大熊猫与熊类动物性别的分子鉴定

根据已知动物的性别决定因子基因序列设计引物,以非性别特异性的脑源性神经营养因子基因片段（ＢＤＮＦ）作为正对照,用于扩增大熊猫、浣熊、天山棕熊和马来熊个体的ＳＲＹ（ｓｅｘｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｒｅｇｉｏｎｏｎＹｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ）基因片段并对其进行凝胶电泳分析,由此建立了一套简单、快速、可靠的动物性别分子鉴定方法．该方法不仅有利于尽快确定大熊猫等珍稀濒危动物的性别,而且也可以用于野外种群的性别比例调查．     

川莓的化学成分

川莓 (ＲｕｂｕｓｓｅｔｃｈｕｅｎｅｎｓｉｓＢｕｒ .ｅｔＦｒａｎｃｈ .)为蔷薇科 (Ｒｏｓａｃｅａｅ)悬钩子属植物 ,分布于两湖和西南地区 ,其根和叶可用于治疗痨伤吐血、咳血、月经不调等[1] .该植物的化学成分还未见报道 ,我们将其根和叶用甲醇室温提取 ,提取物经硅胶柱层析分离纯化得到的 5个化合物 ,经波谱分析和与标准品对照分别鉴定为草莓苷Ｆ1(ｋａｊｉ ｉｃｈｉｇｏｓｉｄｅＦ1,1)、( ) 表儿茶素 ( 2 )、胡萝卜苷 6′ 棕榈油酸酯 ( 3)、胡萝卜苷 ( 4 )和β 谷甾醇 ( 5) .1　实验部分1 .1　仪器、材料和样品ＮＭＲ谱用Ｂｒｕｋ…     

O（^1D）与CF2ClBr的反应研究

本文研究了ＣＦ２ＣｌＢｒ－Ｏ３体系在２５３．７ｎｍ紫外光照下所引发的Ｏ（＾１Ｄ）与ＣＦ２ＣｌＢｒ的反应。Ｏ（＾１Ｄ）与ＣＦ２ＣｌＢｒ反应的最终产物为ＣＦ２Ｏ,Ｃｌ２,Ｂ２ｒ;实验中得到Ｏ（＾１Ｄ）与ＣＦ２ＣｌＢｒ的反应速率常数为１．０１×１０＾－１０ｃｍ＾３·ｍｏｌｅｃｕｌｅ＾－１·ｓ＾－１,并且对Ｏ（＾３Ｐ）与ＣＦ２ＬｌＢｒ的反应可能性以及Ｏ（＾１Ｄ）与ＣＦ２ＣｌＢｒ的反应机理进行了讨论。     

硝基苯废水的厌氧-好氧基本实验与工艺理论分析

根据含硝基苯（ Ｎ Ｂ） 废水的水质特性,利用自然驯化和诱变驯化得到的两株厌氧菌 Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｄｉｓｔａｓｏｎｉｓ（ 吉氏拟杆菌） 和 Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｍｅｒｄａｅ（ 屎拟杆菌） ,采用厌氧填充床－ 好氧污泥床相结合的 Ａ／ Ｏ 工艺使 Ｎ Ｂ 得到彻底降解．研究表明：利用吸附能力强的活性炭作为厌氧填充床的载体,可以在短期内使高效菌挂膜;在影响填充床厌氧处理效果中,ｔ Ｈ Ｒ和进水ｐ Ｈ 值是主要影响因素,而 Ｎ Ｂ 质量浓度ρ（ Ｎ Ｂ） 和θ／ ℃次之．实验结果表明：进水ρ（ Ｎ Ｂ） 为３００ ～８００ ｍｇ／ Ｌ, Ｃ Ｏ Ｄ Ｃｒ 值为１ ５００ ～３ ５００ ｍｇ／ Ｌ,色度为１００ ～２５０ 倍,经过厌氧填充床控制ｔ Ｈ Ｒ＝ ２４ ｈ ,硝基苯转化率大于９０ ％ , Ｃ Ｏ Ｄ 去除率为２０ ％ ～３０ ％ ;在好氧污泥床中继续曝气１２ ｈ ,则总 Ｃ Ｏ Ｄ 去除率为６０ ％ ～７０ ％ ,色度去除率大于７０ ％ ．连续９０ ｄ 用氯霉素制药厂实际废水处理运行结果亦显示本工艺的可行性．     

