,产量增产38.57%。土壤增加外源有益微生物黄绿木霉T1010,控制镰刀菌种群密度,减少农用化学品使用,消弱镰刀菌抗药性和生长力,是花生连作障碍土壤防治花生根腐病有效合理的防治措施。     

中国与欧洲禾谷镰刀菌DON毒素HPLC定量比较分析

选用4个来自中国、7个来自欧洲的代表性禾谷镰刀菌菌株,经脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)毒素特异引物鉴定,确认其具有产生DON毒素的遗传物质基础后,接种于PDB培养基培养7d,从培养基上清中经硅胶柱分离、纯化DON毒素,经HPLC定量分析表明,纯化的禾谷镰刀菌DON毒素,与购自公司的DON毒素标准样品一样,其HPLC检测谱峰清晰明显,基线平稳,无干扰,保留时间为9.5min左右;供试菌株的DON毒素含量分布在0.023~1.934μg/mL之间,德国菌株F703产毒量最大,比位居第二的中国菌株5005(1.232μg/mL)高57%;其余的6个欧洲菌株中,除意大利菌株Lor9(0.128μg/mL)略低于另一个中国菌株7105(0.135μg/mL)外,均比3个中国菌株(4020、7105、8029)的产毒量大.欧洲镰刀菌产生DON毒素的能力远远大于中国菌株,这说明欧洲菌株长期在欧洲生态环境下已演变形成其特有的高毒素代谢类型,我国有必要严防欧洲禾谷镰刀菌入侵,加强对来自欧洲的禾谷类粮食及其产品的镰刀菌和毒素的检疫和监控;同时,本研究建立的毒素样品制备与HPLC检测体系可用于准确定量分析样品的DON毒素.图3表2参14     

白兰瓜果腐病病原菌的分离鉴定及优势病菌的毒性测定

对引起白兰瓜贮藏期果腐病的病原菌进行了分离、鉴定和致病性测定，明确了Fusarium lateritium Nees，Cephalothecium roseum，Aspergillus spp．，Penicillium spp．，Rhizopus stolonifer等5种引起白兰瓜果实腐烂的病原真菌，其中以F.lateritium Nees的危害最为严重，为优势菌，其次为C.roseum．而F.lateritium在pH6的Richard培养液中，置25℃黑暗静置培养14d后获得的培养滤液对白兰瓜种子胚根的抑制率最强．F.lateritium产生的毒素为非专化性毒素．表4参7     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒理作用研究进展

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是人畜食品中检出率和超标率最高的一种真菌毒素。与核糖体60s亚基的肽基转移酶活性中心结合后会引发核糖体应激反应,诱导细胞凋亡等作用,对肠道、免疫系统造成破坏,并且具有遗传毒性。为今后的研究工作提供参考,笔者将从DON的毒理学机制和对机体的影响角度入手对近几年新的研究成果做综合论述。     

粮食与饲料中七种单端孢霉烯族真菌毒素的测定

本文提出了一种同时检测粮食和饲料中七种主要单端孢霉烯族真菌毒素的电子捕获气相色谱分析方法.粮食样品经醋酸乙酯、氯仿、乙醇提取后,减压浓缩.浓缩液用活性炭-中性氧化铝(2:1,W/W)柱净化,84％乙腈水溶液洗脱.洗脱液减压浓缩至于,残渣用N-七氟正丁酰咪唑衍生化.电子捕获气相色谱的分析结果表明,活性炭-中性氧化铝柱能有效地除去粮食中的干扰物,有很好的分离效果.T-2毒素、HT-2毒素、二乙酰藨草镰刀菌烯醇、新茄病镰刀菌烯醇、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、雪腐镰刀菌烯醇、镰刀菌烯酮-X等七种毒素在小麦、大麦、玉米及大米中的回收率在浓度范围为50ng/g—500ng/g的范围内均为80％以上.     