草浆漂白过程中二恶英类生成机理探讨

本文以氯苯,氯酚,二苯并二恶英和二苯并呋喃为ＰＣＤＤ／ＦＳ前生体,模拟工业草浆漂白条件,探讨了次氯酸盐和氯气漂白苇浆过程中二恶英类的生成机制,研究表明,在苇浆中加入二恶英类前生体加ＤＢＤ／Ｆ,其氯化产物与在木浆中有所区别。在实验条件下,二恶英类的生成量分别为;１５μｇＰＣＤＤＤｓ．ｍｇ＾－１ＤＢＤ,１．５μｇＰＣＤＦｓ．ｍｇ＾－１ＤＢＦ。     

广州市环境卫生数据库信息系统的建立和研究

本文主要介绍了ＧＺＥＳＭＩＳ研制的意义,目标,系统的基本内容,系统功能分析,特点,开发的软硬件环境。本系统得在Ｗｉｎｄｏｗｓ９８环境下,数据库采用ＭｉｃｒｏＳｏｆｔ Ｆｏｘｐｒｏ系列,空间图形处理软件,采用最新的ＡｕｔｏＤｅｓｋＷｏｒｌｄ专业版;图形制作软件选用ＡｕｔｏＣＡＤ;工作语言软件则采用Ｖｉｓｕａｌ Ｂａｓｉｃ５．０专业版,建立了全中文界面的多媒体环卫管理信息系统。     

青钱柳的化学成分

青钱柳 (ＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓＢａｔａｌ.)为胡桃科 (Ｊｕｇｌａｎｄａｃｅａｅ)青钱柳属植物 ,是我国特有的单种属植物 ,生于山地常绿落叶阔叶混交林中及沟谷水旁 ,该植物在民间用于清热消肿、止痛等[1] .但其化学成分的研究还未见报道 ,为了寻找活性成分 ,我们对该植物根部的化学成分进行了提取分离和结构鉴定 .1　实验部分1.1　材料及仪器植物样品采自重庆市南川金佛山 ,凭证标本由重庆药物种植研究所刘正宇副研究员鉴定 .熔点用ＸＲＣ 1型显微熔点仪测定 ,温度计未校正 .ＮＭＲ用ＢｒｕｋｅｒＡＣ 30 0Ｐ型核磁共振仪…     

不同菌源的微生物对邻苯二甲酸二甲酯生物降解性的比较

从处理石化厂废水的活性污泥中分离出１ 株邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１（ 荧光假单胞菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ Ｆ Ｓ１） ,从处理焦化厂废水的活性污泥中分离出２ 株邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ２（ 铜绿假单胞菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎａｓａ Ｆ Ｓ２） 和 Ｆ Ｓ３（ 短杆菌 Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ ． Ｆ Ｓ３） ． 研究了邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１ , Ｆ Ｓ２ 和 Ｆ Ｓ３ 对邻苯二甲酸二甲酯（ Ｄ Ｍ Ｐ） 的最适降解条件,比较了其降解特性． Ｆ Ｓ１ 、 Ｆ Ｓ２ 和 Ｆ Ｓ３ 最适酸度分别为ｐ Ｈ６ ．５ ～８ ．０ 、ｐ Ｈ７ ．０ ～８ ．０ 和ｐ Ｈ７ ．０ ～８ ．０ ,温度为２０ ～３５ ℃、１５ ～３５ ℃和１５ ～３５ ℃．邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１ 、 Ｆ Ｓ２ 和 Ｆ Ｓ３ 对邻苯二甲酸二甲酯的降解的半寿期： Ｆ Ｓ１ ＜ Ｆ Ｓ２ ＜ Ｆ Ｓ３ ,邻苯二甲酸酯降解菌 Ｆ Ｓ１ 是一株高效的邻苯二甲酸二甲酯降解菌     

微囊藻毒素神经毒理学研究进展

微囊藻毒素(microcystins,MCs)是蓝藻产生的主要毒素,中毒人群或动物会表现出神经毒害症状,目前越来越多的研究关注其神经毒害及毒理.MCs 可能由有机阴离子转运肽(OATP)转运并穿过血脑屏障,在动物脑组织中分布与蓄积.MCs会严重影响神经发育,损害动物的神经系统功能.MCs可能通过影响脑组织中的解毒与抗氧...     