中型景观尺度下斑块类型和地理特征影响杨树人工林干部病害的发生——以河南省清丰县为例

景观病理学在开展病原扩散、病害发生及其严重程度方面以其全新的视角,为森林病害的区域控制提供了新的研究技术及理论支持。首次利用景观病理学原理和方法对河南省清丰县一个中型景观下杨树人工林干部病害发生特征开展了研究,目的是解析在大尺度下斑块类型和地理特征对杨树人工林病害发生的影响。在100 km2的调查区域,以种植方式和林分类型划分斑块类型,分析显示发病株率在不同斑块间差异显著：农田间作斑块的林木发病株率显著低于孤立斑块、纯林斑块、混交林等斑块的发病株率;但发病株率在孤立斑块、纯林斑块及混交林等斑块间无显著差异。抚育管理措施对预防和减轻杨树人工林干部病害的发生起到关键左右：精细管理林分（有修枝、施肥和锄草）的林木发病株率（p=0.001）和发病指数（p〈0.001）均显著低于粗放管理林分（无修枝、无施肥和锄草等）。人类活动,如无序修剪和放牧很可能是造成村落附近林分发病率显著高于其他地点林分的主要原因。采用logistic回归,以品种编号、树龄、树高、林分密度、林分郁闭度、林分类型、斑块类型、地理特征,等为自变量建立病害发生预测模型。方程拟合达到极显著水平（Wald=71.248,p〈0.001）。方程总的预测正确率为68.2%,发病的预测正确率为79.8%。     

畜禽养殖过程抗生素使用与耐药病原菌及其抗性基因赋存的研究进展

兽用抗生素在提高畜禽生产性能、防治疾病方面发挥着重要作用,目前全球超过一半以上抗生素用于畜禽养殖,畜禽养殖源耐药病原菌、抗性基因及其传播风险愈益得到人们的重视。我国是畜禽养殖和抗生素使用大国,但兽用抗生素使用、病原菌耐药水平及其抗性基因类型等数据却较为缺乏,不利于今后畜禽养殖源耐药病原菌及其传播风险的控制。因此,本文通过文献调研,对我国和主要发达国家的兽用抗生素使用情况、畜禽养殖源耐药病原菌及其携带的抗性基因、基因移动元件以及向环境传播的途径进行分析、总结,以期为规范合理用药、降低耐药病原菌及其抗性基因传播风险,建立从畜禽养殖场至公共环境全过程的抗性污染控制链条提供借鉴。     

Cellular damage of plant pathogenic fungi by antifungal compounds produced by Bacillus spp. isolates

The use of microorganisms as biological control agents (BCAs) has become an effective alternative to chemical means of controlling plant pathogens. The antagonistic and inhibitory activity of 71 Bacillus spp. strains, which were isolated from different Mexican sites, were tested against several phytopathogen fungi, Fusarium oxysporum, Fusarium equiseti, Fusarium avenaceum, Bipolaris spp. and Alternaria spp. From the antagonism study, the strain ELI149 showed a marked inhibition of growth against all tested fungi; therefore crude metabolites from this strain were extracted using ethyl acetate and amberlite resin and probed against the same fungi as well as strains of Mucor sp., Penicillium spp. and Paecilomyces spp. The results indicated that amberlite was more suitable for extraction of secondary metabolites with antifungal activity. Finally, observation of cell damage in the tested pathogenic fungi showed marked morphological changes on reproductive structures in all tested fungi indicating that antibiosis was the mechanism of the antagonistic effect. These results suggest that metabolites from the Bacillus strains have a wide spectrum of antibiotic activities, which can be used as biocontrol agents for controlling fungal plant diseases of agricultural importance.     

Growth responses of in vitro Fusarium oxysporum f. sp. niveum to external supply of tannic acid

Allelochemicals released from root exudates or decaying residues of plants play diversified roles in ecological interactions of plant-pathogen. The objective of this work was to evaluate the allelopathic effect of an externally supplied tannic acid on soil-borne in vitro Fusarium oxysporum f. sp. niveum. Results showed that the tannic acid decreased the growth of the fungus up to 9.5% at 800 mg l(-1). Conidial germination was reduced by 52.3% in comparison with the control. However, sporulation and mycotoxin production by the fungus were stimulated. The activity of pectinase and proteinase were initially increased and finally decreased with increase in concentrations of tannic acid. Tannic acid served as an ecological allelochemical, repressing the growth of the pathogen.     