微生物降解蔬菜残留农药研究

从富集培养物中筛选到以甲胺磷为唯一碳源生长的菌株ＮＭＪ５和以乐果为唯一碳源生长的菌株ＮＭＬ３，经鉴定分别为芽孢杆菌属（Ｂａｃｉｌｕｓｓｐ．）和假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．）．它们利用甲胺磷、乐果生长的最适条件及在无机盐培养基中农药最大耐受浓度分别为ｐＨ７．５，ｔ＝３５℃，ρ＝１０００ｍｇ／Ｌ和ｐＨ７．５，ｔ＝３０℃，ρ＝２０００ｍｇ／Ｌ．在无碳基础培养基内单菌株培养８ｄ，５２４ｍｇ／Ｌ的甲胺磷好气降解４２．５％，厌气降解３５．９％，２５０ｍｇ／Ｌ的乐果好气降解５０．２％，厌气降解１６．４％．小区试验表明，ＮＭＪ５、ＮＭＬ３的菌液制剂对普通白菜的变种南农矮脚黄（Ｂｒａｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｓｐ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓＬ．ｖａｒ．ｃｏｍｍｕｎｉｓＴｓｅｎｅｔＬｅｅ）中残留的甲胺磷、乐果有明显的去除作用．     

解淀粉芽孢杆菌DC-4豆豉溶栓酶成熟肽编码序列的克隆及表达

利用PCR方法从解淀粉芽孢杆菌DC 4总DNA中扩增出豆豉溶栓酶 (DFE)成熟肽编码区片段 .测序结果表明 :DFE成熟肽编码区长 82 5bp,编码 2 75个氨基酸残基 ,分子量为 2 7.7× 10 3 ,推导的N’ -端氨基酸序列与豆豉溶栓酶N’ -端氨基酸测序结果完全一致 ,说明克隆到的基因确实是豆豉溶栓酶基因 .同源性分析表明 ,DFE成熟肽编码区的核苷酸和氨基酸序列与日本纳豆激酶的同源性分别为 80 .0 %和 86 .5 % ,这提示豆豉溶栓酶可能是一种新型的溶栓酶 .将表达质粒pET Nde转化E .coliBL2 1(DE3)中 ,IPTG可诱导表达大量的DFE融合蛋白 ,占菌体可溶性蛋白的 4 0 % ,主要以包涵体的形式存在 .图 3表 1参 19     

黑斑蛙Dmrt1基因的克隆及在不同组织中的表达

Dmrt基因家族是新近发现的一个与性别决定相关的基因家族,该家族成员都含有一个新的具有DNA结合能力的保守基序——DM结构域.本文采用简并PCR技术,扩增并克隆了黑斑蛙基因组中的DM结构域,经序列分析,获得了Dmrt家族成员rnDmrt1;进一步根据获得的rnDmrt1序列,设计一对特异引物,采用RT-PCR技术对成蛙不同组织Dmrt1基因的表达进行了研究.结果发现,rnDmrt1只在精巢中特异表达,在卵巢、脑、肝、心、肾及肌肉组织中无表达,显示Dmrt1基因在性别决定和分化中有重要功能. 图4参9     

桃ACC合酶基因组DNA（pACSG01）的序列分析及其表达

以桃基因组DNA为模板，用套式PCR技术扩增并克隆了桃ACC合酶基因片段，将其克隆（定名为pACSG01）并进行序列测定，表明该自然全长1320bp，并富含HindⅢ和EcoRⅠ位点，与其它ACC合酶基因结构序列有一定的相似性，内含有两个内含子，编码的氨基酸序列与已克隆桃ACC合酶cDNA推导的氨基酸序列的同源性分别为57．4％和56．8％，pACSG01与我们已克隆的两个桃ACC合酶cDNA基因表达有所不同，RNA点杂交和RT－PCR结合Southern杂交分析表明，该基因在成熟和乙烯处理的果实均不表达，伤处理、LiCl和生长素处理也不能诱导核基因的表达，在衰老花瓣中也不表达，图3参18。     

D.radiodurans kat A和kat B基因的结构分析与功能鉴定

以简并引物PCR获得的Cat酶基因片段探针，结合生物信息学方法，探明了耐辐射奇球菌（D.radiodu-rans)基因组中存在两个编码过氧化氢酶（Catalase,Cat)的基因：katA和B.katA和katB基因长2277bp和1611bp，各编码758和536个氨基酸，用pKK223-3表达载体连接katB基因，转入Cat酶缺陷型大肠杆菌（E. coliUM2)进行表达.katB基因表达产物具有Cat酶活性，电泳迁移位置与D.radiodurans CatB酶位置相符，并可重建E.coliUM2对低浓度H2O2损伤的耐受力。     

大豆栽培种和野生种豆类胰岛素的基因分析

以栽培大豆和野生大豆的基因组ＤＮＡ为材料,利用ＰＣＲ技术扩增并克隆了豆类胰岛素基因,分析了两者的ＤＮＡ序列．结果表明,测定的ＤＮＡ序列分别为８４１ｂｐ和９０３ｂｐ,有４个核苷酸差异;在信号肽编码区域内各存在一个内含子,大小分别为３６８和３７０个核苷酸;在ＯＲＦ范围内,与前人报导的ｃＤＮＡ序列分别有１个和２个位点的核苷酸差异,从而导致相应位点的氨基酸发生变化．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交表明,栽培大豆和野生大豆的豆类胰岛素基因分别以单拷贝和多拷贝形式存在于基因组中     

基因间隔序列(ITS)在细菌分类鉴定和种群分析中的应用

Use of 16S -23S intergenic transcribed spacer (ITS) variability, as a relatively new method, is becoming an important supplement to the molecular methods based on 16S rRNA for which has a fairly constant size and is not divergent enough to give good separation in close relationships. This paper summarizes the structures and characteristics of ITS regions that are extremely variable in copy number, length and sequence per genome. The ITS region can be amplified easily taking advantage of conserved nucleotide stretches at the 5′of the 16S and 3′of the 23S gene, and the amplicon can contain different amounts of the 16S rDNA by choosing primers at different conserved areas within this gene. These primers are listed and discussed for perfecting the methodology of ITS. Furthermore, some recent progresses on the taxonomy, identification and community analysis of bacteria by means of ITS in epidemiology, ecology and artificial environment are reviewed, as well, the virtues and limitations of that method are discussed. Fig 2, Tab 1, Ref 51     

斜带石斑鱼alpha型与rho型GST基因cDNA全序列的克隆与分析

为从分子水平上研究II相去毒酶谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-transferase,GST)在斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)等海水鱼类机体内代谢去毒过程中的作用及机制,采用RT-PCR及RACE法,分离、克隆得到斜带石斑鱼肝脏alpha-GST(GSTA)、rho-GST(GSTR)基因cDNA全序列.序列分析结果表明,斜带石斑鱼肝脏GSTA基因cDNA全长1008bp,编码223个氨基酸;GSTR基因cDNA全长1002bp,编码225个氨基酸.构建系统进化树发现,斜带石斑鱼与鲤鱼、斑马鱼GSTA氨基酸同源性较高,而GSTR为鱼类所特有并共同占据进化树上独立的分枝,与大鼠、小鼠、人等哺乳动物GST现有所有类型同源性均较低.     

基因枪介导获得转植酸酶基因水稻研究

植酸酶是一类能促进植酸及其盐类水解成肌醇和磷酸的酶的总称.它能提高饲料和食品中磷的利用率,减轻粪便中磷排放所造成的环境污染,清除植酸与金属离子的螯合作用,改善微量元素的吸收和利用.本研究将马铃薯的胞外分泌信号肽(Psec)和大肠杆菌的植酸酶基因(appA2)结合组成融合基因导入粳稻台北309中.PCR检测和Southern杂交表明,植酸酶基因和分泌信号肽序列已经整合到水稻的基因组中.无机磷含量分析表明,含目的基因的转基因水稻种子及茎叶中的无机磷含量均较未转化植株有显著的提高.图6表1参14     

Identification of two alkane hydroxylases involved in long-chain n-alkane degradation by Dietzia sp. DQ12-45-1b北大核心CSCD

The aim of this study was to identify genes involved in long-chain alkane degradation in Dietzia sp. DQ12-45-1b. Functional genes were annotated by genome analysis. Induction of alkane hydroxylase genes by C28 n-alkane was analyzed by using quantitative real-time PCR in wild-type Dietzia sp. DQ12-45-1b and its alkW1 gene knockout mutant strain M 5-5. From the genome of Dietzia sp. DQ12-45-1b, two homologues, G1 and G2 genes were annotated, which showed 50% amino acid sequence similarity with AlmA from Acinetobacter sp. DSM17874, and 48% amino acid sequence similarity with LadA from Geobacillus thermodenitrificans NG80-2, respectively. In addition, G1 showed 71% amino acid sequence similarity with G1a, and G2 showed 34% and 87% amino acid sequence similarities with G2a and G2ß, respectively, which were annotated from Dietzia sp. E1 genome. In addition, the alkW1 gene knockout strain M 5-5 could grow with C28 n-alkane as the sole carbon source, indicating the presence of potential long-chain alkane hydroxylase gene(s) other than alkW1 in Diezia sp. DQ12-45-1b. Accordingly, induction of G1 and G2 genes was observed when Dietzia ap. DQ12-45-1b and alkW1 knockout mutant strain M 5-5 grew with C28 n-alkane as sole carbon source. The results indicated that G1 and G2 genes are mostly responsible for the degradation of long-chain alkanes in Dietzia sp. DQ12-45-1b, which has unique multiple alkane hydroxylase systems.