Tolerance of soil pathogens co-varies with shade tolerance across species of tropical tree seedlings

A negative feedback between local abundance and natural enemies could contribute to maintaining tree species diversity by constraining population growth of common species. Soil pathogens could be an important mechanism of such noncompetitive distance and density-dependent (NCDD) mortality, but susceptibility to local pathogens may be ameliorated by a life history strategy that favors survivorship. In a shade-house experiment (1% full sun), we tested seedling life span, growth, and mass allocation responses to microbial extract filtered from conspecific-cultured soil in 21 tree species that varied in abundance and shade tolerance in a wet tropical forest (La Selva Biological Station, Costa Rica). Forty-three percent of the species had significant reductions, and 10% of the species had significant increases in life span, growth, root length, or root surface area when inoculated with microbial extract; 10% of the species experienced opposing reductions and increases in these characteristics. Contrary to expectation, species' local abundance was not related to species-specific responses to microbial extracts from cultured soils. Across species, seedling shade tolerance (survival at 1% full sun) was negatively correlated with susceptibility to the microbial. treatment for both survival and total mass accumulation, thereby exaggerating shade tolerance differences among species. Thus, soil pathogens may contribute to species coexistence through heightening niche differentiation rather than through negative density dependence in common species.     

尖孢镰刀菌致病相关因子及其分子生物学研究进展

由致病性尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)侵染引起的植物枯萎病是一种世界性的土传真菌病害,对农业生产造成了巨大经济损失.研究表明,尖孢镰刀菌的致病与多种致病因子相关,包括信号传导系统(环腺苷酸单磷酸-蛋白激酶A和促分裂素原活化蛋白激酶信号途径)、细胞壁降解酶(木聚糖酶、果胶酶、果胶裂解酶、细胞毒素、纤维素酶、半纤维素酶和木质素降解酶等)、克服植物防御响应系统(降解抗真菌化合物和破坏植物细胞壁的化学修饰)以及其它(细胞毒素和过氧化物酶)等.此外对今后的研究工作提出展望.参26     

四川省部分豆科植物根瘤菌的遗传多样性

从四川省豆科植物鸡眼草属、合欢属、豇豆属、葛属、金合欢、杭子梢分离获得了103株根瘤菌,采用AFLP、BOXAIR-PCR研究了这些菌株的遗传多样性.结果表明,分离自四川省豆科植物6个属的根瘤菌存在明显的遗传多样性,AFLP分析中,全部供试菌株的相似性为21%,全部供试菌株可分为26个AFLP遗传群;BOXAIR-PCR聚类分析结果表明,103个菌株分在70%相似性水平处,供试菌株被分为18个BOX遗传群.除部分菌株外,多数根瘤菌按宿主类型聚群,同一宿主而地理来源不同的根瘤菌分布于不同的遗传群,表明宿主和地理环境对根瘤菌具有深刻影响.图3表1参9     

发根农杆菌T—DNA基因对3种葛属植物毛状根形态和葛根素含量的影响

野葛、山葛和三裂叶葛的离体叶片与发展根农杆菌R1601直接感染诱导出毛状根并能够合成葛根素，毛状根离体培养后均出现两种形态：一种是有较高的葛根素含量的典型毛状根，另一种是葛根素含量低但生长速度较快的愈伤组织化毛状根，两类毛状根均有rol/B基因存在，表明rolB基因对所有毛状根的诱导和生长是必需的，aux1存在于所有愈伤组织化毛状根，而在典型毛状根中的检出率为20％－50％，表明aux1基因有诱导毛状根产生愈作组织的作用，含有ags基因的毛状根葛根素含量低于不含ags基因的毛状葛根素含量，表明ags基因不利于次生代谢合成，表3参12     

生物肥料对香蕉枯萎病及土壤微生物的影响

香蕉枯萎病是真菌引起的一种土传病害,它的蔓延已经严重影响到香蕉产业的正常发展.将腐熟的有机肥与3种生防细菌(枯草芽胞杆菌、胶质芽胞杆菌和巨大芽胞杆菌)结合,组合成生物复混肥和生物有机肥,将它们施用在香蕉上,研究其对枯萎病病害防治效果.盆栽香蕉试验结果显示,2种肥料不仅能抑制香蕉枯萎病(防病效果分别为61.5%和53.8%),同时也引起土壤微生物群落发生变化,真菌数量明显下降,放线菌明显升高,细菌变化较小.通过相关分析发现,生物肥料中3种生防细菌总数与土壤中枯萎菌和普通真菌呈显著负相关,而与防病效果呈极显著正相关,有机肥中细菌与土壤细菌和放线菌含量也呈显著正相关.